Cx43和GFP双基因共表达重组腺病毒载体的构建和鉴定

目的构建间隙连接蛋白43（Cx43）和绿色荧光蛋白（GFP）双基因共表达重组腺病毒载体。方法利用PCR方法从真核表达载体pcDNA3.0-Cx43扩增Cx43片断,利用DNA重组技术,将目的基因Cx43克隆至含有报告基因GFP的穿梭质粒pAdTrack-CMV,然后在BJ5183细胞中将重组穿梭质粒pAdTrack-Cx43与pAdeasy-l质粒进行同源重组,产生重组腺病毒载体pAd-Cx43-GFP,用PacⅠ单酶切鉴定重组载体;将pAd-Cx43-GFP转入293细胞中包装,荧光显微镜观察报告基因GFP的表达,Western blot方法检测293细胞中Cx43表达。结果（1）通过PCR方法从载体pcDNA3.0-Cx43扩增出单一条带,与Cx43片断大小相符;（2）重组穿梭质粒pAdTrack-Cx43经NotⅠ/XhoⅠ双酶切后,电泳可见2个大小约为9、1kb条带,证明pAdTrack-Cx43构建成功;（3）同源重组产物pAd-Cx43-GFP经PacⅠ酶切后,电泳可观察到2个大小约为31、4kb左右条带,与预期结果相符,提示同源重组成功;（4）荧光显微镜下观察可见转染pAd-Cx43-GFP后293细胞在培养1-2d即有绿色荧光表达;（5）利用WesternBlot法检测到转染pAd-Cx43-GFP后293细胞中Cx43的表达较未转染组增强。结论Ad-Cx43-GFP重组腺病毒载体构建成功。     

床上我要温柔，不要生猛

新婚之夜，我才发现平常酷酷不爱说话的先生阿嘉，竟是个“色情狂”，我很害怕，我来自一个保守的知识分子家庭，从小就接受父母的各种“安全教育”，找男友要“不好色的”，怎么也想不到会碰到这等男人，其实，平常的他一点也不轻浮，甚至有点冷。     

多种检测方法在子宫颈癌及癌前病变筛查中的应用评估

目的评估多种检测方法在子宫颈癌及癌前病变筛查中的应用价值及可行性，为子宫颈癌筛查方案提供依据。方法对子宫颈癌高发区江西省修水县大桥乡妇女进行以人群为基础的研究，对已登记的2499名年龄为30～49岁农村已婚妇女分别做人乳头瘤病毒（HPV）检测、新柏氏薄层液基细胞学（TCT）、醋酸染色后肉眼观察（VIA）、碘染色后肉眼观察（VILI）以及电子阴道镜检查。全部检查方法均以独立、双盲方式进行。对VIA、VILI及电子阴道镜三项检查中任何一项存在子宫颈可疑病变的妇女行子宫颈活检；对以上三项检查均未发现可疑病变，但子宫颈脱落细胞HPV阳性或TCT结果阳性（ASCUS以上级别）的妇女，2周后给予子宫颈活检。观察HPV、TCT、VIA、VILI、电子阴道镜等筛查方法单独使用或联合使用进行子宫颈癌及其癌前病变筛查的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。宫颈组织病理诊断均经国际癌症研究所病理确诊。筛查时将病理诊断为子宫颈上皮内瘤变（CIN）1级（CINl）纳入阴性结果，将CIN2以上（包括CIN2）病变纳入阳性结果。宫颈细胞学按TCT（thinprep cytology test）标准制片，细胞学诊断按照2001年TBS（The Bethesda System）细胞病理分类标准判读诊断。结果2499名受检妇女中，2432名纳入研究（67名妇女因HPV或TCT阳性未行活检故未列入统计），其中HPV阳性妇女387例；TCT阳性妇女153例。宫颈活检病理诊断共检出CIN及子宫颈癌99例，其中CIN237例，CIN359例，宫颈癌3例。HPV、TCT、HPV＋TCT、VIA、VILI、VIA＋VILI、阴道镜检等筛查方法的敏感度分别为96．67％、89．47％、97．98％、56．57％、36．36％、63．64％、39．39％。特异度分别为85．00％、96．91％、86．97％、94．60％、96．23％、92．97％、98．14％。结论HPV＋TCT用于宫颈癌及癌前病变筛查的敏感度高于其他筛查方法。     

小儿抽动障碍与A组溶血性链球菌感染的关系

目的:近年来国外研究表明一部分小儿抽动障碍的病因与链球菌感染有关,存在免疫功能的异常。本文重点探讨小儿抽动障碍与A组溶血性链球菌感染的关系。方法:采用溶血法和抗链球菌脱氧核糖核酸酶B微量中和法,测定109例抽动障碍病儿和20例非感染性疾病对照组ASO(抗链球菌溶血素O)和抗链球菌脱氧核糖核酸酶B(ADNaseB)抗体,以确定链球菌感染。结果:对照组链球菌感染率15%(3/20),短暂性抽动组13%(9/69),慢性抽动和抽动秽语综合征组为42%(17/42),后者与前两组比较差异显著(P<0.05)。结论:部分慢性抽动和抽动秽语综合征的病因与A组溶血性链球菌感染有关。     

中晚期宫颈癌同步放化疗的临床观察

目的探讨中晚期宫颈癌同步放化疗的耐受性和毒副反应.方法2004年2005年我院开展了中晚期宫颈癌同步放化疗治疗患者54例,组织学类型为鳞癌81.48%(44/54),腺癌18.51%(10/54),Ⅱb期34例,Ⅲ期18例,Ⅳ期2例.全部病例采用体外照射和腔内近距离照射的联合放疗方案,同步应用DF化疗方案.体外照射采用6MV-X线,前后野对穿照射,常规分割每周5次,每次2Gy,外照射全盆腔剂量24Gy～30Gy/2W～3W,盆腔野挡铅4×10cm～17cm,加腔内近距离治疗.腔内近距离治疗每次A点剂量5Gy～6Gy,腔内照射当日不作体外照射,共5次～7次,腔内照射A点总量25Gy～42Gy.体外和腔内照射A点总量为70Gy～82Gy,B点总剂量50Gy～70Gy,总疗程6周～8周.与放化疗开始之日常规应用升白胺3片,3次/天,至疗程结束.结果达CR者49/54(90.74%),PR者5/54(9.25%).放疗结束宫颈刮片阴性52/54(96.29%).本组病例治疗后均满2年,2年总生存率77.78%.本组宫颈癌患者同步放化疗副反应主要为肠道反应、泌尿系统反应、血液学毒性.急性放射性直肠反应全组发生率为46.30%(25/54),其中18例(72%)为轻度,7例(24%)为中度,全组病例无直肠阴道瘘发生.血液学毒性主要表现为白细胞下降,RTO G1级9例(16.67%),RTO G2级5例(9.25%),无3级以上毒性反应.结论中晚期宫颈癌同步放化疗具有较好的临床耐受性,两年生存率达77.78%.通过改进外照射方式(如IMRT),降低单次腔内治疗剂量(小于6Gy),将会减轻肠道副反应.     

中晚期宫颈癌同步放化疗的临床观察

目的：探讨中晚期宫颈癌同步放化疗的耐受性和毒副反应。方法：2004年2005年我院开展了中晚期宫颈癌同步放化疗治疗患者54例，组织学类型为鳞癌81．48％（44／54），腺癌18．51％（10／54），Ⅱb期34例，Ⅲ期18例，Ⅳ期2例。全部病例采用体外照射和腔内近距离照射的联合放疗方案，同步应用DF化疗方案。体外照射采用6MV-X线，前后野对穿照射，常规分割每周5次，每次2Gy，外照射全盆腔剂量24Gy-30Gy／2W-3W，盆腔野挡铅4&#215;10cm-17cm，加腔内近距离治疗。腔内近距离治疗每次A点剂量5Cy-6Gy，腔内照射当日不作体外照射，共5次-7次，腔内照射A点总量25Gy-42Gy。体外和腔内照射A点总量为70Gy-82Cy，B点总剂量50Gy-70Gy，总疗程6周-8周。与放化疗开始之日常规应用升白胺3片，3次／天，至疗程结束。结果：达CR者49／54（90．74％），PR者5／54（9．25％）。放疗结束宫颈刮片阴性52／54（96．29％）。本组病例治疗后均满2年，2年总生存率77．78％。本组宫颈癌患者同步放化疗副反应主要为肠道反应、泌尿系统反应、血液学毒性。急性放射性直肠反应全组发生率为46．30％（25／54），其中18例（72％）为轻度，7例（2，4％）为中度，全组病例无直肠阴道瘘发生。血液学毒性主要表现为白细胞下降，RTOG1级9例（16．57％），RTOG2级5例（9．25％），无3级以上毒性反应。结论：中晚期宫颈癌同步放化疗具有较好的临床耐受性，两年生存率达77．78％。通过改进外照射方式（如IMRT），降低单次腔内治疗剂量（小于6Gy），将会减轻肠道副反应。     

3种G-CSF动员224例外周血干细胞效果比较

目的比较3种粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对外周血干细胞的动员效果。方法我科自体外周血干细胞移植病人224例,采用3种粒细胞集落刺激因子(吉赛欣、欣粒生、惠尔血)进行外周血干细胞动员,对干细胞动员情况、干细胞质量、移植后造血重建和药物毒副作用进行比较。结果224例病人全部移植成功,其动员效果、干细胞质量及在移植后造血重建中的临床效果差异均无显著性,毒副作用小。结论吉赛欣和欣粒生两种国产制剂及惠尔血能可靠用于外周血干细胞动员及造血重建,尤其是国产制剂的价格明显低于进口产品,在有效保证动员效果的同时大大减轻了病员的经济负担,值得临床应用推广。     

急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接功能的研究

目的：研究急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接的功能方法：体外培养正常（正常对照组）及急性淋巴细胞白血病（急淋组）原代骨髓基质细胞,采用细胞免疫组化法及计算机灰度检测观察两组之间Connexin 43表达的变化,采用细胞划痕染料传输技术比较两组之间缝隙连接细胞间通讯（GJIC）功能的差异。结果：急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞Connexin 43的表达较正常骨髓基质细胞明显减低,GJIC功能减弱。结论：急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接功能下降可能与白血病骨髓造血微环境功能异常有关。     

榄香烯诱导HL-60细胞程序死亡

药物学研究表明诱导肿瘤细胞程序死亡／凋亡(apoptosis)可能是许多化疗药物杀伤肿瘤细胞的机制之一，细胞凋亡与细胞坏死有本质区别，凋亡的特征有质膜保持完整性，核染色质固缩，内源性核酸内切酶激活将染色质DNA降解成寡聚核小体，电泳带谱表现为特征性梯状带。榄香烯(elemene)系我国自行研制的抗癌新药。     

泵控药物灌注系统及其在头颈部恶性肿瘤动脉化疗方面的应用（简讯）

泵控药物灌注系统及其在头颈部恶性肿瘤动脉化疗方面的应用（简讯）杭州市邵逸夫医院肿瘤外科（３１００１６）高力，郑树，杨明达迄今动脉化疗多采用推注给药，此法虽能提高局部区域药物浓度，但终为一过性，肿瘤吸收有限，大部分药物旁流后转入循环，不能在局部做循环建...