大鼠脊髓全横断损伤模型的建立

目前用于脊髓全横断的动物模型,常遗有部分未损脊髓组织,局部脊髓损伤范围很大,尤其是破坏了的血运扩大了继发性变性,造成了复杂的局部病理变化,致使难以分析治疗性脊髓伤区内移植的疗效。因此迫切需要一种还原论式的脊髓横断模型,本实验设计了一种切割辅以吸除的方法,可以在局部造成平均约0.6mm的清洁横断区,同时保存脊髓腹、背动脉及脊髓背静脉的大鼠脊髓横断模型,并用H.E.染色法、神经丝(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫组织化学方法及生物素化的葡萄糖胺(BDA)的追踪方法检验损伤区及其两侧脊髓的组织反应。     

GABA_A受体与地西泮的缺血后脑保护作用有关

研究GABAA受体是否参与地西泮的缺血后脑保护作用。SD雄性大鼠24只,用光化学法制作脑梗死模型。根据给药的不同将动物随机分为4组,每组6只。地西泮组腹腔注射地西泮10mg/kg;地西泮+bicuculline组腹腔注射地西泮10mg/kg和bicuculline2.1mg/kg;bicuculline组腹腔单独注射bicuculline2.1mg/kg;对照组腹腔注射等量的生理盐水。从术前24h开始注射,每8h一次,直至处死。术后动物存活24h,然后在深麻下灌流固定、取脑、切片。在Nissl染色的切片上计算最大脑梗死面积,用TUNEL染色计数梗死区凋亡细胞数。地西泮组最大脑梗死面积和TUNEL阳性细胞数明显少于其它三组(P<0.01)。地西泮的脑保护作用可被GABAA受体拮抗剂bicuculline部分抵消,因而地西泮可能部分通过GABAA受体发挥脑保护作用。     

IL-1受体I型在大鼠颈上节神经元中的表达

目的　在蛋白水平研究 IL - 1受体 I型在大鼠颈上节中的表达 .方法　免疫组织化学 ABC方法 .结果　在正常大鼠颈上节中 ,有大量 IL - 1受体 I型免疫反应阳性细胞 ,多为中、小型神经节细胞 ,也有一些小强荧光细胞 ( SIF)呈 IL- 1受体 I型阳性 . L PS免疫刺激后 ,阳性细胞的数量和染色强度无明显变化 .结论　大鼠颈上节神经元存在 IL- 1受体 ,表明周围植物性神经元能对促炎性细胞因子起反应 .本研究为免疫性细胞因子影响植物性神经元的信号活动提供了形态学基础     

脾非淋巴细胞条件培养液作用于颈上节的实验观察

探讨脾非淋巴细胞是否能够产生具有生物活性的神经营养因子 .分离 BAL B/ c小鼠非淋巴细胞并进行原代培养 ,收集培养上清液作为条件培养液孵育新生小鼠颈上节 6 0 h.结果显示 ,与对照培养液相比 ,条件培养液能够显著地促进体外培养中颈上节交感神经生长锥的发育 ,且这一作用在不同程度上可被抗 NGF和 NT- 3抗体特异性阻断 .免疫组化染色证实培养的脾非淋巴细胞中有抗神经生长因子 (NGF)和神经营养素 - 3(NT- 3)免疫反应产物的存在 .结果表明 ,脾非淋巴细胞能够产生具有生物活性的神经营养因子 ,后者可能在维持交感神经形态和功能方面起作用     

次声对大鼠大脑皮层神经元型NOS和诱导型NOS mRNA表达的影响

探讨次声作用于大鼠后,大脑皮层神经元型一氧化氮合酶（ｎＮＯＳ）和诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）表达的变化。方法雄性ＳＤ大鼠放入次声舱,经８Ｈｚ,１２０ｄＢ作用２ｈ,每日１次,分别于１,７和１４ｄ处死动物,取大脑皮层提取总ＲＮＡ,进行ＲＴ－ＰＣＲ,以未经次声作用的作照,检测ｎＮＯＳ和ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达的变化。结果次声连续作用,７,１４ｄ后,ｎＮＯＳｍＲＮＡ表明显降低次声作用１ｄ后,ｉＮＯＳ开始表达     

氧化应激后大鼠神经元内Nogo-A的表达变化

目的 :探讨大鼠大脑皮层神经元受到氧化应激后Nogo A表达的变化及其可能的作用 .方法 :体外原代培养大鼠大脑皮层神经元 ,给予不同浓度H2 O2 处理 8h后 ,倒置相差显微镜下观察神经元的形态学变化、Hoechst33342和PI染色观察凋亡和坏死情况 ,然后Westernblot观察Nogo A的表达变化 .结果 :大鼠皮层神经元受到 10和 10 0 μmol/LH2 O2刺激后 ,神经元出现胞体回缩、变圆甚至崩解 ,突起断裂、脱落等细胞受损的现象 ;Hoechst33342和PI染色观察到 1μmol/LH2 O2 时神经元凋亡和坏死比例与对照组相比没有差别 ,而 10和 10 0 μmol/LH2 O2 刺激后 ,神经元凋亡和坏死比例明显增加 (P <0 .0 5 ) .Westernblot结果显示 ,1μmol/LH2 O2 时No go A的表达量与对照组相比无明显差异 ,而在 10和 10 0μmol/L时Nogo A的表达量明显升高 (P <0 .0 5 ) .结论 :氧化应激可以上调神经元Nogo A的表达 .     

Nogo-66受体在成年大鼠脊髓白质内胶质细胞的分布

目的：研究Nogo-66受体(NgR)在成年大鼠脊髓白质的分布情况．方法：选用正常雄性SD大鼠脊髓切片,进行免疫组织化学、免疫荧光双标和包埋前免疫电镜染色,观察NgR免疫阳性物质在脊髓白质的定位情况．结果：在光镜水平可观察到NgR阳性的点状结构主要分布在脊髓白质胶质细胞胞体周边和突起上,且与细胞膜关系密切;在电镜水平可观察到NgR阳性的胶体金颗粒分布在星形胶质细胞之间,寡突胶质细胞之间以及星形胶质细胞和寡突胶质细胞之间的缝隙连接上．结论：本研究提供了NgR在正常成年大鼠脊髓白质胶质细胞分布并且在缝隙连接定位的形态学证据,提示NgR可能在胶质细胞间的通讯中发挥一定的调节功能。