微小隐孢子虫CPl5基因高效真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达

目的：构建隐孢子虫CP15真核表达载体pCB3．1—15，观察其在Hela细胞中的表达。方法：用BglⅡ从pMD18-T-15中酶切得到CP15基因，将其插入真核表达载体pCR3．1( )的BamH I位点，构建CP15真核表达载体pCR3．1—15，脂质体介导法将其转染Hela细胞，并用G18加压筛选，用RT—PCR方法检测外源CP15基因的转录，用ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性。结果：酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pCR3．1-15；外源CP15基因能在转染细胞中有效转录；ELISA法和间接免疫荧光法实验结果表明表达产物具有良好的生物活性。结论：构建的pCR3．1—15真核表达载体在Hela细胞中具有良好的表达活性。     

蛋白激酶C生物学特性及与脑胶质瘤的关系

人脑胶质瘤是一种常见而危害性较大的肿瘤,占颅内肿瘤的40％～60％。传统的手术合并放射治疗脑胶质瘤,其5年生存率一直徘徊在40％左右。PKC是细胞信息传导过程中起重要作用的蛋白激酶,具有双相通道的调节功能,诱导细胞增殖或凋亡。恶性胶质瘤细胞具有相当高的PKC活性,了解PKC的生物学特性,对于深入掌握脑胶质瘤的生物学特性,指导治疗具有重要的意义。     

创伤性假性动脉瘤血流动力学的实验研究

1994年我们应用创伤法和显微外科技术研制成功创伤性假性动脉瘤(Traumatic Pseudoaneurysm,TPA)的动物模型。根据此模型,又对动脉瘤进行了血流动力学的研究,结果报告如下。1 材料和方法1.1 动物模型建立1.1.1 动物选择 健康日本大耳白兔40只,体重2.5～3.5kg。     

移植前诱导抗独特型抗体对小鼠皮肤排斥反应的抑制作用

目的　探讨抗独特型抗体诱导对异品系小鼠皮肤移植排斥反应的影响.方法　以C57BL/6小鼠脾细胞免疫BALB/c小鼠制备抗同种异品系抗体(Ab1).将Ab1与KLH交联后,免疫BALB/c小鼠诱导产生抗独特型多克隆抗体(Ab2),并以之为受体,观察Ab2对小鼠皮肤移植排斥反应的影响.结果　Ab1交联KLH加弗氏佐剂免疫可有效地诱导抗独特型抗体(Ab2)产生.与对照组相比较,Ab2诱导组小鼠移植物存活时间明显延长.结论　移植前在受体体内诱导产生以移植物抗原为模拟抗原的抗独特型抗体,可对移植排斥反应产生有效的抑制作用移植前诱导抗独特型抗体对小鼠皮肤排斥…     

人肿瘤坏死因子α单链抗体的原核表达和活性分析

目的　在大肠杆菌中表达抗人 TNF-α单链抗体 (Sc Fv) ,并分析它的结合活性和中和活性 .方法　在获得抗人 TNF-αE6 Sc Fv的基础上 ,用热诱导载体 p BV2 2 0在大肠杆菌中表达 E6 Sc Fv蛋白 .EL ISA测定抗体的结合活性 ,实时 BIA技术确定亲和常数 ,L 92 9细胞毒试验分析其中和活性 .结果　克隆了抗人 TNF-α E6 Sc Fv基因的热诱导载体 p BV2 2 0在大肠杆菌中 ,经42℃热诱导 ,得到了相对分子质量 (Mr)约为 2 70 0 0的重组蛋白质 ,表达量占菌体总蛋白的 18% .对在大肠杆菌中表达的E6 Sc Fv进行了复性和亲和层析纯化 ,并进一步证…     

次声作用后mGluR1α,mGluR5在CA1区表达的改变及MCPG的保护作用

目的　探讨次声作用后鼠脑 CA1区 m Glu R1α和 m Glu R5表达改变的规律 ,并观察其拮抗剂 MCPG的作用 .方法　 16 0只SD大鼠随机分为次声作用组及 MCPG治疗组 .两组再分为对照组及次声作用 1次、7次和 14次组 .用 8Hz,130 d B的次声按规定次数 ,每次作用 2 h.用免疫组织化学染色和原位杂交的方法检测 m Glu R1α和 m Glu R5的表达 ,光镜下观察 MCPG治疗后神经元形态的改变 .结果　与对照组相比较 ,次声作用 1次后 ,m Glu R1α与 m Glu R5的阳性细胞数和吸光 (A)值即改变 (P>0 .0 5 ) ;7次组改变最显著 (P>0 .0 1) ;14次组恢复…     

颈动脉体化学感受性在pH降低时的传递机制

目的　探讨胆碱能机制在 p H降低时颈动脉体 (CB)功能活动变化中的作用 .方法　在离体灌流条件下 ,记录颈动脉窦神经 (CSN)传入纤维的化学感受性单位放电 .结果　乙酰胆碱 (ACh)抑制单位放电 (n=16 ,P<0 .0 5 ) ,阿托品阻断 ACh的作用 ;尼古丁呈剂量依赖性增加单位放电 (n=10 ,r= 0 .94,P<0 .0 1) ;箭毒可阻断尼古丁的作用 ,对自发放电无显著影响 ;尼古丁并不增加化学感受性单位对 p H降低的放电反应 (n=19) ;p H降低时筒箭毒对化学感受性单位放电变化无显著影响 (n=17) ;硝苯吡啶 (5 mmol· L- 1 )对自发的基础单位放电 (n=8)和刺激诱导的电活动 (n=9)均无明显影响 .结论　胆碱能机制与 p H降低时 CB化学感受性功能活动的改变无直接关系     

Protective effects of allicin on acute cerebral ischemia-reperfusion injury in rats

目的：观察并比较麻黄碱(ephedrine,Eph)、伪麻黄碱(pseudoephedrine，PE)及其水杨酸衍生物麻黄碱水杨酸(ephedrine salicylate，ES)及伪麻黄碱水杨酸(pseudophedrine salicylate，PES)的中枢药理作用，、方法：Eph、PE、ES和PES对戊巴比妥钠睡眠潜伏期和持续时间的影响；对正常小白鼠自主活动的影响；与阈下剂量     

癫癎患儿SPECT显像的临床观察

目的　观察癫患儿在发作间歇期局部脑血流改变并与EEG进行对比观察。方法　对 2 1例癫患儿在发作间歇期行SPECT(单光子发射计算机扫描 )检查。结果　其中 14例局部脑血流 (rCBF)减少 ,阳性率 6 7%。结论　癫患儿SPECT阳性率较高 ,与EEG无显著差异 ,但二者对病灶定位无明显相关性