<高级病理生理学>--一部高质量的现代医学专著

中山医科大学杨惠玲,潘景轩和吴伟康主编的《高级病理生理学》已由科学出版社出版。本书内容丰富,阐述层次分明,基本反映了近年来病理生理学的新进展和多学科相互渗透相互促进的发展趋势。本书以培养高层次人才为目标,突破传统教科书的编排模式,精选专题,博采众长,...     

地方医学院校人才培养质量调查分析——基于社会评价的视角

随着高校毕业生就业制度的改革及大学生素质教育的全面推行,对于地方医学院校来说,人才培养质量已经成为衡量地方医学院校办学质量的基本标准,而社会评价对地方医学院校教育的导向作用更加突出。本文基于社会评价的视角,采用问卷调查的方法,对医学毕业生的职业素质做出全面、系统的探讨,以促进地方医学院校的教育教学改革适应地方卫生事业的发展。     

二吲哚吡啶基吡咯烷通过抑制AKT-mTOR阻滞MDA-MB231乳腺癌细胞周期

探索吡咯烷衍生物的螺旋吲哚化合物二吲哚吡啶基吡咯烷(Di-indolyl pyrrolidine,DIPRD)对人乳腺癌MDA-MB231细胞周期的阻滞作用。使用CCK-8法检测DIPRD对MDA-MB231细胞的毒性剂量;使用DAPI/EdU双染法检测MDA-MB231细胞周期阻滞作用;使用Western blot检测信号通路蛋白AKT、mTOR和凋亡相关蛋白p53、MDM2的磷酸化水平以及DNA修复酶PARP的水平。DIPRD在12.5、25、50 mg/mL剂量依赖性抑制MDA-MB231细胞活力,下调EdU阳性细胞数量,增加G₁期并减少S/G₂期细胞数量,下调p-AKT(Ser473)、p-mTOR、p-p53、cyclin D1和CDK4水平并上调p-AKT(Thr308),p-MDM2及Cleaved-PARP水平。DIPRD可能通过AKT信号通路发挥周期阻滞作用。     

发动蛋白(dynamin)抑制剂Dyngo-4a在大鼠骨髓间充质干细胞内吞葡聚糖过程中存在脱靶效应

目的 研究发动蛋白(DNM)抑制剂Dyngo-4a在依赖DNM的内吞途径中可能存在的脱靶作用。方法 分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)并进行流式细胞术鉴定,将细胞分为抑制剂对照组、 Dyngo-4a处理组、转染阴性对照(si-NC)组、 DNM2小干扰RNA(si-DNM2)转染组、转染和Dyngo-4a共处理组。反转录PCR和Western blot法验证DNM2基因沉默效率,CCK-8法检测Dyngo-4a处理后细胞活性变化,共聚焦显微镜检测内吞的Dylight649标记的转铁蛋白(transferrin-Dylight649)和四甲基罗丹明标记的葡聚糖(dextran-TMR)阳性的囊泡数量以及平均荧光强度。结果 使用小干扰RNA能显著下调BMSC的DNM2的mRNA和蛋白表达,转染组内吞的转铁蛋白囊泡数量与转染阴性对照组比较明显降低,si-DNM2转染组内吞的葡聚糖囊泡数量和平均荧光强度与si-NC组比较变化不明显,转染si-DNM2和Dyngo-4a共处理组与单独si-DNM2转染组比较,Dyngo-4a处理组与抑制剂对照组比较,葡聚糖囊泡数量和平均荧光强度均明显降...     

NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白

 目的：寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列（leucine-rich repeat, LRR）结构域相互作用的蛋白质分子。方法：克隆NALP3富含亮氨酸重复序列（NALP3-LRR）结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果：成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORF1a。结论：NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。     

脓毒症大鼠生命体征变化的低应激连续观察

目的：研究脓毒血症时生命体征的变化及其机制。方法：将20只雄性SD大鼠行盲肠结扎穿孔术复制脓毒症模型（脓毒症组），用无线检测生理数据记录系统连续监测动物的心率、体温和活动度，监测时间为7d。另取10只作为假手术对照组，以同样方法观察，记录数据。结果：在几无应激干扰的情况下连续记录了脓毒症大鼠的心率、体温和活动度的变化。假手术对照组动物全部存活，脓毒症组存活至7d的大鼠8只．存活时间不足7d的12只。心率资料显示动物的心功能代偿变化与存活与否密切相关。频谱分析显示心率和活动度两者的频谱变化值在动物死亡前几个小时内发生急剧变化，对判断病情变化和预后有参考价值。结论：生理遥测技术能获得详实准确的数据。本实验为临床监测脓毒血症患者的生命体征指标和预后判断提供了实验数据。     

萘烯丙基三氟甲基苯并环戊酮抑制肺癌A549细胞增殖并诱导其凋亡

目的 探讨新型萘烯丙基三氟甲基苯并环戊酮（XX0335）抑制肺癌细胞系A549增殖并诱导凋亡的分子机制。方法 实验分为4组：对照组（含0.1% DMSO的培养液）、另外3组为不同浓度（6.25、12.5、25 μg/mL）的XX0335（该化合物需DMSO溶解,但工作浓度中DMSO的终浓度均低于0.1%）。通过CCK-8和EdU实验分别测定各组对A549细胞活力及增殖的影响,通过流式细胞术测定上述浓度的XX0335对A549细胞凋亡及周期的影响;通过免疫印迹实验测定不同浓度的XX0335对增殖相关蛋白Akt、mTOR、Akt/mTOR磷酸化水平、凋亡相关蛋白cleaved PARP及细胞周期相关蛋白CyclinD1表达水平的影响;通过裸鼠荷瘤实验探究XX0335对A549增殖的影响,动物实验使用4周龄小鼠共10只,随机均分为2组。将2×106A549细胞植入小鼠左侧腋下,待26 d后瘤体长径长至1 cm时,对照组小鼠注射无菌生理盐水（200 μL）,对实验组注射化合物XX0335（12.5 μg/mL,200 μL）,隔天注射1次,共5次之后取肿瘤观察每组瘤体大小。结果 CCK-8实验表明,A549细胞活力在XX0335的作用下比对照组呈剂量依赖性下降（P<0.01）。EdU实验发现XX0335能显著抑制A549细胞增殖（P<0.001）。流式细胞术检测结果表明,细胞凋亡较对照组呈剂量依赖性上升（P<0.01）,且细胞停滞于G1期。与对照组相比,AKT、mTOR的磷酸化受到了明显抑制,cleaved PARP表达量升高,且CyclinD1的蛋白表达量下降。裸鼠荷瘤实验结果显示注射XX0335后肿瘤体积明显减小（P<0.01）。结论 XX0335抑制了肺癌A549细胞增殖并诱导细胞发生了凋亡,且细胞周期阻滞于G1期,其作用机制可能与抑制Akt/mTOR信号通路有关。     

红景天提取物的结构鉴定及其生物活性研究

目的 从大花红景天中分离具有生物活性的多酚类单体化合物,并进行结构鉴定和生物活性研究.方法 采用有机溶剂萃取和硅胶柱层析技术,从大花红景天中分离多酚类单体化合物,通过紫外、红外光谱法和核磁共振谱法进行结构鉴定;并采用牛津杯法和打孔法研究该提取物的抗菌活性,同时采用四甲基偶氮唑盐还原法和流式细胞术研究该物质的抗肿瘤细胞活性.结果 从大花红景天中分离到一种多酚类化合物,波谱学方法鉴定该物质为3,4,5 -三羟基苯甲酸(TBA).TBA对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、柑橘绿霉和黑曲霉无显著抗菌活性.TBA对MGC80 -3人胃癌细胞体外增殖具有显著抑制作用,且呈剂量依赖性,拟合曲线,呈线性相关,拟合回归方程为Y=0.0350X +0.0782(r=0.9522),作用48 h后IC50为12.051 μg/ml;DAPI染色结果显示,TBA作用后,MGC80 -3细胞核出现染色质浓缩、细胞核固缩和核碎裂等;流式细胞术结果显示,IC50的TBA作用于细胞24h后,MGC80 -3细胞的凋亡率为13.1％.结论 从大花红景天中分离的多酚类化合物TBA具有显著的抗MGC80 -3人胃癌细胞活性,但对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、柑橘绿霉和黑曲霉无显著抗菌活性.     

2型糖尿病患者血清对人脐静脉内皮细胞骨架及胞浆内游离钙的影响

目的 探讨2型糖尿病患者血清干预人脐静脉内皮细胞(ECV-304)对细胞骨架微丝及胞浆内游离钙浓度的影响.方法 ECV-304传代后取对数生长期细胞分为正常对照组(N组)、健康人血清干预组(H组)和糖尿病患者血清干预组(MD组).按照1×105/ml将细胞种植在Petri 皿中进行分组干预,其中健康人血清、糖尿病患者血清浓度分别占总体积的10%.采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂在激光扫描共聚焦显微镜下观察细胞内游离钙浓度的变化,采用荧光探针标记的鬼笔环肽染色法观察细胞骨架微丝分布的差异.结果 与N组比较MD组胞浆内荧光分布不均匀,胞浆内游离钙浓度显著升高,骨架微丝断裂,排列紊乱,少部分区域缺失.结论 糖尿病患者血清干预正常的ECV-304可以造成内皮细胞的骨架结构改变,主要与细胞内游离钙浓度升高有关.     

徐州市城市社区卫生服务需求的调查及对策研究

城市社区卫生服务,在解决城市居民"看病贵"、"看病难"方面扮演着重要的"守门人"角色。目前,我国城市社区卫生服务在整个医疗服务递送体系中如何承担起提高医疗服务可及性,并且为社区居民提供连续性、协调性、综合性医疗健康服务的问题没有得到真正解决。本文通过对徐州市城区居民社区卫生服务需求的调查,以积极探索新医改背景下城市社区卫生治理的新方法。