基因转染促骨髓间质前体细胞体外向软骨的分化**☆

目的：骨髓中包含的间质前体细胞在适宜的条件下可以被许多细胞因子诱导分化为软骨。采用基因转染技术观察转化生长因子β2对体外培养的骨髓间质前体细胞向软骨分化的影响。 方法：实验于2005-12/2007-01在中日友好医院临床研究所骨科实验室完成。①骨髓标本来源于6名志愿者，对治疗及实验均签署知情同意书，实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法：志愿者局麻下行骨髓穿刺，抽取7.0~10.0 mL骨髓抗凝，以密度梯度离心法分离人骨髓间质前体细胞，通过脂质体介导转染技术，将pcDNA3.1(+)TGF-β2载体导入骨髓间质前体细胞中，体外单层培养。③实验评估：利用RT-PCR、Western Blotting和免疫组化法检测转化生长因子β2和软骨相关基因、蛋白的表达情况。 结果：①转染后48 h，可检测到明显的转化生长因子β2 mRNA表达，Ⅱ型胶原A1和Aggrecan mRNA均有轻微表达；转染后4周，转化生长因子β2 mRNA表达稍有降低，Ⅱ型胶原A1和Aggrecan mRNA表达均明显上调。②转染后48 h和4周，间质前体细胞培养上清液中均有转化生长因子β2蛋白的表达。③转染后48 h部分细胞显示Ⅱ型胶原蛋白免疫组化阳性信号，转染后4周Ⅱ型胶原蛋白阳性细胞数增加。 结论：pcDNA3.1(+)/TGF-β2真核表达载体在骨髓间质前体细胞内可获得短暂和长期表达。在单层培养的情况下，骨髓间质前体细胞可被转化生长因子β2诱导向软骨方向分化。     

人参皂甙单体Rh2诱导髓性白血病细胞株凋亡的时效与量效★

目的：已发现人参中某些有效组分能增强和激活机体免疫系统，具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射等多种生物活性作用。选取人髓性白血病细胞株HL60为模型，探讨人参皂甙单体Rh2抑制其增殖和诱导凋亡的时效量效关系。 方法：实验于2006-07/08在吉林医药学院临床检验实验室进行。①材料：人参皂甙单体Rh2购自吉林省宏久生物科技股份有限公司，批号050801，溶于pH 7.4磷酸盐缓冲液中配成50 g/L母液。人髓性白血病细胞株HL60购自中国科学院上海生物细胞研究所。②实验方法：取处于对数生长期的HL60细胞制备3×108 L-1细胞悬液，接种后6 h分别加入终浓度为5，10，20，40，80 mg/L的人参皂甙单体Rh2 100 μL，于加药48 h后采用MTT比色法检测人参皂甙单体Rh2对HL60细胞生长的抑制作用，计算抑制率和半数抑制浓度。选择半数抑制浓度的人参皂甙单体Rh2处理HL60细胞，分别于作用6，12，24，48，72 h后采用MTT比色法测定抑制率，并与未加药对照组进行比较。半数抑制浓度的人参皂甙单体Rh2作用48 h时倒置显微镜下观察HL60细胞形态，吉姆萨染色观察细胞凋亡情况。 结果：①量效关系：人参皂甙单体Rh2浓度为5，10，20，40 mg/L时，处理48 h后HL60细胞生长抑制率呈升高趋势（F=9.45，P < 0.01），具有明显的剂量依赖性；至80 mg/L时抑制率与40 mg/L基本相似。加药48 h后半数抑制浓度为13.0 mg/L。②时效关系：13.0 mg/L人参皂甙单体Rh2处理HL60细胞6，12，24，48，72 h后，抑制率逐渐升高（F=9.32，P < 0. 01），呈时间依赖性。③HL60细胞形态观察：与未加药对照组比较，经13.0 mg/L人参皂甙单体Rh2处理后HL60细胞数量明显减少，细胞分散，体积缩小，细胞核呈碎片状。④凋亡细胞吉姆萨染色检测：经13.0 mg/L人参皂甙单体Rh2处理后，HL60细胞出现核染色质浓缩、呈周边凝聚，核膜裂解形成凋亡小体、胞质出现空泡但胞膜完整的典型细胞凋亡形态学改变。 结论：人参皂甙单体Rh2能有效抑制体外培养HL60细胞的增殖，并诱导其凋亡，干预效果呈时间和剂量依赖。     

免疫固定电泳在多发性骨髓瘤诊断中的应用

目的:探讨免疫固定电泳对于多发性骨髓瘤的应用意义。方法:对115例建议进行免疫电泳检测的患者检测血清M蛋白和浓缩尿中的M蛋白,并根据M蛋白的结果进行分型。结果:115例患者中血清M蛋白阳性为45例,浓缩尿M蛋白阳性结果47例,两者均阳性的患者为38例,经调阅病例临床确诊为多发性骨髓瘤的是34例,其中IgG为22例(64.7%),IgA为8例(23.53%),IgM为2例(5.88%),轻链型为2例(5.88%)。结论:免疫固定电泳对于多发性骨髓瘤的诊断、病情监测、预后的判断具有重要意义。     

抗凝血不同检测时间血小板可逆聚集的探讨

目的：探讨抗凝血不同检测时间对血小板（PLT）可逆聚集的影响因素,提高检测结果准确性。方法：使用BC—3000血液分析仪,对200例健康人静脉血2ml按常规平行测定3次,然后分别于5、10、20、30、60min时各测定3次,并用全血质控物同步监测仪器,分别计算其均值,按时间分组,分别利用样本均数间显著性检验与配对检验进行统计学分析。结果：经EDTA-K2抗凝血标本在采血30min后进行全血细胞分析可提高结果的准确性。结论：EDTA-K2静量30min后再行测定,可消除假阳性结果。     

Leptin对HUVECs的氧化应激和增殖作用

目的观察Leptin对脐静脉内皮细胞（HuvEcs）的氧化应激作用及增殖的影响及其有关机制的探讨。方法体外胶原酶法消化分离培养HUVECs进行免疫荧光鉴定;观察Leptin对HUVECs的活性氧簇（ROS）水平的变化的影响;运用MTT比色法测定leptin及抑制剂对HU—VECs增殖的影响,并分别测定增殖率及抑制率。结果胶原酶消化法分离培养的内皮细胞经纯度高;Leptin能显著增加HUVECs内活性氧簇的产量。（与对照组比较,P〈0．01）,上述变化可以被NADPH氧化酶抑制剂-二苯基碘（DPI）和PKC抑制剂（PKCinhibitor）所抑制;Leptin能显著促进HUVECs增殖,与对照组比较,增殖率达36％,运用DPI和PKC抑制剂可以明显抑制leptin对HUVECs的增殖作用．DPI的抑制率达37％,PKC抑制剂的抑制率达43％,（与对照组比较,P均〈0．01）。结论体外消化分离培养的脐静脉内皮细胞纯度较高可以成功运用于实验;Leptin能提高HUVECs内ROS的产量,即leptin可以促进内皮细胞的氧化应激反应;Leptin可以通过PKC途径提高ROS水平促进HUVECs增殖。     

老年食管癌的放疗及放化综合治疗的研究进展

食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一,食管癌的死亡占全部恶性肿瘤死亡的16．05％,居第四位。该病原发于黏膜上皮,大多为鳞癌,少数为腺癌,其治疗的方法根据患者的病期、病变的部位、患者一般情况及有无转移来决定是否手术、放疗、化疗或综合治疗。随着社会老龄化的来临,老年人口的比重逐渐增加,老年食管癌患者的比重也逐渐增加,因此对这类患者的治疗尤为重要。     

奥运药品安全保障战时监管模式对监管思路的启示

奥运会和残奥会在北京的召开给我国社会公共管理各领域带来了前所未有的挑战,公共安全便是其中之一。药品安全在奥运安保工作中占有极为重要的地位,含兴奋剂药品更是药品安全监管的重中之重。作为药品安全保障机构,药品监督管     

做好档案馆各项业务工作充分发挥馆藏社会功能

档案馆为社会开展提供档案服务等业务工作，是使档案馆社会功能得以发挥的前提，只有努力做好馆内各项工作，才能充分发挥其社会功能。     

在网络环境下如何进行档案创新服务

当前档案丁作者的重要使命就是开发和利用档案信息资源。不断创新档案服务机制，积极主动地为经济建设主战场服务，为全面建设小康社会服务。要通过计算机网络为用户提供服务，并加强各项事务管理，促使档案管理现代化。文章讨论了如何通过计算机网络．开发和利用档案信息资源，实现档案服务机制创新，为经济建设主战场和用户提供服务。