福氏志贺氏菌QRDR基因gyrA,parC及毒力基因ipaH的多重PCR检测

目的:建立快速检测福氏志贺菌致病性、耐药性的多重PCR方法。方法:根据福氏志贺菌耐药性基因gyrA,parC及毒力致病性基因ipaH,分别设计了3对引物,其PCR扩增产物分别为648,248和423bp,并进行单基因PCR和单管多重PCR扩增特异性和Tm值的优化。结果:该方法可同时检测福氏志贺菌gyrA,parC及ipaH三种标志性靶基因,其最优退火温度为57.5℃。结论:本方法操作简单,检测周期短,能够实现对福氏志贺菌样本的喹诺酮耐药决定区基因、毒力基因的并行快速检测。     

多发性肌炎/皮肌炎患者血清中外泌体的分离鉴定

目的从多发性肌炎/皮肌炎(polymyositis/dermatomyositis,PM/DM)患者外周血血清中分离鉴定外泌体(exosome),并进行初步的蛋白质研究。方法用Exo QuickTM试剂盒分离纯化PM/DM患者血清exosome;透射电镜观察其形态特征,Nanosight可视型纳米颗粒分析仪检测粒径大小分布情况;western blot鉴定exosome的表面标志物CD9,CD81,Flotillin-2;BCA法对其所携带的蛋白质进行定量分析;十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)初步分析其蛋白质组分。结果透射电镜下患者血清exosome呈圆形或椭圆形膜性小囊泡,直径分布范围92±67 nm;western blot结果表明,PM/DM血清来源的exosome存在表面标志物CD9、CD81、Flotillin-2;BCA法测定PM/DM患者exosome总蛋白浓度为14.68(6.00,32.55)μg/μL,健康组exosome总蛋白浓度为14.09(8.00,23.28)μg/μL,SDS-PAGE显示两组血清exosome均在Mr(×103)为55~70处有高丰度蛋白质富集,在Mr(×10~3)为40~55处存在差异条带。结论成功从PM/DM患者的外周血中分离出血清exosome,并为寻找差异蛋白质提供实验依据。     

产MUS-1型碳青霉烯酶香味类香味菌耐药性研究

; 目的 研究产MUS-1型碳青霉烯酶香味类香味菌的临床和微生物学特点。方法 通过16SRNA对临床VITEK-2型全自动微生物分析仪鉴定出的分离株进行鉴定,利用PCR技术来鉴定NUS-1基因,抗菌药物MIC使用肉汤稀释法进行鉴定。同时对产MUS-1型类香味香味菌感染的患者的临床治疗进行调查分析。结果 在本院肿瘤科患者的尿标本中发现一株产MUS-1型的香味类香味菌。药敏结果显示该细菌对常规所用的大多数抗生素均耐药,其中亚胺培南的最低抑菌浓度(MIC)为8ug/ml,判定为为中介。对米诺环素、美罗培南保持敏感。结论 携带blamus-1基因是导致该株香味类香味菌对碳青霉烯类药物耐药的原因,临床上的治疗应结合药敏试验制订治疗方案。     

帕金森病与Ⅱ型囊泡单胺转运体的相关性

帕金森病是一种中老年人常见的慢性进行性神经系统退行性疾病，其主要病理变化是黑质致密部多巴胺能神经元进行性死亡、残存神经元多巴胺合成能力降低，导致锥体外系运动调节功能减弱。中脑纹状体多巴胺含量的降低程度与多巴胺能神经元数目的减少程度相一致。突触前膜重摄取是多巴胺生理效应中止的主要方式，而多巴胺转运体是实现该生理功能的物质基础。进入突触前膜胞质的多巴胺，再经囊泡膜上的Ⅱ型囊泡单胺转运体转运至囊泡内，以待重新利用。国内外的许多研究表明帕金森病多巴胺能神经元的选择性缺失源于多巴胺自身氧化的内源性毒性。在突触前膜重摄取多巴胺的过程中，多巴胺转运体和Ⅱ型囊泡单胺转运体发挥转运递质和隐匿毒性物质的双重作用，有望成为帕金森病治疗的药物新靶标，并对传统的左旋多巴治疗方案提出了质疑。     

氯通道对血小板活化标志物PAC-1和P-选择素的影响

目的：探讨氯通道对血小板活化标志物PAC-1和P-选择素的影响。方法：采用Western blot和免疫荧光技术检测ClC-3在人外周血来源的血小板上的表达;ADP(20μM)不同时间点(15、30、60、120、180 min)处理血小板后,Western blot检测ClC-3蛋白的表达变化;利用流式细胞术检测空白对照组, ADP组,DIDS(100μM)+ADP组,NFA(100μM)+ADP组,NPPB(100μM)+ADP和低氯对照组,低氯+ADP组的血小板活化分子标志物PAC-1和P-选择素的表达变化。结果：在健康成人外周血分离的血小板上表达ClC-3蛋白;ADP时间依赖性地处理血小板,ClC-3蛋白表达呈增加趋势,15 min相较于空白对照组已有统计学意义(P<0.05);ADP组PAC-1(32.13%±2.0%)及P-选择素(52.32%±5.31%)表达均高于空白对照组(1.76%±0.41%,1.89%±0.32%,P<0.01);低氯对照组PAC-1(8.01%±1.36%)和P-选择素(12.19%±0.84%)的表达与空白对照组相比,均上调(P<0.05);与ADP组PAC-1相比, DIDS+ADP(5.62%±1.22%),NFA+ADP(1.96%±0.54%)和NPPB+ADP(3.56%±0.79%)组表达降低,低氯+ADP组(45.26%±4.43%)表达增加(P<0.01);与ADP组P-选择素相比,DIDS+ADP(16.64%±1.52%), NFA+ADP(4.97%±0.64%)和NPPB+ADP(8.56%±2.04%)组表达均降低,低氯+ADP组(73.33%±3.80%)表达增加(P<0.01)。结论：人血小板上ClC-3氯通道参与血小板的活化,氯通道阻断剂抑制ADP诱导的血小板活化,降低血小板胞外氯浓度可促进ADP诱导的血小板的活化。     

肾移植术后细菌感染的菌群分布及其药敏分析

目的 了解肾移植术后感染的病原菌分布及耐药性特点,为临床治疗肾移植术后感染的合理用药提供依据.方法 收集2006年1月至2010年12月我院220例肾移植患者术后送检的各类标本中分离的病原菌,细菌鉴定采用API鉴定系统,药敏试验采用K-B纸片扩散法,采用WHONET5.4软件对药敏结果进行分析.结果 220例肾移植患者术后感染的发生率为31.4％,病原菌分离部位主要以痰液、血液、尿液为主,占73.8％.共分离出病原菌84株,较常见的病原菌依次为：铜绿假单胞菌14株（16.7％）、大肠埃希菌12株（14.3％）、表皮葡萄球菌12株（14.3％）、金黄色葡萄球菌9株（10.7％）、肺炎克雷伯菌7株（8.3％）和白色假丝酵母5株（6.0％）.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶的检出率分别为50.0％和14.3％,表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌中的耐甲氧西林葡萄球菌检出率分别为58.3％和33.3％.主要革兰阳性球菌对万古霉素和替考拉宁敏感,革兰阴性杆菌对亚胺培南、美洛培南敏感.结论 感染是肾移植术后的主要并发症之一,应加强耐药监测,及早进行预防和治疗.     

促红细胞生成素衍生物的神经保护作用综述

促红细胞生成素(EPO)作为一种新型的神经保护剂,大剂量全身性地使用会引发严重的血源性不良反应。该文概括EPO主要的神经保护作用机制,并对无血源副作用的EPO衍生物进行分类,而后重点介绍它们在中枢神经系统疾病研究中的应用,旨在对目前EPO衍生物的开发现状有一个科学认识。     

案例式教学在临床免疫学检验实验教学中的应用

目前,案例式教学已逐步应用于医学教育。南京医科大学医学检验系近年来在临床免疫学检验实验教学中进行了案例式教学的应用探讨。本文对比了案例式教学与传统教学方法的优缺点,并介绍了我系在临床免疫学检验实验教学中应用案例式教学的具体方法、应用体会,以及案例式教学在实施过程中存在的问题及解决方案。     

社区成年健康人群鼻咽部主要机会致病菌耐药性分析

目的分析南京部分社区成年健康人群鼻咽部5种主要机会致病菌(凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯菌)的耐药情况。方法将2009年7月至2010年7月分离自社区成年健康人群鼻咽部的5种主要机会致病菌分别进行纸片扩散法药敏试验和琼脂稀释法。按CLSI 2010年标准判定结果,用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 1019例社区成年健康受检者鼻咽部标本中分离出凝固酶阴性葡萄球菌404株,其中甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)162株(占40.10%);金黄色葡萄球菌109株中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)19株(17.43%);两种葡萄球菌对青霉素均表现出高度耐药,对万古霉素100%敏感,MRSA和MRCNS对多种临床常用抗菌药物均显示高度耐药。肺炎克雷伯菌32株,除对阿莫西林/克拉维酸耐药率稍偏高(39.20%),对其他常用抗菌药物敏感性皆较高,ESBLs阳性率为25.00%。49株肺炎链球菌中大部分对红霉素、克林霉素和青霉素表现出较高的耐药率,分别为71.20%、76.90%和74.40%。流感嗜血杆菌74株,对复方新诺明耐药率最高,为44.4%,但对其他常用的抗菌药物敏感性均较高。结论南京部分社区健康成年人鼻咽部所携带的主要机会致病菌中,MRSA和MRCNS对多种临床常用抗菌药物均显示高度耐药,未发现对万古霉素耐药的葡萄球菌。肺炎链球菌对常用的红霉素、克林霉素和青霉素显示了高耐药。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯菌对多数常用的抗菌药物敏感性均较高。加强细菌耐药监测,防止耐药菌在社区的扩散尤为重要。     

58例局限期食管小细胞癌治疗分析北大核心CSCD

目的探讨原发性食管小细胞癌的不同治疗方法的疗效。方法回顾性分析58例局限期食管小细胞癌,其中手术联合化疗18例,序贯放化疗23例,同步放化疗17例,采用Kaplan-Meier及Log rank法分析其生存时间,并探讨三种方法的失败原因。结果手术联合术后化疗组中位生存期为15.2月,其1、2及3年生存率分别为66.7%、33.3%及16.7%;序贯放化疗组中位生存期为17.3月,其1、2及3年生存率分别为69.6%、39.1%及21.7%,与手术联合组比较差异无统计学意义;同步放化疗组中位生存期为25.8月,其1、2及3年生存率分别为82.4%、52.9%及35.3%,与手术联合化疗组及序贯放化疗组,同步放化疗组生存时间明显延长。失败的主要原因是远处转移和局部复发,其中手术联合术后化疗组有15例出现远处转移;序贯放化疗组中有18例出现远处转移,与手术联合化疗组比较差异无统计学意义(P>0.05);同步放化疗组有9例出现远处转移,较手术联合化疗组及序贯放化疗组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对局限期原发食管小细胞癌同步放化疗疗效较好,治疗失败的主要原因是远处转移。