甲状旁腺素受体真核表达载体的构建及稳定转染HEK293细胞系的建立

目的构建小鼠甲状旁腺素受体（PTHR）及其突变受体（DSEL）全长结构基因真核表达载体,建立稳定高表达PTHR及
DSEL的HEK293细胞系,以应用于甲状旁腺素（PTH）模拟肽活性药物筛选及其信号通路的研究。方法通过双酶切、胶回收方
法分别纯化目的片段(PTHR、DSEL基因)和质粒pcDNA3.1（+）,二者分别由DNA限制性内切酶EcoRⅠ与Not Ⅰ双酶切,经T4
DNA Ligase连接的方法将PTHR、DSEL基因克隆到质粒表达载体pcDNA3.1（+）中,采用测序方法及DNA限制性内切酶EcoR
Ⅰ与Not Ⅰ双酶切方法鉴定重组质粒,脂质体转染法将重组体pcDNA3.1（+）-PTHR、pcDNA3.1（+）-DSEL及空质粒pcDNA3.1
（+）分别转染至HEK293细胞,经G418筛选抗性细胞克隆,、RT-PCR及ELISA检测转染细胞PTHR、DSEL的表达情况。结果重
组质粒经基因测序及DNA限制性内切酶EcoRⅠ与Not Ⅰ双酶切证实质粒表达载体pcDNA3.1（+）-PTHR、pcDNA3.1（+）- DSEL
构建正确。重组体经脂质体法转染HEK293 48 h后,经G418筛选3周得到细胞抗性克隆,ELISA检测到PTHR、DSEL基因在
重组质粒表达载体pcDNA3.1（+）-PTHR、pcDNA3.1（+）-DSEL转染的HEK293中成功表达。RT-PCR方法检测到PTHR、DSEL
基因在转录水平的表达。ELISA方法检测到重组质粒转染的HEK293中,加入甲状旁腺激素刺激后,PLC、cAMP蛋白表达量远高
于空质粒pcDNA3.1（+）转染的HEK293中PLC、cAMP的表达。结论成功构建了稳定高表达PTHR、DSEL的HEK293细胞,该
稳定转染细胞系的建立为进一步研究甲状旁腺素受体下游信号通道的分子机制以及筛选其模拟肽作用的活性奠定了实验基础。
     

大脑前动脉发育变异与前交通动脉瘤相关性研究进展

Willis动脉环变异普遍存在,在脑血管病病人中尤为显著,而大脑前动脉缺如是Willis前环最常见的变异,也是导致前交通动脉瘤发生的最重要因素。应用脑血管造影研究大脑前动脉水平段缺如与前交通动脉瘤相关影像特点,有助于清楚地了解前交通动脉瘤发病规律,从而对临床诊疗工作提供重要支持,其相关性需进一步研究。     

颈总动脉中膜厚度与脑梗死之间关系的研究

近几年来脑血管病的发病有逐年增高的趋势,而缺血性脑血管疾病占脑血管病的80％～85％,其发病率高,致残率高,严重地影响着中老年人的身体健康。许多研究表明,大部分缺血性脑血管病的病因是由于颅外段动脉狭窄而不是颅内段动脉的直接狭窄造成的。颈部血管超声的应用就很好的解决了通过对颈动脉硬化的动态观察,对分析脑梗死形成的原因有很大的作用。颈动脉硬化出现的内-中膜增厚及动脉粥样硬化斑块的形成是造成脑血管供血不足甚至是脑梗死的常见病因。本研究应用彩色多普勒超声诊断仪检测颈动脉内-中膜厚度（intima-media thickness,IMT）探讨IMT与脑梗死之间的关系。     

羟基喜树碱联合顺铂和足叶乙甙治疗中晚期非小细胞肺癌39例

目的　评价羟基喜树碱 (HCPT)、顺铂 (DDP)、足叶乙甙 (VP - 16 )联合治疗中晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)的疗效。方法　 39例中晚期非小细胞肺癌采用HCPT +EP方案化疗 ;HCPT 10mg ,静脉滴注 ,d1～ 5;DDP 30mg ,静脉滴注 ,d1～ 5;VP - 16 0 .1g ,静脉滴注 ,d6～10 ;2 1～ 2 8d为 1周期 ,连用 3个周期后评定疗效。结果　 39例中PR 2 0例 ( 51.2 8% ) ,SD 16例 ( 4 1.0 2 % ) ,PD 3例 ( 7.6 9% ) ;毒副反应为恶心、呕吐、血象下降和脱发。结论　HCPT +EP方案是治疗中晚期非小细胞肺癌较有效的方案     

慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化的临床特点及意义

目的总结慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺间质纤维化的临床特点及意义,并探讨其临床诊断标准.方法对近5年来临床确诊的24例COPD合并肺间质纤维化病例进行临床与影像学的回顾性分析研究,其中哮喘1例,慢支肺气肿8例,肺心病15例.结果COPD合并肺间质纤维化的临床表现多数界于上述两种病变之间,X线及CT兼具二者特点,肺纤维化病变在肺心病组多见.结论COPD合并肺间质纤维化具有其独特的临床与影像学特征,其中临床症状及胸片是诊断的重要线索,HRCT是临床确诊的最佳方法.     

子宫动脉栓塞治疗产后出血的临床价值

目的 探讨超选择性子宫动脉栓塞治疗产后出血的安全性和疗效方面的优点与价值. 方法 采用seldinger技术穿刺股动脉入路,行超选择性子官动脉插管及DSA血管造影后.采用脉冲式栓塞;所有患者术中及术后不用官缩剂和止血剂. 结果 28例产后出血患者均被安全迅速止血;术后随访6个月,无复发出血及严重的并发症发生. 结论 超选择性子宫动脉栓塞治疗产后出血具有创伤小,安全迅速、并发症少等优点.有较好临床应用价值.     

人工智能辅助诊断儿童发育性髋关节发育不良的临床应用

目的 开发一种用于辅助诊断儿童发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip,DDH)骨盆前后位X线片深度学习系统,并分析其临床应用的可行性.方法 收集我院自2014年4月至2018年12月共10219张骨盆前后位X线片,通过影像PACS系统用统一的标准进行标注.所有X线片按...     

肛肠疾病术后止痛研究进展

由于肛门部神经丰富、感觉敏锐,对各种疼痛刺激敏感。因此,肛肠疾病术后疼痛,特别是术后排大便时肛门剧烈疼痛,一直是肛肠科医生感到非常棘手的问题,也是肛门疾病患者术后的主要症状,给患者带来了很大的痛苦,急待医者解决。近年来很多医家对肛门疾病止痛进行了大量的研究,取得了巨大的成果。现就近年来相关报道综述如下。1骶管注射止痛李氏[1]采用0.2%美兰骶管注射用于术后止痛患者30例,并设对照组30例。两组术前均肌注鲁米那0.1g、阿托品0.5 mg。随机将病人分为两组,各30例,美兰组用利多卡因200mg 丁卡因30mg 美兰40mg 生理盐水至20ml;对照…     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin表达的影响及机制

目的探讨霉酚酸酯(Mycophenolate mofetil,MMF)对糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin蛋白表达的影响及机制。方法建立链脲佐菌素诱导的单侧肾切除大鼠糖尿病模型,将模型大鼠随机分成糖尿病组(DM组)与MMF给药组(DM+MMF组,10mg·kg-1.d-1灌胃给药),另设对照组(C组)。8wk末检测血糖、24h尿白蛋白排泄率(AER)变化,通过免疫组化方法检测肾组织ED-1表达,Westernblot方法检测肾组织Nephrin、Podocin、白细胞介素-1(IL-1)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达。结果DM组大鼠尿AER明显高于C组(P<0.01),DM+MMF组大鼠尿AER明显低于DM组(P<0.05)。DM组大鼠肾小球ED-1阳性细胞数明显高于C组(P<0.01),DM+MMF组肾小球巨噬细胞浸润明显低于DM组(P<0.05)。DM组肾组织Nephrin与Podocin表达较C组分别下降80.2%与65.1%,MMF可明显恢复肾组织Nephrin与Podocin表达(P<0.01)。DM组肾组织IL-1与TNF-α表达较C组分别增加2.8倍与3.8倍,MMF可明显降低肾组织IL-1与TNF-α表达(P<0.01)。结论MMF可能通过恢复糖尿病大鼠肾组织Nephrin与Podocin蛋白表达减少尿白蛋白排泄。     

广藿香GAP标准操作规程(SOP)

广东省药监局、广东省中药研究所于1997年对广东省地道药材广藿香主产区进行调研，在此基础上于1999年与吴川市中药加工厂率先在吴川市建立广藿香GAP试点基地。三年后，已为建立广藿香GAP基地和制定广藿香SOP提供科学依据。本标准操作规程适用于吴川市及其周边广藿香生产基地。 1 引用标准 (1)GB3095—1996 大气环境质量二级标准；(2)GB9137-1998大气污染物最高允许浓度标准；(3)GB15618-1995土壤环境二级标准；(4)GB5084-1992农田灌溉水质标准；(5)……