SCCmecⅢ型MRSA诱导SD大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的研究

目的研究SCCmecIII型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）诱导SD大鼠肺泡巨噬细胞（AM）凋亡的能力。方法荧光显微镜和流式细胞仪分别用于观察和检测MRSA感染AM 2h、6h和12h后Annexin V-FITC/PI染色的凋亡细胞形态和凋亡率,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测凋亡相关基因。结果 AM在MRSA感染后6h和12h时凋亡率与对照组相比差别均有统计学意义（P〈0.01）;感染12h时凋亡相关基因Apaf-1、caspase-9和Bax表达显著上调,Bcl-2mRNA表达显著下调（P〈0.05）。结论 MRSA可通过线粒体通路经多基因参与诱导AM凋亡;AM凋亡的研究可为MRSA肺部感染时AM凋亡分子机制的进一步研究提供基础。     

下一代测序技术在分子诊断中的应用

DNA测序是破译人类疾病的一种强大技术,尤其在癌症方面。飞速发展的下一代测序（next—generation sequencing,NGS）极大降低了测序成本,并且实现了高通量,这使我们可以获得整个基因组的序列,以及那些临床上确诊病人的全部基因组信息。然而下一代测序技术带来诸多益处的同时也带来了挑战,那就是怎样使这个技术在临床诊断中成为常规手段。本文就目前NGS的几大技术平台原理,在临床诊断中的应用,以及目前面临的挑战等进行综述。     

Dimension RxL Max全自动生化分析仪校准程序的建立及应用

目的探讨全自动生化分析仪校准程序的建立及试验方案,以正确评估生化分析仪的检测性能,保证检验质量。方法依据《中华人民共和国医药行业标准YY/T0654-2008———全自动生化分析仪》,并结合《医疗器械注册产品标准YZB/USA 0856-2007———全自动生化分析仪》的要求,建立Dimension全自动生化分析仪的仪器校准程序,通过检测光路系统、加样系统、离子系统、温度控制系统、样本针携带污染率、吸光度稳定性和线性、杂散光等试验,评估仪器性能。结果光路系统、加样系统、离子系统、温度控制系统等8项指标,均符合全自动生化分析仪行业标准和/或制造商的企业标准。结论①按照拟定的校准程序完成仪器校准,综合评估各项指标,证实仪器性能良好,可用于临床生化检验;②经过三个校准周期的应用,各检验项目的室内质控稳定、符合卫生部临检中心室间质评的要求,证明实验室自建的Dimension全自动生化分析仪的校准程序措施有效、方法简易、成本较低,具有很强的实用性,宜于临床实验室推广使用。     

结核分枝杆菌优势蛋白PPE37重组载体的构建及原核表达

目的构建结核分枝杆菌ppe37基因的重组原核表达质粒,并将其转化到E.coli BL21中诱导表达。方法以结核分枝杆菌国际标准株H37Rv基因组DNA为模板,PCR法扩增ppe37基因,将其克隆至pEasyE2克隆载体中,构建pEasyE2-ppe37重组质粒。经双酶切后将ppe37基因片段亚克隆到pET30a载体中,构建重组原核表达质粒pET30a-ppe37,并转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达。利用SDS-PAGE及WesternBlot对表达产物进行鉴定。结果 PCR法扩增出约1600bp的条带。重组质粒pEasyE2-ppe37经PCR及双酶切鉴定构建正确,测序结果与GenBank中登录的PPE37蛋白基因序列一致。重组原核表达质粒pET30a-ppe37经PCR及双酶切鉴定构建正确。SDS-PAGE鉴定表达的组氨酸标签重组蛋白相对分子质量约为50KDa,Western blot验证重组蛋白可与抗组氨酸单抗发生特异性反应。结论成功构建结核分枝杆菌ppe37基因重组原核表达质粒pET30a-ppe37,并成功诱导表达,为PPE37蛋白作为结核病特异性诊断抗原的开发奠定了基础。     

宁夏医疗机构临床实验室现状调查

目的了解宁夏医疗机构临床实验室的现状及存在的问题,为进一步研究提供依据。方法对宁夏各医疗机构临床实验室基本情况进行统一的问卷调查,并对数据进行分类统计。结果汇总分析调查的75家临床实验室的人员学历、年龄、专业、职称构成、设备、设施环境等基本情况、继续教育与科研情况、生物安全管理以及实验室质量管理等情况。结论调查的临床实验室人员职称、学历分布不平衡,高学历、高职称人才匮乏;继续教育现状堪忧;设备、设施情况差异较大;生物安全管理及实验室管理水平参差不齐的情况比较显著。     

母体来源人胎盘间充质细胞的分离培养及其分化能力的研究

目的探讨胎盘母体来源间充质细胞的分离、培养方法及其向脂肪和成骨诱导分化潜能。方法采用酶消化获得母体来源胎盘间充质干细胞体外扩增后,利用流式细胞仪检测其表面标志物;进行诱导分化后,采用油红O及茜素红染色鉴定其向脂肪和成骨诱导分化潜能。结果体外培养的母体来源胎盘间充质干细胞呈长梭形,细胞形态均一;细胞表面标志鉴定：CD73、CD90和CD105呈阳性表达,而CD14、CD34、CD45,和HLA—DR呈阴性表达;细胞诱导分化后,经油红O、茜素红染色证实其可分化为脂肪细胞和成骨细胞。结论建立了母体来源胎盘间充质干细胞的分离培养方法;证实其具有成脂、成骨分化潜能,有望成为细胞治疗及组织工程更为理想的种子细胞。     

血液培养病原菌的分布及耐药性

目的:调查血液培养中病原菌的菌群分布及耐药趋势.方法:1995/2004血液培养标本用荧光全自动血液培养仪(Bactec9120)进行培养,阳性标本用全自动微生物鉴定仪(Vitek-32)进行鉴定,药敏采用K-B法.结果:在6207份血液培养标本中分离出病原菌662株,阳性检出率为10.7%.病原菌以革兰阳性(G )需氧球菌居首位(50.3%),革兰阴性(G-)需氧杆菌次之(44.7%),真菌3.0%,厌氧菌1.1%.血液培养中的G 球菌对万古霉素和亚胺培南较为敏感,G-杆菌对亚胺培南、舒普深、丁胺卡那较为敏感.结论:血液培养病原菌以G 球菌为主,G-杆菌次之;儿童血液培养病原菌以葡萄球菌属为主;亚胺培南对G 球菌和G-杆菌均具有较高的敏感率.     

糖尿病足患者血液流变学改变的研究

目的探讨2型糖尿病合并糖尿病足患者血液流变学改变与病情的关系。方法对168例2型糖尿病患者进行分组,糖尿病足组72例,非糖尿病足组96例,测定全血黏度、血浆黏度、血细胞比容、红细胞沉降率、纤维蛋白原。结果年龄大,病程长,合并糖尿病肾脏疾病、神经病变、视网膜病变、周围血管病变的2型糖尿病患者,糖尿病足发生率高;糖尿病足组全血黏度（高切）、血浆黏度、血细胞比容、红细胞沉降率、纤维蛋白原均升高（P〈0.05）;踝肱指数异常组血液流变学参数较踝肱指数正常组均升高（P〈0.05）。结论血液流变学异常能加重2型糖尿病的微循环障碍,促使糖尿病足的发生。有效地控制血液高黏状态,对防治糖尿病足有重要意义。     

中医药促进甲亢细胞凋亡的研究进展

甲状腺功能亢进症（甲亢）是指由于甲状腺腺体本身功能亢进,合成和分泌甲状腺激素增多所导致的甲状腺毒症。引起甲亢的原因有Graves病（GD）、多结节性甲状腺肿伴甲亢、甲状腺自主性高功能腺瘤、碘甲亢、垂体性甲亢、绒毛膜促性腺激素相关性甲亢。其中以GD最为常见,占所有甲亢的85%左右[1]。     

1460例男性患者性传播疾病病原体荧光定量聚合酶链反应检测分析

目的 了解宁夏某医院门诊男性患者淋球菌(NGH)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(Uu)、单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)、人乳头瘤病毒(HPV6,11)5种性传播疾病(STD)病原体的检出情况,为临床预防提供依据.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应法对1 460例患者进行NGH、CT、Uu、HSV-Ⅱ、HPV6,11病原体DNA定量检测.结果 STD病原体总阳性率为20.34%,HPV6,11、HSVⅡ、Uu、CT和NGH阳性率分别为69.57%、30.00%、24.21%、19.15%和6.32%;21～40岁年龄段患者占86.20%.结论 HPV6,11为男性STD的主要感染因素,应引起全社会的高度重视.