体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒感染Huh7.5细胞的透射电镜观察

目的 通过透射电子显微镜技术观察体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒(HCV)感染Huh7.5细胞后胞内病毒颗粒的形态学特征及细胞内部超微结构的变化.方法 将含有全长HCV嵌合基因组的质粒pFL-J6/JFH体外转录为HCV RNA,电穿孔转染至Huh7.5细胞,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定培养上清中病毒数量;间接免疫荧光检测病毒蛋白的表达;收取转染后细胞培养上清感染原始Huh7.5细胞,制作超薄细胞切片,透射电子显微镜技术观察被感染细胞中病毒颗粒的形态学特征及细胞超微结构的变化.结果 qRT-PCR显示不同时间点收取的转染后细胞培养上清中含有高水平的病毒量;间接免疫荧光显示病毒NSSA非结构蛋白高表达;透射电子显微镜观察到被感染的Huh7.5细胞内含有大量有包膜或无包膜的病毒样颗粒,细胞质内部分膜性细胞器增生,出现黄病毒科病毒感染后特征性结构及某种未知结构等.结论 体外培养的嵌合体HCV具有HCV颗粒的形态学特征,并能够有效感染人源性肝细胞Huh7.5.     

自拟消肿方法治疗胫腓踝骨折后肢体肿胀80例临床观察

目的:观察自拟消肿方法治疗胫腓踝骨折后肢体肿胀的疗效.方法:将胫腓踝骨折患者80例随机分两组,治疗组40例采用自拟消肿方法治疗,对照组40例采用甘露醇治疗.观察肿胀消退疗效.结果:治疗组显效27例,有效11例,无效2例,有效率95%;对照组显效21例,有效9例,无效10例,有效率75%.结论:自拟方法治疗胫腓踝骨折后肢体肿胀疗效显著.     

天力克注射液诱导HepG-2肝癌细胞自噬及对端粒酶活性的影响

目的:研究复方虫草制剂-天力克注射液对人肝癌细胞HepG-2抗肿瘤作用的分子机制及其对端粒酶活性的影响。方法:用透射电镜观察超微结构的变化;Hoechst33258荧光染色观察细胞核形态的变化;应用流式细胞仪(FCM)PI染色检测细胞周期变化及bcl-2的变化,AV/PI双染检测细胞膜的改变;免疫组化方法测定Sur-vivin蛋白及NF-κBp65的表达;用TRAP-PCR-银染法对肝癌细胞端粒酶活性进行检测。结果:Hoechst33258荧光染色显示天力克使细胞核轻微浓缩;免疫组化显示天力克使Survivin蛋白及NF-κBp65的表达下调(P<0.0005);FCM检测结果显示天力克作用后,S期细胞比例增高,G0/G1期及G2/M期细胞比例下降(P<0.0005),并使bcl-2表达下降;Annexin-V/PI染色后流式细胞仪检测,天力克组出现明显磷脂酰丝氨酸(phosphatdylserine,PS)膜外翻;TRAP-PCR-银染法显示天力克使端粒酶活性下调(P<0.01)。结论:天力克对人肝癌细胞的作用主要是细胞自噬,导致细胞浆空泡变性,胞浆内容物降解,轻度的染色质浓缩;明显改变细胞周期,阻滞细胞于S期,细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,膜结构发生改变;其诱导细胞自噬作用机制主要与抑制端粒酶活性、下调Survivin蛋白、NF-κBp65及bcl-2的表达有关。     

乳腺癌患者手术前后血清S-CD105 的表达及相关因素分析

 目的 探讨乳腺癌患者手术前、后血清S-CD105的表达情况及其影响因素。方法 用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测37例乳腺癌，10例乳腺良性肿瘤患者及10位健康成年女性血清SICD105的浓度。结果 乳腺癌患者血清S-CD105浓度明显高于乳腺良性肿瘤患者及健康女性（P=0．021）；手术前组血清S-CD105浓度明显高于术后30天组（P=0．000）；术后3（）天组血清SICD105浓度与乳腺良性肿瘤患者及健康女性之间无差异（P=0．311）；进一步研究发现：肿瘤最大直径〉5cm、淋巴结转移≥4枚、临床TNM分期Ⅱ期以上以及肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）表达强阳性的患者，血清S-CD105浓度均明显升高（P〈0．05）；1例骨转移患者血清S-CD105浓度明显升高。结论 手术前乳腺癌患者血清S-CD105表达明显升高，且与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期以及肿瘤组织中VEGF表达水平明显相关，表明其具有评价预后的临床价值。1例术后骨转移患者血清S-CD105浓度显著升高，表明其可能具有监测复发和转移的临床价值，有待于进一步研究。     

IL-12基因重组腺病毒对不同肿瘤的抗瘤作用比较

目的：观察比较AdCMVmIL-12的抗肿瘤作用效果。方法：体外用AdCMVmIL-12预处理大鼠甲状腺癌细胞（rMTC）,观察其致瘤性;制备动物肿瘤模型,在瘤体内注射AdCMVmIL-12,测量肿瘤体积大小变化。结果：体外用AdCMVmIL-12预处理的rMTC失去致瘤性,不能在动物体内发展成肿瘤;瘤体内注射Ad-CMVmIL-12后,肿瘤体积逐渐缩小。注射后的第12天AdCMVIL-12对rMTC、RTC-R2、H22、XTC-1的抑制率分别为67%、66%、90%、6.4%,与对照组比较差异有统计学意义。结论：AdCMVmIL-12具有明显的抗肿瘤作用,而且对不同类型的肿瘤作用效果不同,具有选择性。     

联合流化制粒技术在舒心胶囊制备工艺中的应用研究

目的筛选舒心胶囊半成品的最佳制粒工艺。方法以丹参酮ⅡA含量和制粒情况作为评价指标,采用喷雾干燥—一步制粒联合流化制粒技术对制粒条件进行优化。结果将经提取、浓缩所得浸膏的1/2进行喷雾干燥,得干燥粉末,与适量淀粉混匀为一步制粒的母核,余下1/2量的浸膏作为黏合剂进行一步制粒,所得产品质量可控性强。结论该法具有速度快、生产工序简单等优点,可用于进行舒心胶囊半成品的制备。     

哒嗪与苯、庚氧基取代苯共聚物的合成

1，3-双(二苯基瞵)-丙烷基-二氯化镍存在下，3，6-二氯哒嗪与1，4-二溴苯格氏试剂共聚，庚氧基取代苯与3，6-二氯哒嗪格氏试剂共聚得到了哒嗪类新型共轭共聚物。并用FTIR、NMR对中间体和聚合物的结构进行了表征。采用XRD测试对共聚物结晶性进行了讨论。该合成方法所得的共聚物收率分别为75％和67％。其中含有烷氧基苯单元的共聚物在DMF、DMSO等极性溶剂和有机酸中具有良好的溶解性。共聚物的紫外-可见光谱中，分别在310nm、345nm等处出现最大吸收峰。XRD结果表示共聚物具有一定的结晶性。     

三金药业有奖问答获奖名单

传统治疗方法 针刺是以传统的中医理论及各家学说为基础，结合现代医学的有关论述，根据中风的基本病理改变为脑（元神之府）的神窍闭为主的观点，以“醒神开窍”为主，“疏通经络，滋养肝”为辅的治疗原则，进行体针、头针与耳针等的治疗，以改善大脑生理功能，达到醒脑开窍，通利咽窍的效果。     

槐耳清膏对人高转移大细胞肺癌细胞L9981血管生成相关基因表达的影响

背景与目的肺癌是全世界对人类健康与生命危害最大的恶性肿瘤之一。目前从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察槐耳清膏对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981血管生成相关基因mRNA转录表达的影响及意义，并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人高转移大细胞肺癌细胞L9981，应用台盼蓝拒染法做细胞毒性实验，实验分为：空白对照组，槐耳清膏组，顺铂化疗组，联合用药组。应用RT-PCR检测四组细胞株用药前后β-catenin、E-cadherin、TIMP-1、CD44V6、MMP-2、endostatin、VEGF mRNA的表达。应用Boyden小室法检测四组细胞株用药前后体外侵袭力改变。结果①槐耳清膏对L9981细胞的生长有明显的抑制作用，且抑制率随药物浓度增加而上升。槐耳清膏组（1g／L）与顺铂化疗组（顺铂3mg／L）及联合用药组（槐耳清膏0．05g／L＋顺铂1．5mg／L）比较抑制率无明显差异（P〉0．05）。②经槐耳清膏处理后，L9981细胞的β-catenin、E-eadherin、TIMP-1、andostatin、MMP-2的mRNA表达水平上调，而VEGF、CD44V6表达水平下调，其中TIMP-1、endostatin表达水平明显上调，CD44V6表达水平明显下调。③槐耳清膏组、顺铂化疗组、联合用药组细胞株的体外侵袭力均明显低于空白对照组（P〈0．05）。结论①槐耳清膏在体外对人高转移大细胞肺癌细胞L9981具有生长抑制作用，该抑制作用呈剂量依赖性。②槐耳清膏对L9981的生长抑制作用可能与其调控血管生成相关基因mRNA的表达有关。③槐耳清膏联合顺铂有一定的协同抗肿瘤作用。     

猪苓多糖的提取与含量测定

目的介绍猪苓多糖的提取方法，并对所提取的猪苓多糖含量进行测定。方法用水提有机溶剂清洗法提取猪苓多糖，用紫外法测定多糖含量。结果提取的猪苓多糖为褐色粉状物，标示含量为90.16 %，RSD＝4.00 %。结论该法可得纯度较高的猪苓多糖。