mRNA干扰BMI-1对人食管癌细胞放射增敏作用研究

目的 研究BMI-1对食管癌TE-13细胞放射敏感性的影响及其机制。方法 以TE-13细胞为研究对象,分为转染有效BMI-1 mRNA干扰序列(siRNA)即BMI-1 siRNA组、转染阴性对照序列即NC组、未转染即control组。qRT-PCR和蛋白印迹法检测TE-13细胞中BMI-1 mRNA和蛋白表达水平;MTT法和克隆形成实验检测BMI-1对食管癌TE-13细胞增殖和放射敏感性影响;流式细胞术检测BMI-1对TE-13细胞周期、凋亡的影响;蛋白印迹法检测细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达水平。组间差异采用方差分析。结果 BMI-1 siRNA组BMI-1 mRNA和蛋白表达水平均显著低于control、NC组(P=0.000、0.000)。照射后BMI-1 siRNA组肿瘤细胞的增殖水平、克隆形成能力均显著下降(P=0.031、0.000);照射后BMI-1 siRNA组G₂+M期细胞比例显著低于control、NC组(P=0.000、0.000),且凋亡率明显增加(P=0.000、0.000),同时Bcl-2的表达显著降低(P=0.000、0.000),而Bax表达明显增加(P=0.000、0.000)。结论 干扰siRNA抑制了食管癌TE-13细胞中BMI-1基因的表达,消除了G₂+M期阻滞,显著提高了电离辐射后细胞凋亡水平,增加了放射敏感性,该作用可能与Bcl-2和Bax基因表达有关。     

对羟基桂皮醛诱导食管癌TE-13细胞分化及其作用机制

目的：探讨木鳖子单体化合物对羟基桂皮醛（p-hydroxylcinnamaldehyde,CMSP）对食管癌细胞株TE-13的分化作用及其机制。方法：用流式细胞术检测质量浓度为10、20、40 μg/ml的 CMSP处理TE-13细胞对该细胞凋亡和细胞周期分布的影响,用吉姆萨染色、电镜观察TE-13细胞形态学改变,Real-time PCR和ELISA方法检测TE-13细胞中肿瘤相关抗原CEA和SCC的表达,用克隆集落形成实验、Transwell迁移实验检测不同质量浓度CMSP对TE-13细胞的增殖、迁移能力的影响,Western blotting检测CMSP（20 μg/ml）对TE-13细胞中MAPK通路中各蛋白水平的影响。结果： CMSP可抑制食管癌Kyse30、TE-13、Eca109和Kyse180细胞的增殖\[(1.6±0.2)×104 vs （3.8±0.3)×104、(1.7±0.3)×104 vs (4.5±0.4)×104、 (2.5±0.1)×104 vs (4.0±0.4)×104、(1.5±0.1)×104 vs (2.5±0.3)×104个细胞, 均P<0.01\],而对人食管上皮细胞无明显作用(P>005)。CMSP处理TE-13细胞后：(1) 随CMSP质量浓度（10 、20 、40 μg/ml）和处理时间的增加（24、48、72 h）,G0/G1期细胞数量均增加、S期细胞数量减少（P<0.01或 P<0.05）,但细胞凋亡率无明显变化（P>0.05）;(2) 细胞出现典型分枝状突起,且随CMSP质量浓度增加更显著（P<0.05）;（3）CEA和SCC水平显著降低（P<0.01）;（4）抑制TE-13细胞的增殖和迁移能力,诱导细胞分化;（5）p-P38蛋白水平明显升高（P<0.01）,而p-ERK、p-SPKA/JNK蛋白水平明显降低（P<0.01）。结论： CMSP抑制食管癌TE-13细胞的增殖、诱导其分化,其作用机制可能与上调MAPK信号通路中p-P38和下调p-ERK、p-SPKA/JNK有关。     

食管鳞癌组织HLA-Ⅰ和TAP1及LMP2的表达相关性研究

目的探讨食管鳞癌组织中发生肿瘤免疫逃逸机制的相关指标人类白细胞抗原-Ⅰ(human leukocyte antigen-Ⅰ,HLA-Ⅰ)、抗原相关转运蛋白1(transporter associated with antigen proeessing1,TAP1)和低分子量多肽2(low molecular weight protein2,LMP2)的表达,分析三者表达的差异性和相关性。方法应用免疫组化技术,检测济宁医学院附属医院胸外科2012-01-01-2013-12-31收治的临床资料完整的手术切除87例食管癌和配对正常食管组织中HLA-Ⅰ、TAP1和LMP2的表达,并分析其在食管癌组织中表达变化与临床病理特征的关系。结果正常黏膜组织样本中HLA-Ⅰ阳性表达率为100.0%(87/87),TAP1为98.9%(86/87),LMP2为98.9%(86/87)。在食管癌组织中HLA-Ⅰ阳性表达率为42.5%(37/87),TAP1为41.4%(36/87),LMP2为46.0%(40/87)。与病理因素的相关分析显示,癌组织的分化程度、是否有淋巴结转移和肿瘤的TNM临床分期均与HLA-Ⅰ、TAP1和LMP2的表达相关,P值均<0.05。HLA-Ⅰ类分子的表达与TAP1(P=0.05)和LMP2(P=0.04)的表达呈正相关,即随着TAP1和LMP2的低表达,HLA-Ⅰ也出现低表达。结论在肿瘤发生免疫逃逸机制中,食管鳞癌组织HLA-Ⅰ、TAP1和LMP2出现低表达与组织分化程度、淋巴结转移和TNM临床分期相关。提示HLA-Ⅰ、TAP1和LMP2可能与食管鳞癌的发生和转移有关,三者可同成为食管癌诊断和预警转移有价值的生物标志物。     

TIL与顺铂交替腹腔灌注治疗卵巢癌腹水16例观察

卵巢肿瘤深藏于盆腔 ,患病初期很少有症状 ,以致确诊时 6 0 %～ 70 %的卵巢恶性肿瘤患者已属晚期[1] 。且大多伴有腹水 ,我院自 1994年 1月～ 2 0 0 0年 1月应用肿瘤浸润淋巴细胞 (ｔｕｍｏｒｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｎｇｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ,ＴＩＬ)与顺铂腹腔交替灌注治疗卵巢癌引起的腹水 ,取得了较好的疗效 ,报告如下。1　临床资料1 1　病例资料　本组 16例患者中年龄 2 0～ 73岁 ,原发肿瘤均经病理及细胞学检查证实。全部患者均为卵巢癌引起的腹水 ,其中浆液性囊腺癌 7例 ;浆液性表面乳头状癌 2例 ;粘液性囊腺癌 5例 ;未分化癌 1例 ;内…     

靶向沉默RNF2基因对食管癌细胞放射敏感度的影响

目的 探讨RNF2基因表达对X射线照射后食管癌细胞放射敏感度的影响。方法 针对RNF2mRNA序列,设计合成3对有效的干扰序列（siRNA1、siRNA2和siRNA3）和阴性对照序列。瞬时转染细胞,分别命名为RNF2 siRNA1组、RNF2 siRNA2组、RNF2 siRNA3组,转染空载体组和未转染组分别命名为NC组和control组。RT-PCR和Western blot法观察食管癌ECA109细胞各组中RNF2表达变化。MTT法检测RNF2基因对ECA109增殖能力的影响。克隆形成实验检测RNF2对ECA109放射敏感度的影响。流式细胞术测定RNF2基因干扰后对细胞周期和凋亡分布的影响。结果 3对干扰序列组的RNF2基因在mRNA和蛋白表达水平低于control组和NC组,尤以siRNA1组效果最明显。选择siRNA1作为干扰组进行MTT和流式细胞术检测。MTT结果表明照射后干扰组细胞增殖明显受抑;克隆形成实验的结果显示干扰组的的D0、Dq、SF2显著低于control组和NC组,而干扰组的外推数N（extrapolation number N）值明显高于后者,可见干扰组细胞的放射敏感度高于control组和NC组;流式细胞术显示照射后RNF2 siRNA组G0/G1期明显高于control组和NC组,S期显著低于control组和NC组。结论 siRNA干扰技术有效地抑制了食管癌ECA109细胞中RNF2基因的表达,联合X线照射后显著抑制了细胞增殖,消除了细胞周期阻滞在S期,增加了食管癌的放射敏感度。     

后腹腔镜肾癌根治术治疗局限性肾透明细胞癌临床分析

目的评价后腹腔镜肾癌根治术（Laparoscopic radical nephrectomy,LRN）治疗局限性肾透明细胞癌的临床疗效。方法局限性肾透明细胞癌患者90例,其中行LRN（后腹腔镜组）40例,开放性肾癌根治术（开放手术组）50例,两组患者年龄、性别、肿瘤分期大小差异无统计学意义,分析比较两组患者的临床疗效及术后并发症。结果后腹腔镜组患者手术时间长于开放手术组,术中出血、术后需用镇痛剂例数、术后进食时间、术后恢复正常活动时间、住院天数均少于开放手术组（P〈0.05）。术后中位随访时间24个月（5~43个月）,生存率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论与开放肾癌根治术相比,LRN出血少、恢复快、术后并发症少,已成为局限性肾癌的首选治疗方法。     

MRI对血管压迫性三叉神经痛责任血管显示诊断价值

目的:探讨MRI对血管压迫性三叉神经痛责任血管的显示及诊断价值。方法:回顾性分析38例血管相关性三叉神经痛患者的临床及MRI资料,所有患者均行常规头颅MR平扫、桥小脑角区高分辨3DTOF和3DFIESTA序列扫描。分析MRI显示病变责任血管,并追踪手术结果进行对照。结果:发现责任血管,右侧22例,左侧16例,分别为小脑上动脉25例,小脑下前动脉9例,小脑下后动脉3例,椎动脉1例。结论:MRI 3DTOF和3D-FIESTA序列对血管压迫性三叉神经痛的责任血管的显示有重要意义,有助于临床术前准备和评估。     

人乳头状瘤病毒致卵巢癌的机制及其防治策略

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,发病率高,位居女性恶性肿瘤第3位,随着病情的发展,严重者甚至发生恶病质,严重威胁女性生命安全;纵观医学的发展进程,对于卵巢癌的研究并不在少数,目前仍存在着两种主要的假说,炎症假说和脑垂体促性腺激素假说,这表明卵巢癌与内分泌因素,病毒感染,遗传和家族因素,化学致癌及环境条件恶化因素等有很大关联;很多研究结果表明,感染和炎症是癌症发生发展的重要原因之一,炎症部位的细胞因子和趋化因子可引起细胞内染色体DNA发生损害,这些受损DNA的细胞存在于较高浓度的炎症细胞和不同生物因子的环境中发生失控性繁殖生长,最后导致其难以修复,而发展成为癌;而感染病原体是引发炎症的主要原因;该综述研究卵巢癌与HPV之间的联系,制定卵巢癌的防治策略,为卵巢癌的早期诊断以及治疗提供一定的临床基础。     

协和医院10年科研工作情况调查分析

医学科研成果的多少、质量的高低可从一个侧面反映教学医院的整体科研水平,同时也是衡量该单位教学质量、医疗水平的重要标志之一[1]。华中科技大学同济医学院附属协和医院是一所历史悠久、传统优良,集医疗、教学、科研为一体的大型综合医院。该院拥有一大批优秀的医学专门人才及著名专家,他们长期以来积极开展医学科学研究,取得了大批科研成果,使得协和医院的科研能力得到很大提高。为了真实地了解协和医院科学研究工作的现状,科学地评价协和医院科研课题的质量,找出协和医院科研工作的优势及存在的问题,拟进行了本调查研究。1研究对象与方…