c-jun反义核酸对自体移植静脉内膜增生的影响

目的:观察反义c-jun核酸对自体移植静脉内膜增生的影响。方法:选择20只SD大鼠,等分为实验组和对照组,均行自体颈外静脉、颈总动脉移植手术,实验组移植静脉周围和血管吻合口周围应用反义c-jun核酸凝胶涂布;对照组仅行凝胶涂布。术后周取出移植血管,分2别行病理学、免疫组织化学检测移植血管内膜厚度,内膜平滑肌细胞数及增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)、脱氧核糖核酸和α-肌动蛋白等反映血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)增殖情况和表型转换的指标的表达情况。结果:移植静脉术后动脉化,管壁增厚,但转染c-jun反义核酸组移植血管内膜厚度(实验组和对照组均数差值为-20.7170,P<0.01)及VSMC实验组和对照组比较t值为-13.011,P<0.01)(增殖均较对照组减少,PCNA(实验组和对照组均数差值为-19.2310,P<0.01)和DNA(实验组和对照组比较值为F55.000,P<0.01)阳性表达情况亦较对照组明显减少,α-肌动蛋白的表达较对照组升高(实验组和对照组比较q值为5.503,P<0.01)。结论:反义c-jun核酸可抑制VSMC的表型转化及细胞分裂而减少VSMC的增殖,从而有效的抑制移植静脉内膜的过度增生。     

竹红菌乙素对视网膜和脉络膜光动力学治疗系统生物学效应的评定作用

背景:光动力疗法(photodynamictherapy,PDT)治疗老年性黄斑变性(senilemaculardegeneration,SMD)的光敏剂苯并卟啉衍生物单酸A环(benzoporphyrinderivativemonoacidAring,BPD-MA)价格昂贵,在国内不能普及。评定国产光敏剂竹红菌乙素(hypocrellinB,HB)对视网膜和脉络膜光动力学治疗系统生物学效应,以探讨是否有价值进一步研究HB治疗SMD的前景。目的:建立视网膜和脉络膜光动力治疗的照射系统、光敏剂体外光敏性检测方法和体内观察光敏剂PDT疗效的方法。设计:开放性实验。地点、材料和干预:实验地点为解放军总医院激光科。建立照射系统:在裂隙灯显微镜开创激光窗口,使用光纤连接激光器和裂隙灯显微镜,使激光和裂隙灯照明同光路到达眼底,作为照射系统;通过四甲偶氮唑盐法检测光敏剂体外光敏性,和BPD-MA相比,初步判断其光敏性。以青紫蓝兔为实验对象,用光敏剂HB进行PDT治疗,通过眼底观察、荧光眼底造影、光镜和电镜检查照光部位的生物学效应,检测建立的实验系统的实用性和可靠性。主要观察指标:裂隙灯显微镜和激光器的耦合效率,光敏剂体外光敏性以及照光部位的生物学效应。结果:照射系统输出稳定,由激光器发出的功率和裂隙灯显微镜的激光窗口末端的输出的功率的耦合率为60%。国产HB体外光敏性和BPD-MA相似,HB     

两种荧光显微成像系统亚细胞定位的对比

目的:应用高分辨率荧光显微成像系统采集细胞器探针图像,并与激光共聚焦显微成像系统进行对比。方法:实验于2003-05/2004-01在解放军总医院完成。①实验材料:鼠肺毛细血管内皮细胞株(1H11)由上海复旦张江生物公司提供;荧光探针Rhodamine-123,Lucifer Yellow,DiOC6[3],BODIPY(美国Sigma公司)。②细胞培养及荧光探针染色:细胞培养采用含体积分数为0.2胎牛血清的低糖DMEM培养基,密度5×107L-1。选择Rhodamine-123作为细胞线粒体特异性荧光探针,选择DiOC6[3]作为细胞内质网特异性荧光探针,选择BODIPY作为细胞高尔基体特异性荧光探针,选择Lucifer Yellow作为细胞溶酶体探针。前3个探针在完全避光条件下与培养的细胞共同孵育0.5h,后者则共同孵育15h。③高分辨率荧光成像系统的图像采集:线粒体荧光图像采集,选取经Rhodamine-123共孵育完成的细胞,选择激发滤色镜为BP460-490,吸收滤色镜为BA515,分光镜为DM500,另加一绿通道液晶滤光片,激发出Rhodamine-123的荧光。电荷耦合器件采集图像并送入计算机。重复上述步骤,采用DiOC6[3]标记内质网,BODIPY标记高尔基体,Lucifer Yellow标记细胞溶酶体,激发条件同Rhodamine-123。分别采集同一视野靶细胞DiOC6[3]、BODIPY或Lucifer Yellow的荧光图像,完成全部图像采集并储存在计算机中。④激光共聚焦显微成像系统的图像采集:选择经4种探针染色的靶细胞,使用氩离子激光器在488nm激发Rhodamine-123,Rhodamine-123荧光通过配置有530/60-G发射滤光片的通道1探测。重复上述步骤,在488nm激发DiOC6[3]和BODIPY,在457nm激发Lucifer yellow,3种荧光均由通道1探测,后2个探针的发射滤光片的配置为515/30-G,DiOC6[3]选择530/60-G。由光电倍增管接收信号并传输入计算机成像。结果:①高分辨率荧光成像系统所采集图像,靶细胞中由荧光探针Rhodamine-123染色的线粒体呈多个典型的小棒状或卵圆状,聚集在核周;Lucifer yellow染色的溶酶体呈多个非对称球型,在胞浆内随机分布,颗粒尺寸通常大于线粒体;荧光探针DiOC6[3]着色的内质网占据胞浆的很大空间,以囊状聚集为特征;BODIPY特异性地结合在高尔基体上,荧光图像显示围绕在细胞核周围呈条索状。②与高分辨率荧光成像系统比较,激光共聚焦显微成像系统所采集的图像其荧光强度基本相同,但分辨率低、细节显示模糊、胞浆中细胞器的准确分布信息和形态特征显示效果欠佳。结论:两种荧光显微成像系统均可采集到细胞器探针的荧光图像。但高分辨率荧光成像系统采集的荧光图像具有细节清晰、分辨度高、准确显示胞浆中细胞器的分布信息和形态特征等优点。     

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在血卟啉单甲醚光动力学疗法中对瘢痕成纤维细胞的作用

目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase 3）在增生性瘢痕成纤维细胞（HSF）经光敏剂血卟啉单甲醚（HMME）诱导的凋亡效应中的作用。方法 将原代培养的HSF分为对照组、HMME-光动力疗法（PDT）组和caspase 3抑制剂（Z-DEVD-FMK）组,经caspase 3-异硫氰酸荧光素（FITC）-碘化丙啶（PI）染色后在荧光显微镜下观察各组细胞内caspase 3的荧光强度。收集各组细胞,在活性caspase 3-FITC单染后,经流式细胞术检测活性caspase 3阳性细胞百分率;在PI单染后,经流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 对照组和caspase 3抑制剂组HSF胞质中caspase 3-FITC荧光微弱,PDT组荧光显著增强;对照组活性caspase 3阳性细胞百分率低,HMME-PDT组（30.86% ± 1.21%）上升,caspase 3抑制剂组（2.46% ± 0.18%）降低,后两组间比较,t = 21.76,P < 0.05。PI染色分析表明,对照组凋亡率（2.45% ± 0.22%）低,PDT组（30.54% ± 3.78%）显著升高,两组比较,t = 35.90,P < 0.05;caspase 3抑制剂组凋亡率（10.46% ± 2.15%）低于PDT组,但显著高于对照组（t = 27.97,P < 0.05）。结论 HMME-PDT诱导HSF发生的凋亡效应与caspase 3的激活密切相关,但该凋亡效应并不依赖于caspase 3。     

给药至照光时间间隔对光动力血管效应影响的实验研究

<正>目的:以鸡冠为动物模型,通过数学模型仿真和动物实验研究,探讨给药到照光时间间隔对光动力血管效应的影响。方法:数学模型的建立:用MonteCarlo方法模拟光在组织中的分布,光敏剂在血管中的分布用药代动力学方程表示,光在组织中的分布则由扩散规律和漂白规律决定,单线     

532nm连续激光照射下鸡冠组织热效应的动物实验研究

目的观察532 nm连续激光照射下鸡冠组织的温度变化,为光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）治疗鲜红斑痣（port wine stain,PWS）中激光光剂量的安全性提供实验依据。方法将雄性3月龄白羽鸡30只,按功率密度100、150、200、250和300 mW/cm^2随机分为5组,每组6只。采用波长532 nm全固态激光器照射2 cm×2 cm鸡冠组织,照射时间20 min。照光同时应用热红外成像温度监测仪对照射区域的鸡冠组织进行连续温度成像监控。分别于照射后即刻、1和3 d对鸡冠组织进行大体观察,3d后进行病理学检查,观察血管和表皮损伤情况。结果在照光过程中,各组温度变化都呈现单边上升、达到平台的变化规律：功率密度为100、150、200、250和300 mW/cm^2组,温度最高值分别为45.1℃、49.9℃、51.6℃、51.8℃和53.7℃,达最高温度时间分别为20、16、7、6和6 min。鸡冠大体损伤和病理损伤随温度升高而加重,200 mW/cm^2以上功率密度导致鸡冠表皮和真皮凝固性坏死。结论在532 nm连续激光照射下,鸡冠组织的温升程度和损伤程度随着功率密度的增加逐渐增高,150 mW/cm^2以下功率密度较为安全。     

鲜红斑痣光学测评技术的研究进展

鲜红斑痣（PWS）在病理学上主要表现为先天性的真皮浅层毛细血管网的扩张畸形。血管靶向光动力疗法（V-PDT）是治疗PWS的一种有效方法,在临床应用中,为了不断提高疗效,需要准确判定PWS患者病变靶组织特性（如病变血管深度、管径和血流等）,以便为不同患者制定个体化V-PDT治疗方案。近年来,大量研究组致力于开发用于评估PWS病变靶组织结构和功能特性的无创光学测评技术,笔者将在文中综述目前仍处于基础研究阶段以及已经应用于临床评估PWS的光学测评技术,主要包括：光学相干层析成像技术、光声成像技术、反射式共聚焦显微镜、激光多普勒血流成像技术、激光散斑成像技术和空间频域成像技术。     

浅谈激光医学专业特点及研究生培养方法

目的参考。方法结果结论激光医学是一门年轻的、专业性强的医学专科,其研究生培养规律有待探索,本文的经验总结为其他教学人员提供了通过总结解放军总医院激光医学科30年研究生培养经验,对激光专业特点、研究生特点及培养方法进行全面阐述。激光专业研究生基础知识缺乏,改进的方法有专业文献阅读、小专题报告、科研讨论会、以及向其他专业学习等。激光医学专业研究生需要通过更多的辅导来学习激光专业基础知识,才能很好的完成研究生的学业。     

布美他尼与光动力疗法联合应用对大鼠C6胶质瘤的治疗作用

目的：本研究旨在探讨大鼠C6胶质瘤模型中,布美他尼与PDT联合应用对胶质瘤抑制效应及对瘤周水肿的治疗作用。     

眼组织弹性的光学测量技术与方法

眼球作为人体视觉器官,由于其透明的光学性质使得光学技术方法在眼部的应用最为充分。近年来伴随眼屈光手术的盛行,诸如眼组织弹性的机械学性质越发引人注意。角膜与晶状体作为人眼的主要屈光成分,其生物力学特性是保持眼正常形态与屈光功能的结构基础。