p53、c-erbB-2和PCNA蛋白表达与大肠癌生物学行为的关系

目的　探讨 p5 3、c erbB 2、PCNA蛋白的表达与大肠癌的临床病理意义以及其对大肠癌预后判断的价值。方法　应用免疫组化技术对 5 3例大肠癌进行上述指标的表达及对比研究。结果　大肠癌p5 3、PCNA、c erbB 2阳性表达分别为 5 2 .83%、96 .2 3%、5 4 .72 %。p5 3、PCNA、c erbB 2共同阳性表达率为 37.74 % ,与大肠癌患者年龄、性别、发病部位、纤维的增生程度、淋巴细胞的浸润及组织学类型无关 (P >0 .0 5 ) ,与癌组织的浸润深度、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。纤维组织的增生程度与癌组织浸润程度呈负相关 (r1=- 0 .4 2 13,P <0 .0 5 )有参考价值。结论　p5 3、c erbB 2、PCNA的联合检测对判断大肠癌预后有参考价值。     

萘酚AS-TR磷酸酯法酸性磷酸酶染色在肌病诊断中的应用

酸性磷酸酶(acid phosphatase, ACP)主要位于机体各组织中的溶酶体内,吞噬细胞胞质内也含有丰富的ACP.此酶在酸性条件下催化醇和酚类磷酸酯的水解,最适合的pH为4.8～5.2.显示ACP的常用方法有Leder and Stutt改良萘酚AS-TR磷酸酯法与Holtgn Bitensky改良磷酸铅法.现笔者选用改良萘酚AS-TR磷酸酯法应用于骨骼肌活检标本的病理诊断中,效果满意,值得推广应用,现报告如下.     

弹力纤维染色与免疫组织化学双重染色技术

我们采用Gomori醛品红弹力纤维染色法和免疫组织化学SP法结合的双重染色方法 ,可同时显示血管壁上的弹力纤维和某些抗原成分 ,效果满意 ,介绍如下。一、材料与方法1.材料 :大鼠髂动脉粥样硬化标本 35份 (例 ) ,经 4 %甲醛固定 ,常规脱水、石蜡包埋 ,切片厚 5 μm。2 .试剂 :(1)醛品红染液 :碱性品红 0 .5g ,70 %乙醇10 0ml,浓盐酸 1ml,三聚乙醛 1ml,将碱性品红溶于 70 %乙醇 ,然后加入浓盐酸混合均匀后 ,加入三聚乙醛 ,轻轻摇动使混合均匀 ,于室温下静置 2d ,成熟时呈深紫色。过滤于小口砂塞瓶 ,置冰箱备用。 (2 ) 70 %乙醇。 (3)免疫组织…     

骨巨细胞瘤的细胞生物学

目的 探讨骨巨细胞瘤中多核巨细胞和单核基质细胞的起源及在肿瘤中的作用,方法 应用免疫组织化学方法检测50例骨巨细胞瘤手术标本的增殖细胞核抗原（PCNA）、巨噬细胞抗原（CD68）、波形蛋白、抗糜蛋白酶（AACT）、抗胰蛋白酶（ACT）以及溶菌酶的表达和分布状况。结果 多核巨细胞主要表达CD68、AACT、ACT以及溶菌酶,无一表达PCNA;单核基质细胞可分为两种类型,以纤维母细胞型占优势,主要表达波形蛋白和PCNA;组织细胞型主要表达CD68、AACT、ACT以及溶菌酶。结论 多核巨细胞并非肿瘤细胞,它可能来自单核巨噬细胞系统,单核基质细胞中的纤维母细胞型为肿瘤的主要增殖成分,可能来自间充质。     

APEX1单核苷酸多态性与肝癌易感性关系的研究

目的 探讨中国福建人群APEX1单核苷酸多态性(SNP)与肝细胞癌(HCC)易感性的关系. 方法 应用连接酶检测反应(LDR)及直接测序法检测APEX1 rs2307486、rs1130409及rs33956927 3个SNP位点,并进行连锁不平衡及单倍型分析,探讨3个SNP在福建HCC人群中的分布情况,并分析其与该人群HCC易感性的关系. 结果 相对于GG基因型,rs33956927位点的GA基因型增加了患HCC的风险(P=0.002),而rs2307486和rs1130409多态性与HCC易感性无关(P＞0.05). 结论 APEX1 rs33956927多态位点携带GA基因型人群可能对HCC更易感,APEX1 rs33956927多态性可作为筛查HCC好发的危险因素;rs2307486和rs1130409多态性与HCC的发生无关.     

兔骨折血肿细胞的体外培养及诱导分化

目的　建立一种体外培养骨折血肿细胞方法,探讨血肿细胞的成骨潜力。　方法　体外分离、纯化兔骨折血肿细胞,置于3种不同培养液中,观察比较细胞生长情况;用条件培养液诱导血肿细胞定向分化,检测细胞的碱性磷酸酶和骨钙素的表达。　结果　(1)经3种不同培养液培养的兔骨折血肿细胞在P1和P2 时生长和增殖情况无明显差别,P4以后生长速度有明显差异(P <0 .0 1) ;(2 )血肿细胞在αMEM培养液中增殖活跃,诱导分化后细胞碱性磷酸酶为阳性,对照组为阴性,少量为弱阳性;经条件培养液培养的血肿细胞骨钙素含量高于未加诱导剂培养的细胞(P <0 .0 1)。　结论　兔骨折血肿细胞在体外合适的条件下,生长稳定,有较强的增殖能力,具有肯定的成骨能力。     

牙体硬组织教学磨片制作方法的改进

牙磨片的制作必须经过离体牙固定、消毒、片切、磨薄、脱水以及透明和封固等工序.片切是牙磨片成功和提高效率的关键,目前该步骤的方法有手工法和锯式切片机法,锯式切片机法因设备昂贵,耗材消耗大且价格高等因素不被实验教学广泛采用.手工法按常规的方法是单个金刚石磨片切割牙齿,每片需切割2次,不仅厚薄难掌握,易破损残缺,且在操作过程中易使牙片飞出伤人,成为安全隐患.笔者在武峪峰等[1]的研究基础上再进行改进,现介绍如下.     

人肝病变组织低分子量角蛋白CK19的表达

目的研究低分子量角蛋白CK19在人肝细胞癌、肝癌前病变、肝硬化组织中的表达状况及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测56例肝细胞癌、8例肝硬化及9例正常肝组织中CK19的表达。结果56例肝细胞癌组织中26例CK19表达阳性,显著高于对照组(P<0.001),癌组织CK19多分布于腺样型或梁索型肝细胞癌。癌旁不典型增生组中异型增生细胞及卵圆细胞的CK19表达率(51.9%)显著高于癌旁非不典型组中肝细胞的表达率(17.2%),但与肝癌组织的表达率差别不大。肝硬化组中CK19的表达率为37.5%(3/8),阳性细胞均为卵圆细胞及异型增生细胞。结论肝细胞癌和增生的卵圆细胞及异型增生肝细胞表达CK19,提示CK19可做为判断肝细胞异型增生的一个指标。肝细胞癌CK19表达与其组织学类型有密切关系。     

TUNEL技术在检测胃粘膜组织细胞凋亡中的应用

原位凋亡检测是近些年发展起来的细胞凋亡检测技术 ,包括 DNA聚合酶 I、KL enow酶催化的原位末端标记技术和末端脱氧核苷酸转移酶 (Td T)介导的 d U TP缺口末端标记(TU NEL )技术 ,后者目前被广泛采用。但因福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片进行 TU NEL染色还存在一些问题 ,笔者对组织切片进行染色前的处理 ,介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　胃粘膜组织 ,常规石蜡包埋 ,4μm切片 ,原位末端标记试剂盒 (德国宝灵曼公司 )。1.2　方法 　 (1)常规脱蜡水化 ,蒸馏水洗 5 m in。 (2 )加入蛋白酶 K(2 0 μg/ m l,溶于 p H7.4～ 8.0…     

原癌基因蛋白质C-erb B-2及增殖细胞核抗原在结肠癌中的定量检测及临床意义

目的探讨原癌基因蛋白质C-erb B-2及增殖细胞核抗原(PCNA)在结肠癌中含量及与结肠癌生物学行为的关系.方法利用免疫组织化学及自动化图像分析技术定量检测C-erb B-2及PCNA在10例正常肠粘膜,30例结肠腺瘤,53例结肠癌中的表达.结果阳性总面积、积分光密度、平均光密度、阳性率1、平均光密度1及半定量测定的阳性率等6个参数值均按正常肠粘膜→Ⅰ级不典型增生腺瘤→Ⅱ级不典型增生腺瘤→Ⅲ级不典型增生腺瘤→腺癌的顺序呈递变趋势,伴有淋巴结转移的腺癌组中,上述各参数值明显增高.结论C-erb B-2及PCNA一起可作为判断肿瘤的恶性程度及评价预后的指标,应用图像分析技术对结肠癌及癌前病变进行多指标多参数的计量分析,具有鉴别诊断的重要意义,为结肠癌的早期诊断提供客观依据.