原位PCR对弓形虫感染鼠病理检测效果的观察

观察原位PCR方法在弓形虫感染病原学检测中的效果。以RH株弓形虫速殖子感染小鼠后第 2、 4、 6天处死 ,取肝脏制备石蜡标本及冰冻切片标本 ,以直接法原位PCR扩增并检测石蜡标本中的弓形虫DNA ,与免疫组化方法检测冷冻切片标本的结果相比较。 18例直接原位PCR法检测标本中均得到阳性信号 ,病原体检出率为 10 0 % ,优于免疫组化法 (11/18)。直接法原位PCR为检测病理标本中的弓形虫DNA提供了一种新的可行方法。     

电磁脉冲对大鼠学习能力的影响及防护研究

目的 观察不同场强的电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)照射对大鼠学习能力的影响,并采取一定的屏蔽措施,探讨其物理防护作用。方法Wistar大鼠45只,随机分为4组,分别为60 kV·m-1照射组、20 kV·m-1照射组、物理防护组和对照组;物理防护组在镀铜织物防护布的屏蔽下接受60 kV·m-1照射,对照组接受相同时间的伪照射;各组于照射后即刻开始进行连续8 d的穿梭箱训练,记录每天的成绩,绘制学习曲线。结果 EMP照射后,60 kv·m-1照射组的主动回避反应(AV)次数明显降低,第8天分别较对照组和物理防护组下降24.1％和22.4％(P<0.05);20 kV·m-1照射组的AV值也低于对照和物理防护组,但差别不显著(P>0.05)。60 kv·m-1照射组的被动逃避反应(ESC)及主动回避反应潜伏期(AVLAT)则明显增高,第8天分别较对照组和防护组增高62.7％和53.9％,以及69.7％和1 9.5％(P<0.05)。各组间的被动逃避反应潜伏期(ESCLAT)无统计学差异。结论EMP照射可抑制大鼠的学习能力,表现为条件反射形成滞后和主动反应潜伏期延长,而且此效应存在一定的量效关系,表现为60 kv·m-1场强EMP作用明显,而20 kV·m-1场强EMP作用较弱;物理防护可较有效地减轻上述损伤效应。     

黑绛丹治疗60Co射线照射致大鼠放射性皮炎的疗效评价

目的 探讨中药黑绛丹对大鼠Ⅳ度放射性皮炎的疗效及创面组织形态学和胶原变化的影响. 方法 60Co射线6 000cGy一次照射雌性Wistar大鼠,建立Ⅳ度放射性皮炎模型,将48只造模成功大鼠随机分为4组,每组12只.各组大鼠创面分别外敷黑绛丹、重组人表皮生长因子( rhEGF)外用溶液、Trolox治疗液、生理盐水,另设空白组12只,予生理盐水外敷创面,各组均每天治疗1次,连续治疗21天.分别于第1、6、11、16、21天测量各组大鼠创面面积,并在第11、21天创面组织取材并进行HE染色、维多利亚蓝十丽春红S双重组合染色和天狼猩红染色,观察创面组织形态学及胶原变化.结果 第6、11、16、21天,黑绛丹组和rhEGF组大鼠创面面积均小于模型组(P＜0.05);黑绛丹组创面面积小于Trolox组(P＜0.05),但大于rhEGF组(P＜0.05).治疗21天后黑绛丹组大鼠创面组织炎症细胞少于模型组,弹力纤维、胶原纤维以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原较模型组增多.结论 黑绛丹能加速大鼠Ⅳ度放射性皮炎创面的愈合,减轻创面的炎症反应,促进弹力纤维和胶原的修复.     

抗辐灵对微波辐射致大鼠精子损伤的防治作用

目的探讨抗辐灵对微波辐射致大鼠精子损伤的防治作用。方法 100只Wistar雄性大鼠,随机分为:正常对照组、辐射对照组、1 g/(kg.d)抗辐灵组、2 g/(kg.d)抗辐灵组和4 g/(kg.d)抗辐灵组,30 mW/cm2微波全身辐射10 min,于辐射前7 d灌胃给予1、2和4 g/(kg.d)抗辐灵水溶液,每天1次,连续14 d。分别于停药后6 h(辐射后7 d)、7 d(辐射后14 d)、14 d(辐射后21 d)处死大鼠,SCA精子动态分析系统检测大鼠精子活力参数,HE染色观测精子畸形率。结果 30mW/cm2微波辐射后7 d,大鼠精子畸形率升高(P<0.05);停药后6 h各剂量药物组精子畸形率较辐射组明显降低(P<0.05或P<0.01)。30 mW/cm2微波辐射后14 d大鼠精子活动率(AR)和A+B级精子比例明显减少(P<0.05),D级精子比例明显增加(P<0.05),精子畸形率增加(P<0.05)。停药后7 d;2和4 g/(kg.d)抗辐灵组精子活动率(AR)和A+B级精子比例较辐射组明显增加(P<0.05或P<0.01),D级精子比例降低(P<0.05),精子畸形率降低(P<0.05)。结论 30 mW/cm2微波辐射可引起大鼠精子损伤,表现为精子活动率减少和精子畸形率增加,抗辐灵具有明显防治微波辐射损伤的作用。     

微波辐射对大鼠大脑皮质突触体结构功能影响

目的探讨微波辐射对大鼠大脑皮质突触体及神经递质释放影响。方法采用30和50mW/cm2微波对大鼠大脑皮质突触体进行辐射;采用流式细胞仪和电子自旋共振仪检测辐射后突触体内Ca2+浓度和膜蛋白流动性;高效液相色谱仪和分光光度法检测氨基酸和乙酰胆碱递质释放量。结果 30mW/cm2微波辐射后突触体内Ca2+浓度为(36.96±1.01),明显高于对照组(P0.01);膜蛋白强弱固定化比为(0.278±0.022),高于对照组(P0.05);突触体谷氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸释放明显减少(P0.05或P0.01);50mW/cm2微波辐射后,突触体天门冬氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸释放明显增加(P0.05或P0.01);辐射后突触体乙酰胆碱释放明显增加(P0.01)。结论微波辐射可引起大脑皮质突触体结构和功能损伤,氨基酸和乙酰胆碱递质释放量发生变化。     

大鼠NR2B基因核心启动子区单核苷酸多态性研究

 目的:对大鼠NR2B基因核心启动子区进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)筛查及分析.方法:提取16只健康SD大鼠海马组织基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增NR2B基因核心启动子区序列和SNP库已报道的rs8169392所在区域序列,结合DNA测序方法进行SNP筛查和验证.结果:在大鼠NR2B核心启动子区705bp中,发现1个新的SNP位点,为-217位C/T多态;本研究中未筛查到NCBI-SNP库报道的rs8169392.结论:-217位C/T多态的发现为NR2B基因多态性数据库提供了新信息.     

孕期及哺乳期不同含量n-3多不饱和脂肪酸对子代成年期小鼠海马神经细胞凋亡相关因子的影响

目的观察母孕期及哺乳期不同含量n-3多不饱和脂肪酸（PUFAs）饲料对成年期仔鼠脑神经细胞凋亡的影响。方法使用6～8W龄清洁级C57BL／6J雌性小鼠,随机分为5组,每组10只,分别给予n-3 PUFAs缺乏和3种不同比例n-6／n-3PUFAs（n-6／n-3PUFAs比值分别为15：1、5：1、1：1）饲料及1种高含量鱼油n一3PUFAs饲料（n-6／n-3PUFAs比值为1：5）喂养。小鼠12～14W龄时雌雄合笼交配繁殖,仔鼠断乳后继续行母鼠相同饲料喂养,选取生后3m成年仔鼠用于实验。取脑进行组织固定,采用免疫组织化学技术对脑组织海马区Bcl-2和BaX表达进行定量分析。结果与n-3PUFAs缺乏组相比,n-3PUFAs饲料喂养组,尤其是13—6／n-3PUFAs比值（5：1）和（1：1）组小鼠海马CA3区神经细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加（P〈0．05）,而致凋亡蛋白Bax表达则显著降低（P〈0．05）。但高含量鱼油n一3PUFAs喂养组（即n-6／n-3PUFAs1：5组）与n一3PUFAs缺乏组相比未表现出显著性差异。结论孕期及哺乳期添加13—3PUFAs,尤其是n～6／n-3PUFAs比值在5～1：1之间时有助于减少成年仔鼠脑组织神经细胞凋亡的发生,而过高含量n-3PUFAs摄入则未对脑凋亡发生起到积极作用。     

安多霖对微波辐射致大鼠生殖远后损伤的保护作用研究

目的探讨安多霖对微波辐射致大鼠生殖远后损伤是否有保护作用及有效剂量。方法二级Wistar雄性大鼠80只,随机分为4组,即正常对照组、辐射对照组、1．5g安多霖组、3．0g安多霖组,采用30mW／cm^2微波辐射大鼠,于辐射前14d开始灌胃给药,每天1次,连续14d,安多霖组给药量（给药浓度）为1．5g／（kg·d）和3g／（kg·d）;正常对照组和辐射对照组给予等比体积的蒸馏水。各组大鼠分别于辐射（停药）后1m、3m用1％戊巴比妥钠（30mg／kg）经腹腔注射麻醉处死大鼠,利用精子动态分析系统分析精子活动度,HE染色观测并计数精子畸形率,光镜和电镜观察睾丸形态结构。结果（1）30mW／cm。微波辐射后1m,精子活动度明显减少,D级精子比例增加,睾丸组织生精上皮疏松,偶见变性和坏死的脱落细胞,生精细胞核染色质分布不均,退行性病变,线粒体肿胀空化。（2）停药后1m,与辐射对照组相比,1．5g安多霖预防组,C级精子比例增加（P〈0．01）;3g安多霖组精子A级、A＋B级精子比例增加、C级和D级精子比例减小（P〈0．01）,活力参数曲线速度（VCL）、直线速度（VSL）、平均速度（VAP）、平均振幅（ALH）均明显升高（P〈0．05或P〈0．01）;睾丸组织结构和超微结构明显改善。结论30mW／cm^2微波辐射可致大鼠生殖功能和结构远后损伤,表现为精子的活动度下降;睾丸组织生精上皮疏松、精原细胞染色质分布不均,退行性病变。预防应用1．5g和3g／（kg·d）对上述损伤具有一定的保护作用,1．5g／（kg·d）为有效剂量。     

中药注射液血必净联合激素防治鼠百草枯中毒后的肺损伤

目的 探讨中药注射液血必净联合激素对大鼠百草枯中毒急性慢性肺损伤的防治作用及可能机制.方法 雄性Wistar大鼠120只平均随机分六组,每组20只:正常组(A),中毒组(B),治疗组(C,D,E,F).除A组予等量生理盐水外,其余各组予20%百草枯(PQ)100 mg/kg腹腔汴射(ip)染毒2 h后,C,D,E,F组分别予血必净(1.25 g/kg)、血必净(2.5 g/kg)、地塞米松(25 mg/kg)、血必净(2.5g/kg)+地塞米松(25 me/kg),ip,A,B组予等量生理盐水治疗,1次/d,至处死,而28 d处死者治疗7 d.观察各组大鼠反应,丁染毒后2,3,4 d每组每大各处死5只,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及3 d动脉血气、肺系数;于28 d处死剩余鼠,测定肺匀浆羟脯氨酸(HYP)、血清TCF-β1.A,B,F组行3 d,28 d肺病理检查.结果 治疗组巾毒症状较B组轻,F绀最轻;各治疗组不同时间点SOD,MDA及血气,TGF-β1,HYP较B组佳,治疗组巾F组最佳,其中B,F组的3 d时的SOD,MDA及28 d时的HYP,TGF-β1分别为(37.47±13.00)nmol/mL,(91.86±21.35)nmol/mL;(11.34±3.07)nmol/mL,(5.63±1.58)nmol/mL;(2.54±0.63,1.32±0.07)mg/g;(484.13±63.79,202.22±49.83)pg/mL,差异均具有统计学意义(P＜0.05).肺病理显示F组急性期肺出血、肺实变及慢性期肺纤维均较B组轻.结论 血必净联合激素于中毒早期有较强清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应的能力,可以减轻急性肺出血、肺水肿;晚期通过抑制TGF-β1分泌和HYP的合成,减轻慢性肺纤维化.     

电磁脉冲对海马神经元的损伤机制及药物防护研究

目的探讨电磁脉冲(EMP)致体外培养的海马神经元损伤的机制及药物防护的可能性。方法EMP的照射条件为6×104V·m-1,脉冲上升时间为20ns,脉宽为30μs,频率为2.5脉冲·min-1,作用时间为2min。原代培养的海马神经元经过MK801和尼非地平预处理后进行EMP照射,采用MTT法对细胞活力进行测定;FACS法检测细胞凋亡率;Fluo-3-AM荧光探针负载、激光共聚焦显微镜扫描测定海马神经元胞内游离钙离子〔Ca2+〕i浓度。结果MK801组和MK801+尼非地平组反应细胞增殖活力的吸光度分别为0.25±0.06和0.27±0.07,明显高于单纯EMP照射组(0.17±0.08,P<0.05);MK801+尼非地平组的细胞凋亡率(53.69±13.60)%较单纯EMP组(68.63±9.04)%明显下降(P<0.05);EMP照射引起〔Ca2+〕i荧光强度显著升高(107.34±26.14,P<0.05),MK801预处理使之有所下降(81.29±19.96,P<0.05),而MK801与尼非地平联合用药可使〔Ca2+〕i荧光强度进一步下降(69.82±25.54,P<0.05)。结论MK801和尼非地平预处理可以部分地阻断EMP所致的海马神经元损伤;细胞内钙超载在EMP损伤机制中起到重要作用。