双氢睾酮体外培养人毛囊中差异表达的miR-133b对人毛乳头细胞的增殖及诱导能力的影响

探究不同浓度双氢睾酮（DHT）对毛囊生长和毛囊细胞增殖的影响及其与miR-133b表达的关系,然后进一步探究miR-133b对毛乳头细胞的增殖和诱导能力的影响。     

甘草酸二铵对人毛囊生长作用及对Wnt/β连环蛋白信号通路的影响

目的 探讨甘草提取物甘草酸二铵对体外培养人毛囊生长的作用并检测Wnt/β连环蛋白信号通路相关分子的表达。方法 分别将体外分离人毛囊培养于0.1、0.01、0.001、0.000 1 μmol/L浓度的甘草酸二铵中10 d,并设置不添加甘草酸二铵Williams E培养基组为对照组,显微镜下每日测量并记录其生长长度,观察毛囊形态改变并拍照。用免疫荧光评估毛母质细胞增殖情况及毛母质细胞中Wnt/β连环蛋白信号通路各主要分子β连环蛋白、GSK3β、p?GSK3β、Lef1表达情况。采用重复测量方差分析及单因素方差分析进行统计学分析。结果 重复测量方差分析显示,与对照组相比,仅0.01 μmol/L甘草酸二铵对毛囊生长的促进作用有统计学意义（P < 0.05）,其余各组与对照组相比差异无统计学意义（均P > 0.05）。与对照组相比,0.01 μmol/L甘草酸二铵组毛囊进入退行期时间推迟,而其余各组与对照组相比均无明显变化。免疫荧光显示,与对照组相比,0.1、0.01、0.001 μmol/L浓度组毛母质细胞中ki67阳性细胞较多,而0.000 1 μmol/L浓度组无明显区别。单因素方差分析显示,β连环蛋白、p?GSK3β、Lef1在各组中的表达量差异有统计学意义（F =12.604、16.65、15.266,均P < 0.05）,而GSK3β在各组中的表达差异无统计学意义（F =1.472,P > 0.05）。LSD?t检验显示,与对照组相比,0.1、0.01、0.001 μmol/L浓度组毛母质细胞中β连环蛋白、p?GSK3β、Lef1表达量较多（均P < 0.05）,而0.000 1 μmol/L浓度组与对照组差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 0.01 μmol/L甘草酸二铵具有明显促进人毛囊生长的作用,可增强毛母质细胞增殖活性,延迟毛囊进入退行期,该作用可能与其激活Wnt/β连环蛋白信号通路相关。     

地耳草HPLC指纹图谱的研究

目的建立地耳草HPLC指纹图谱分析方法,评价不同产地、商品地耳草药材的质量。方法用HPLC技术对不同产地、商品地耳草进行分析,测定其指纹图谱,并作模糊聚类法分析和相似度评价。结果初步建立了以10个共有峰为特征指纹信息的HPLC指纹图谱;发现少数产地、商品地耳草HPLC指纹图谱有一定差异。结论方法准确可靠,重现性好,可作为地耳草内在质量评价的依据。     

地耳草HSGC-MS指纹图谱的研究

目的 建立地耳草挥发性成分HSGC-MS指纹图谱分析方法,为地耳草质量评价提供依据.方法 用HSGC-MS联用技术对地耳草的挥发性成分进行分析,建立其指纹图谱,确定共有指纹峰,并作模糊聚类法分析和相似度评价.结果 地耳草挥发性成分中含有12个特征性指标成分,初步建立了以此12个共有峰为特征指纹信息的HSGC-MS指纹图...     

高效毛细管电泳二极管阵列检测法同时测定地黄饮片中5种指标成分的含量

 目的 建立高效毛细管电泳二极管阵列检测法（HPCE-DAD）同时测定地黄饮片中梓醇、桃叶珊瑚苷、栀子苷、毛蕊花糖苷和肉桂酸含量的方法。方法 以60 mmol·L¹硼砂缓冲液(5%甲醇,pH 9.5) 为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(75 μm×64.5 cm, 有效长度56 cm)为分离通道,分离电压为20 kV,检测波长为210 nm,毛细管温度为25 ℃,压力进样为5 kPa×6 s。结果 5种指标成分的浓度与峰面积的线性关系良好( r > 0.997 8) ;加样回收率为97.63%～103.03%。用此法测定了地黄饮片中5种指标成分的含量,得到满意结果。结论 该方法简单、准确,重复性较好,可用于地黄饮片内在质量的评价和控制。     

高效毛细管电泳测定玄参中6种指标成分的含量

 目的 建立高效毛细管电泳法（HPCE）同时测定不同批次玄参中梓醇、桃叶珊瑚苷、哈巴苷、哈巴俄苷、毛蕊花糖苷和肉桂酸含量的方法。方法 以60 mmol·L^-1硼砂缓冲液(pH 9.3) 为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(75 μm×64.5 cm, 有效长度56 cm)为分离通道,分离电压为20 kV,检测波长为210 nm,毛细管温度为25 ℃,压力进样为5 kPa×6 s。结果 6种指标成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r>0.997 1) ;加样回收率为97.05%～103.43%。用此法测定了玄参药材中梓醇、桃叶珊瑚苷、哈巴苷、哈巴俄苷、毛蕊花糖苷和肉桂酸等6种指标成分的含量,得到满意结果。结论 该方法简单、准确,重复性较好,可用于玄参药材内在质量的评价和控制。
     

基于lncRNA-miRNA-mRNA网络研究慢性髓系白血病的甲磺酸伊马替尼耐药机制

目的 通过对甲磺酸伊马替尼（IM）处理的K562和K562G细胞长链非编码RNA(lncRNA)、微小RNA(miRNA)、信使RNA(mRNA)表达谱进行检测,探究慢性髓系白血病（CML）对IM耐药的分子机制。方法 实验分为K562组、K562G组、K562+IM组、K562G+IM组4组,各组细胞分别培养0,6,12,24 h,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测各组细胞增殖情况;基因芯片技术检测培养最适时间时细胞lncRNA、miRNA、mRNA的表达情况,并采用定量反转录PCR(qRT-PCR)法对差异lncRNAs进行验证;通过组间比较,获得耐药特异性基因并对耐药特异性mRNAs进行基因本体（GO）富集分析及生物学通路分析,然后选取耐药特异性基因用于lncRNA-miRNA-mRNA(ceRNA)网络的构建。结果 加入IM培养24 h时,K562细胞增殖抑制率达90%以上;与K562细胞比较,K562G细胞增殖抑制率较低（P<0.01）。qRT-PCR结果显示,11个lncRNAs的表达情况和芯片分析的结果一致（P<0.01...     

探讨游离脂肪酸对近曲肾小管上皮细胞HK-2的影响及作用机制

目的探讨游离脂肪酸（Free Fatty Acids,FFAs）对人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）的影响及作用机制。方法用含有不同浓度（0、125、250、500μmol/L）软脂酸的DMEM-F12培养人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）,在0h、24h、48h三个时段：MTT法检测不同环境下FFAs对HK-2细胞增殖的影响,流式细胞术检测FFAs对细胞凋亡和细胞周期的影响,免疫细胞化学法检测处理前后HK-2细胞中白细胞介素-β（IL-β）、白细胞介素-8（IL-8）表达的变化。结果 FFAs呈剂量和时间依赖性抑制HK-2细胞的增殖（P〈0.05）,并可能通过阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡（P〈0.05）。经FFAs作用后,IL-β、IL-8的表达增加。结论游离脂肪酸有抑制HK-2细胞增殖,促进其凋亡的作用,同时炎性细胞因子IL-β、IL-8表达增多,参与了其发生和发展的过程。     

黄芪饮片HPCE指纹图谱的研究

目的:建立黄芪饮片HPCE-DAD指纹图谱分析方法,并对黄芪及其炮制品的指纹谱进行比较。方法:采用高效毛细管电泳法进行色谱分离,以40mmol.L-1硼砂-20mmol.L-1硼酸-10%甲醇(pH=8.7)为电泳介质,分离电压为20kV,波长为210nm,以黄芪甲苷为参照物(IS),测定其指纹图谱,并作相似度评价。结果:初步建立了以9个共有峰为特征指纹信息的黄芪饮片HPCE-DAD指纹图谱;发现少数黄芪饮片的指纹图谱有一定差异,生品与其炮制品的指纹谱差异显著。结论:方法准确可靠,重现性好,可作为黄芪饮片内在质量评价的依据。