精原干细胞冷冻保存后再移植的生精功能

背景:精原干细胞的冷冻保存在男性不育治疗方面具有潜在的临床应用价值,但冷冻保存过的精原干细胞移植后,其精子发生过程及生精能力目前尚不完全清楚.目的:观测精原干细胞冷冻保存后移植的生精功能.方法:采用复合酶消化、差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法获取雄性SD大鼠及雄性C57BL/6小鼠精原干细胞;以雄性BALB/c裸小鼠为受体,出生后6周予腹腔注射白消安破坏其内源性生精功能.将供体精原干细胞分为冷冻保存组与非冷冻保存组,分别以曲细精管微注射的方法异种移植精原干细胞,采用形态学方法观察生精过程;采集附睾精液,观察精子形态并进行体外受精实验.移植后1,2,3个月取受体睾丸组织,采用免疫组化SABC法检测α6-Integrin蛋白表达情况;移植后1周、1个月、3个月取受体睾丸组织,应用扫描电镜观察生精过程.结果与结论:冷冻保存前的精原干细胞活性率高于冷冻保存后的细胞活性率(P<0.01).冷冻保存组与未冷冻保存组受体睾丸组织精原细胞膜和细胞质中均有α6-Integrin的阳性表达,随时间增加而增加,两组间α6-Integrin蛋白的表达无统计学差异;SD大鼠精原干细胞移植后能在BALB/c裸小鼠生精上皮中克隆增殖,并能分化形成大鼠形态特征的精子,在小鼠精子发生巢内既有大鼠来源的精子发生,又有小鼠内源性精子发生,其供体来源的精子数量较小鼠自身来源的精子数量多.通过体外受精实验提示移植后的精原干细胞在受体内增殖分化形成的精子功能正常,具有受精的能力.结果说明采用常规方法冷冻保存的精原干细胞,移植后能在受体生精上皮中克隆增殖,并能分化形成成熟的精子.     

E-Cadherin、β-catenin蛋白在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨E-Cadherin、β-catenin蛋白在肾透明细胞癌（RCCC）组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化方法对62例肾透明细胞癌和10例正常肾组织进行E-Cadherin、β-catenin蛋白检测。结果 RCCC组织中,E-Cadherin、β-catenin蛋白异常表达率分别为67.7%（42/62）和77.4%（48/62）,二者表达之间具有显著相关性（P〈0.01）。E-Cadherin、β-catenin蛋白的异常表达与RCCC病理分级和临床分期呈正相关（P〈0.05）。E-Cadherin、β-catenin蛋白的异常表达在侵袭转移组和非侵袭转移组之间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 E-Cadherin、β-catenin蛋白低表达或异常表达与肾透明细胞癌的分化、恶性程度有关,并对肾透明细胞癌预后评价有一定参考意义。     

精原干细胞冷冻保存后再移植的生精功能

背景：精原干细胞的冷冻保存在男性不育治疗方面具有潜在的临床应用价值,但冷冻保存过的精原干细胞移植后,其精子发生过程及生精能力目前尚不完全清楚。 目的：观测精原干细胞冷冻保存后移植的生精功能。 方法：采用复合酶消化、差速贴壁结合非连续性Percoll 密度梯度离心的方法获取雄性SD 大鼠及雄性C57BL/6 小鼠精原干细胞;以雄性BALB/c 裸小鼠为受体,出生后6 周予腹腔注射白消安破坏其内源性生精功能。将供体精原干细胞分为冷冻保存组与非冷冻保存组,分别以曲细精管微注射的方法异种移植精原干细胞,采用形态学方法观察生精过程;采集附睾精液,观察精子形态并进行体外受精实验。移植后1,2,3个月取受体睾丸组织,采用免疫组化SABC 法检测α6-Integrin 蛋白表达情况;移植后1周、1个月、3个月取受体睾丸组织,应用扫描电镜观察生精过程。 结果与结论：冷冻保存前的精原干细胞活性率高于冷冻保存后的细胞活性率(P < 0.01)。冷冻保存组与未冷冻保存组受体睾丸组织精原细胞膜和细胞质中均有α6-Integrin 的阳性表达,随时间增加而增加,两组间α6-Integrin 蛋白的表达无统计学差异;SD 大鼠精原干细胞移植后能在BALB/c 裸小鼠生精上皮中克隆增殖,并能分化形成大鼠形态特征的精子,在小鼠精子发生巢内既有大鼠来源的精子发生,又有小鼠内源性精子发生,其供体来源的精子数量较小鼠自身来源的精子数量多。通过体外受精实验提示移植后的精原干细胞在受体内增殖分化形成的精子功能正常,具有受精的能力。结果说明采用常规方法冷冻保存的精原干细胞,移植后能在受体生精上皮中克隆增殖,并能分化形成成熟的精子。 关键词：冷冻保存;精原干细胞;精子发生;移植;组织细胞移植     

枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响

背景：精原干细胞移植对不育具有潜在的临床应用价值,体外建立精原干细胞的培养系统获得数量较多的精原干细胞,仍是目前研究中亟待解决的问题。 目的：观察枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响。 方法：采用两步酶消化法获取出生4~6 d雄性C57BL/6小鼠睾丸Sertoli细胞与精原干细胞,将精原干细胞接种在Sertoli细胞饲养层上,再加入枸杞多糖或联合细胞因子添加到细胞培养液中。1周后以流式细胞仪检测细胞周期及细胞活性率,并检测各组精原干细胞GFRa-1、Thy-1、c-kit的阳性率。 结果与结论：单独加入枸杞多糖后精原干细胞数量明显增加,增殖明显,联合加入胶质细胞源性神经营养因子与白血病抑制因子精原干细胞增殖更加明显(P < 0.05)。并发现体外培养1周后的精原干细胞仍保持其睾丸组织内的精原干细胞特征,大多仍维持在未分化状态。表明在枸杞多糖或枸杞多糖联合胶质细胞源性神经营养因子及白血病抑制因子作用下,可促进精原干细胞体外增殖。     

复方玄驹胶囊对Ⅲ型前列腺炎合并勃起功能障碍的疗效探讨

目的观测复方玄驹胶囊对Ⅲ型前列腺炎合并勃起功能障碍（ED）的临床疗效。方法选择伴有性功能障碍的Ⅲ型前列腺炎患者198例,将患者分为对照组（105例）及治疗组（93例）。对照组口服左氧氟沙星0．2g,每天2次,连续服用4周;口服甲磺酸多沙唑嗪2mg,每晚1次,连续服用2个月。治疗组在上述治疗的基础上,同时口服复方玄驹胶囊3粒,每天3次,连续服用2个月。采用慢性前列腺炎症状指数（NIH—CPSI）评分、国际勃起功能指数问卷5（IIEF-5）评分进行治疗前后疗效比较。结果所有患者均无严重不良反应出现,能坚持服药。治疗后2个月重新评分,对照组NIH—CPSI（17．1±5．4）分,较治疗前（24．8±4．9）分显著改善（P〈0．05）;IIEF-5（12．9±5．1）分,较治疗前（11．7±4．7）分有所增加,但差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗组NIH—CPSI（13．3±5．6）分,IIEF-5（17．6±6．3）分,与治疗前比较,均改善显著（P〈0．05）。对照组ED总有效率21．0％,治疗组ED总有效率75．3％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论复方玄驹胶囊治疗Ⅲ型前列腺炎伴发ED,既可明显改善慢性前列腺炎症状,同时对伴发的ED也有较好的疗效,无严重不良反应。     

维药伊木萨克片治疗早泄临床观察

目的:通过多中心大样本客观评价维药伊木萨克片对于早泄患者的治疗效果及安全性。方法:采用多中心、开放性、剂量固定、前后自身对照的临床研究方法,300例早泄患者经历12周的观察,其中包括洗脱期4周,口服伊木萨克片每晚1次,1 g/次,治疗8周。观察患者治疗前后阴道内射精潜伏期(IELT)变化,对于患者满意度问卷调查及服药安全性研究。结果:300例患者,最终符合要求并完成研究的共288例。患者年龄从22~60岁,平均年龄31.6岁。基线期性生活记录显示IELT平均值为62.5 s,经过伊木萨克片治疗4周IELT平均值为168.9 s,经过伊木萨克片治疗8周IELT平均值为222.2 s。其中勃起功能完全正常患者(IIEF-521分),共157例,基线期性生活记录显示IELT平均值为71.4 s,经过伊木萨克片治疗4周IELT平均值为147.4 s,经过伊木萨克片治疗8周IELT平均值为172.5 s。对患者满意度调查结果明显增加。对于合并轻、中度勃起功能障碍的早泄患者,经过伊木萨克片治疗后,部分患者IIEF-5评分有不同程度增加,平均增加3.8分。仅少部分患者有轻度不良反应,包括:便秘、口干、流鼻血、腹痛、腰骶部疼痛等,所有患者未停药,自行缓解。结论:伊木萨克片治疗早泄安全、有效。     

精原干细胞移植及其相关研究进展

睾丸功能有赖于精原干细胞持续不断的增殖，这些细胞紧贴于曲细精管基膜，埋嵌在支持细胞间，经过同源性扩增形成分化型精原细胞链，分化形成的精母细胞经过两次减数分裂形成精子细胞，后者经过变态过程最后形成成熟的精子。在整个精子发生过程中，精原干细胞在所有生殖细胞类型中展现出巨大的细胞群扩增能力。另外，DNA在复制和减数分裂的过程中，很可能会出现DNA缺失，     

肾上腺髓质增生的诊治(附9例报告)

目的探讨肾上腺髓质增生(AMH)的临床特点和诊治方法,提高AMH的诊治水平。方法回顾性总结9例AMH患者的临床资料,结合文献进行分析。结果9例患者均行手术治疗,5例术后血压明显下降,另4例血压恢复正常。9例术后病理均证实为AMH。结论影像学检查有助于AMH与嗜铬细胞瘤的鉴别诊断,确诊尚需术中探查和术后病理诊断。AMH根本治疗是手术切除,腹腔镜技术对AMH的手术治疗有广阔的应用前景。     

枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响

背景：精原干细胞移植对不育具有潜在的临床应用价值,体外建立精原干细胞的培养系统获得数量较多的精原干细胞,仍是目前研究中亟待解决的问题。 目的：观察枸杞多糖对精原干细胞体外增殖的影响。 方法：采用两步酶消化法获取出生4~6 d雄性C57BL/6小鼠睾丸Sertoli细胞与精原干细胞,将精原干细胞接种在Sertoli细胞饲养层上,再加入枸杞多糖或联合细胞因子添加到细胞培养液中。1周后以流式细胞仪检测细胞周期及细胞活性率,并检测各组精原干细胞GFRa-1、Thy-1、c-kit的阳性率。 结果与结论：单独加入枸杞多糖后精原干细胞数量明显增加,增殖明显,联合加入胶质细胞源性神经营养因子与白血病抑制因子精原干细胞增殖更加明显(P < 0.05)。并发现体外培养1周后的精原干细胞仍保持其睾丸组织内的精原干细胞特征,大多仍维持在未分化状态。表明在枸杞多糖或枸杞多糖联合胶质细胞源性神经营养因子及白血病抑制因子作用下,可促进精原干细胞体外增殖。     

精索扭转的超声诊断与早期手术探查

精索扭转是青少年以急性阴囊疼痛的主要表现的疾病,临床易延误诊治。我院1991年2月～2003年11月共收治精索扭转患者42例。现报告其临床资料,旨在探讨超声对本病的诊断意义和早期手术探查的重要性。