应用荧光探针H2DCF-DA检测光照致细胞内活性氧产生的初步研究

目的应用荧光显微镜及新型荧光探针H2DCF-DA检测在光源照射过程中人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)内活性氧的产生情况。方法将ECV304细胞接种于35mm培养皿中,24h后加入H2DCF-DA,使其终浓度为10μmol/L,孵育30min。利用荧光显微镜的激发光源作为照射光源,在采集荧光图像的同时完成光源照射,光源输出波长范围为460～490nm,功率密度约为100mW/cm2。连续采集DCF的荧光图,观察细胞内DCF荧光的变化情况,采用计算机图像处理和分析技术,求得细胞内不同照射时间点DCF平均荧光强度,进而得到平均荧光强度-时间曲线。另外,使用线粒体特异标记探针MitoFluorRed589与H2DCF-DA共同孵育细胞,分别采集同一细胞的DCF的荧光图和MitoFluorRed589的荧光图,并利用像素-荧光强度分析方法来确定DCF荧光在细胞内的分布位置。结果在光源照射的开始阶段,ECV304细胞内的DCF荧光强度迅速增加,在第10s时便上升至第2s时的2.2倍,但是随着照射时间逐渐延长,荧光强度增幅逐渐变小,到第60s时上升至第2s时的4.7倍。观察时间进一步延长,DCF的荧光强度的变化似乎进入平台期,继而开始出现下降。考察DCF荧光在ECV304细胞内的分布位置主要通过比较细胞内不同区域的I1/I2值,通过图像分析与计算得到线粒体区、细胞核区以及细胞质非线粒体区内I1/I2值分     

搭激光医学舞台 创学术交流名刊——纪念《中国激光医学杂志》创刊十周年

星转斗移 ,时光飞逝 ,进入 2 1世纪的第二个年头 ,我们迎来了《中国激光医学杂志》创刊十周年的日子。十年前 ,在激光医学迅速发展的迫切要求和推动下 ,在光学界、医学界专家学者的关怀和支持下 ,《中国激光医学杂志》正式创刊了。筹备和初创阶段 ,资金短缺 ,条件简陋 ,其艰苦程度在今天已难以想象。庆幸的是我们有一批兢兢业业、呕心沥血 ,无私地为激光医学做奉献的专家学者 ,他们在支持着这本杂志一步步成长发展起来。十年来杂志始终把“办成高质量能代表中国激光医学最高水平的科技期刊”作为目标 ,组织了一支有数百名不同专业的编委和审…     

血管舒张和收缩因子在曲张静脉形成过程中的作用

目的:测定曲张大隐静脉内血浆血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、内皮素-1、一氧化氮和环鸟苷酸水平的变化,以期探讨血管舒张因子和收缩因子在大隐静脉曲张形成过程中可能发挥的作用。方法:取自解放军总医院2003-11/2004-08收治大隐静脉曲张患者,肝肾等其他脏器功能正常及外周血管、心血管系统没有明显病变,且单侧患肢者被纳入检测对象,其中60例被列入观察范围。患有可能影响血管活性因子水平疾病或双侧患肢患者被排除观察范围。纳入患者分为轻、重两组,轻症组32例,重症组28例;另外取30例健康献血者作为正常对照组。比较各组人群大隐静脉内血浆AngⅡ,内皮素-1、一氧化氮与环鸟苷酸的水平,用放射免疫法测定血浆中AngⅡ,内皮素-1和环鸟苷酸水平及亚硝酸盐比色法测定一氧化氮的水平。结果:在轻症组大隐静脉曲张患者AngⅡ较正常水平降低(均数差值为64.9440,P<0.01)、一氧化氮(均数差值为-23.0273,P<0.01)和环鸟苷酸水平较正常水平升高(均数差值为-2.3153,P<0.01),内皮素水平无明显改变(均数差值为0.08023,P>0.05);随着病情的加重,AngⅡ降低更明显(重症组与正常组均数差值为84.0208,P<0.01),而一氧化氮(均数差值为17.8884,P<0.01)、环鸟苷酸(均数差值为0.8496,P<0.05)和内皮素-1(均数差值为3.1297,P<0.01)     

大鼠肠系膜微血管对光动力作用敏感性的研究

目的　比较不同分级的微血管对光动力作用组织敏感性差异 ,了解微循环因素对光动力作用敏感性的影响。方法　采用改良大鼠肠系膜活体微循环观察法 ,以Wistar大鼠为研究对象 ,采用显微数码相机录像和IMAGEPRO图像处理系统 ,选择红细胞流柱宽度百分比为评价指标 ,实时观测不同分级微血管在光动力作用中的改变及差异。结果　光动力作用时 ,微血管内皮细胞肿胀 ,红细胞聚集 ,白细胞贴壁 ,附壁血栓形成 ,管腔狭窄 ,红细胞流径减小 ,血流停滞 ,管腔闭塞。血卟啉衍生物介导光动力治疗时 ,毛细血管、微静脉、微动脉、小静脉 ,小动脉血管完全闭塞的时间分别为 6、1 6、1 8、2 2、2 6min,血卟啉单甲醚介导光动力治疗时各级微血管完全闭塞的时间为 6、1 8、30、32、4 4min ,竹红菌乙素介导光动力治疗时 ,各级微血管完全闭塞的时间为 1 6、2 6、36、4 0、5 8min。不同血管的红细胞流柱宽度百分比下降速度差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　在相同的光动力条件下 ,各级微血管反应敏感性差异显著 ,由强到弱依次表现为 :毛细血管 >微静脉 >微动脉≈小静脉 >小动脉。微血管对血卟啉衍生物、血卟啉单甲醚和竹红菌乙素所介导的光动力损伤敏感性规律一致。     

去带盲结肠可控膀胱术的手术配合

膀胱肿瘤是泌尿系最常见的肿瘤。我院 2年来为 8例膀胱恶性肿瘤患者施行去带盲结肠可控膀胱术 ,术后恢复良好。现将手术配合体会介绍如下。1 资料与方法本组 8例 ,男 7例 ,女 1例 ,年龄 5 5～ 71岁 ,平均 5 3岁 ,为浸润性或多发性膀胱肿瘤。手术方法　本组均在硬脊膜外麻醉下 ,先按常规方法作根治性膀胱切除 ,术后再行去带盲结肠可控膀胱术。①肠段截取 :距离回盲瓣 1 0cm处切断回肠 ,2 5cm处切断结肠 ,在保证血液供应的情况下分离部分肠系膜 ,作回肠和横结肠端端吻合 ,恢复肠道连续性 ,常规行阑尾切除 ,游离肠袢用 0 .2 5 %碘伏反复冲洗 ,…     

前庭性飞行错觉与地面模拟错觉关系探讨

目地：寻找预测及克服前庭性错觉的方法。方法：填写错觉调查表，了解飞行员前庭性飞行错觉发生情况。用转椅诱发地面模拟错觉。比较、分析这两者之间的关系。结果：276名歼、强机飞行员中，54名从未发生过飞行错觉，222名体验过前庭性飞行错觉。前庭性飞行错觉多的飞行员，地面模拟中出现错觉也多，但平均持续时间短。结论：由于前庭性飞行错觉及地面模拟错觉发生频率一致，使得在地面预测空中错觉的多发性成为可能。     

光动力学疗法选择性治疗鲜红斑痣的临床研究附40例报告

本文报道了用光动力学疗法治疗40例鲜红斑痣的临床结果。除2例光敏剂给药量过低无效外,其余38例治疗部位异常红色均达明显至完全消退,无1例疤痕形成,随访2～12个月(29例超过半年)无1例复发。研究发现光敏剂和照射光剂量与疗效呈正相关,病变呈紫红色和有增厚者仍具有良好的疗效。本文就病变类型、HpD剂量、光剂量、功率密度、给HpD后何时照光、重复治疗与疗效间的关系等进行了分析讨论。     

光动力疗法选择性治疗鲜红斑痣的机制探讨

本文用荧光方法对体外培养的人血管内皮细胞吸收HpD的特性,以及鸡活体静注HpD后血药浓度的动态变化进行了研究,以探讨PDT选择性治疗鲜红斑痣的作用机制。结果显示人血管内皮细胞可迅速吸收血中的HpD,30分钟达吸收高峰,其吸收量与HpD的浓度呈正相关。鸡静脉注射PsD—007和HpD后,分别于15和45分钟血清中药物浓度达高峰。表明血管内皮细胞可能是PDT作用的主要靶部位。     

光动力疗法治疗鲜红斑痣的研究进展

光动力疗法(photodynamic Therapy,PDT)是一种新型治疗手段,最初用于肿瘤的治疗,1991年国内首次将其应用于鲜红斑痣(port wine stain,PWS)的治疗,取得了良好的疗效,笔者就PDT治疗PWS的研究进展作一综述。