粘蛋白1在外阴鳞癌中的表达及意义

目的:探讨粘蛋白1(MUC1)在外阴上皮内非瘤样病变、外阴上皮内瘤变(VIN)和外阴鳞状细胞癌(VSCC)中的表达及意义。方法:采用免疫组化方法对50例VSCC、35例VIN、20例外阴上皮非内瘤样病变、10例正常外阴表皮进行研究,同时将MUC1的表达与外阴肿瘤的临床病理特征相比较。结果:MUC1蛋白在VSCC中表达及阳性细胞率高于VINⅢ、VINⅡ(P<0.05),在VINⅠ-Ⅱ和正常表皮无表达;MUC1阳性细胞率在高与中/低分化的VSCC中差异显著(P<0.05)。MUC1表达与VSCC病人的年龄、临床分期和淋巴结转移无统计学差异(P>0.05)。结论:MUC1没有参与正常外阴鳞状上皮细胞的生长和分化过程;无论细胞有无异型性,MUC1的表达与细胞的增殖活跃有关;MUC1的表达与外阴癌变有关,可能是外阴癌前病变的晚期事件;MUC1表达与外阴鳞癌的分化程度呈负相关。     

X射线全身照射对小鼠胸腺细胞p53、p21、GADD45及MDM2蛋白表达的影响

目的：观察电离辐射全身照射对小鼠胸腺细胞ｐ５３、ｐ２１、ＧＡＤＤ４５ 及ＭＤＭ２ 蛋白表达的影响。方法：采用间接免疫荧光标记,流式细胞术检测蛋白表达的变化。结果：２ Ｇｙ Ｘ射线照射后１～８ ｈ ｐ５３ 蛋白表达显著增高;照射后４～４８ ｈ ｐ２１ 蛋白表达显著增高;ＭＤＭ２ 蛋白在照后４ ｈ 及８ ｈ 显著增高;而ＧＡＤＤ４５ 蛋白表达在照后１～４８ ｈ 内无明显变化。结论：电离辐射可诱导胸腺细胞ｐ５３、ｐ２１ 及ＭＤＭ２ 蛋白表达增高。此结果将对辐射诱导胸腺细胞Ｇ１ 期阻滞的分子通路研究有重要意义。     

辐射诱发胸腺淋巴瘤Kras基因的表达及其启动子甲基化

目的： 研究辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤Kras基因mRNA和蛋白表达的变化,并检测其启动子CpG岛甲基化状态,探讨辐射致癌的发生机制。方法：采用X射线照射30只BALB/c小鼠,建立胸腺淋巴瘤动物模型,取胸腺淋巴瘤和正常胸腺组织,分别提取总mRNA、合成cDNA和总蛋白,采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和Western blotting法分别检测Kras基因mRNA和蛋白表达水平,采用硫化测序PCR (BSP)法检测Kras基因启动子CpG岛甲基化状态。 结果：RT-PCR法检测,胸腺淋巴瘤Kras基因mRNA相对表达水平明显高于正常胸腺组织（P<0.01）;Western blotting法检测,胸腺淋巴瘤Kras基因蛋白表达水平高于正常胸腺组织近1.41倍;BSP法检测,正常胸腺组织Kras基因启动子有4个CpG位点发生甲基化,而辐射诱发胸腺瘤Kras基因启动子有1个CpG位点发生甲基化,呈去甲基化状态。结论：电离辐射可能通过Kras基因启动子去甲基化而引起Kras基因mRNA和蛋白表达水平改变,进而导致肿瘤的发生,其可能是辐射致癌的发生机制之一。     

精神分裂症与亲核素β基因多态性关系

目的探讨亲核素β(KPNBs)中KPNB1和KPNB2基因与精神分裂症的关系。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,收集中国吉林省汉族精神分裂症患者及其健康父母双亲组成的233个核心家系成员,分别检测位于KPNB1和KPNB2基因上的2个单核苷酸多态性(SNPs)rs11871606和rs266443。利用拟合优度χ²检验分析等位基因和基因型分布频率是否符合哈迪-温伯格定律(Hardy-WeinbergLaw),应用遗传统计学软件(UNPHASED)进行2个SNPs的传递不平衡检验(TDT)以及双位点联合作用分析。结果患者组与其父母组比较,KPNB1基因rs11871606及KPNB2基因rs266443等位基因和基因型频率的分布差异均无统计学意义(P>0.05),符合Hardy-Weinberg平衡定律;TDT结果提示,KPNB1基因rs11871606及KPNB2基因rs266443与精神分裂症无连锁及关联。双位点联合作用分析结果显示,rs11871606与rs266443两位点未显示联合作用(P>0.05)。结论KPNB1基因rs11871606位点及KPNB2基因rs266443位点多态性可能与精神分裂症无关,但不能排除KPNB1基因及KPNB2基因其他SNPs与精神分裂症相关联。     

辐射及细胞因子对p21基因表达的调控作用

p21基因是细胞周期的负向调控因子,在一定的因素诱导下,p21基因可有效地引起细胞周期G1期和G2期阻滞,从而在维持基因组稳定性中起重要作用。辐射及TGFβ1、TNFα、PTEN、IGF等因子均可诱导p21基因表达增高,而E1A、c-jun、Tbx2、PLD1和PLD2等因子则抑制p21基因表达。     

survivin与X射线诱导的染色体不稳定性

目的 探讨survivin基因在X射线诱导染色体不稳定性中所起的作用。方法 用免疫细胞化学的方法检测survivin蛋白在HeLa细胞中的表达水平，并通过转染小片段发卡状RNA干扰HeLa细胞中survivin蛋白表达。转染后细胞接受4Gy X射线照射，用流式细胞术检测照后0、4、12和48h的多倍体细胞发生率，并与单纯接受4Gy X射线的对照组相比较。结果 转染小片段发卡状RNA能够有效抑制HeLa细胞中survivin蛋白表达，转染48h抑制率达到32．16％。细胞接受4Gy X射线照射后，多倍体细胞所占比例在48h时高于对照组（P〈0．001）。而抑制survivin蛋白表达后，多倍体细胞所占比例于12和48h明显升高，大约是对照组的2倍以上。结论 X射线照射可以诱导HeLa细胞发生染色体不稳定性。干扰survivin表达可以加强该效应，因而survivin在维持染色体稳定性方面发挥着重要作用。     

DNA甲基化与电离辐射效应

随着人类基因组计划的完成,表观遗传学开始成为关注的热点.DNA甲基化是研究最早且较深入的表观遗传学标志之一.越来越多的研究表明,DNA甲基化在肿瘤的发生及演进过程中起着重要的作用.笔者着重综述了DNA甲基化及电离辐射诱导的DNA甲基化改变,探讨在辐射致癌表观遗传学机制研究中的作用.     

人类13q32精神分裂症易感基因的研究

目的　在中国人群中探讨人类 13q32区域内与精神分裂症相关的易感基因位点。 方法　以中国汉族精神分裂症患者和他们的健康父母双亲组成的 91个核心家系为研究对象。采用聚合酶链式反应 -限制性片段长度多态性 (PCR -RFLP)方法对 13q32区域内分别位于STK2 4位点和GPC6位点上的 2个单核苷酸多态性 (SNPs)rs1886 0 89和rs2 892 6 79进行检测。利用拟合优度卡方检验分析基因型分布频率是否符合Hardy -Weinberg平衡定律 ,单体型相对风险分析 (HRR)和传递不平衡检验 (TDT)用于数据基因型分析。结果　 (1)STK2 4 /GPC6基因型频率分布符合Hardy -Weinberg平衡 (P >0 0 5 ) ;(2 )HRR结果显示 ,rs1886 0 89和rs2 892 6 79两个基因多态性与精神分裂症无关联 (P >0 0 5 )。TDT结果表明 ,父母和受累子女之间不存在显著的传递不平衡 (P >0 0 5 ) ,即杂合父母传递给受累子女的等位基因无差异 ;(3)STK2 4rs1886 0 89等位基因与精神分裂症的两种临床症状真性幻听和情感淡漠相关 (χ2 =6 0 0 5df=1P <0 0 5 ;χ2 =6 0 74df=2P <0 0 5 )。GPC6rs2 892 6 79等位基因与精神分裂症的思维贫乏相关(χ2 =6 0 94df=2P <0 0 5 )。结论　STK2 4rs1886 0 89和GPC6rs2 892 6 79基因多态性与精神分裂症的 3种临床症状相关联     

DNA甲基化与电离辐射效应

随着人类基因组计划的完成,表观遗传学开始成为关注的热点.DNA甲基化是研究最早且较深入的表观遗传学标志之一.越来越多的研究表明,DNA甲基化在肿瘤的发生及演进过程中起着重要的作用.笔者着重综述了DNA甲基化及电离辐射诱导的DNA甲基化改变,探讨在辐射致癌表观遗传学机制研究中的作用.     

蝎毒组分Ⅰ对卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用

目的：观察蝎毒组分Ⅰ(SV-Ⅰ)对卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用。方法：卵巢癌细胞SKOV3分为空白对照组和SV-Ⅰ处理组(终浓度分别为200、400、800 mg•L^-1)，采用MTT法检测SV-Ⅰ对卵巢癌细胞SKOV3生长抑制率，集落形成法检测肿瘤细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果：200、400和800 mg•L^-1-1组, SKOV3细胞集落数分别为57.00±6.16和48.00±4.11，明显低于对照组（84.00±5.29）(P<0.01)；与空白对照组比较，400 mg•L^-1组SKOV3细胞S期细胞数明显减少（P<0.01），G₂+M期细胞明显增多 (P<0.01)， 800 mg•L^-1组SKOV3细胞G₂+M期细胞数明显减少（P<0.01），G₁期细胞数有增多趋势；与空白对照组比较，400 和800 mg•L^-1组SKOV3凋亡细胞数明显增加（P<0.01）。结论：在一定浓度范围内蝎SV-Ⅰ可明显抑制卵巢癌细胞SKOV3的生长，其机制与SV-Ⅰ抑制SKOV3细胞DNA合成、诱导SKOV3细胞发生G₂+M和G₁期阻滞及诱导SKOV3细胞凋亡有关。