坎地沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化及肾脏骨桥蛋白表达的影响

目的 观察坎地沙坦(CAN)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响,并观察骨桥蛋白(OPN)与肾间质纤维化的关系及CAN干预对肾脏OPN表达的影响,探讨其在纤维化中的作用机制.方法 (1)36只成年雄性SD大鼠随机分为3组,每组12只:假手术组(Sham)、UUO模型组(UUO)、坎地沙坦治疗组(CAN).UUO模型组和CAN组大鼠行左侧输尿管结扎术,Sham组只游离左侧输尿管但不结扎.CAN组于术前1 d开始用CAN治疗[10 mg/(kg·d)]灌胃.术后第7、14天分别处死大鼠,左侧肾脏组织行Masson染色,免疫组织化学方法检测肾组织中OPN的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测OPN mRNA表达水平.结果 Masson染色结果显示术后7 d和14 d UUO组大鼠肾纤维化阳性面积分别为15.2%和24.8%,CAN组为1O.1%和18.5%.CAN组与UUO组大鼠术后7 d和14 d大鼠肾纤维化阳性面积差异有统计学意义(P＜0.05).UUO模型大鼠OPN蛋白及mRNA水平均较Sham组明显升高(P＜0.01),CAN组OPN蛋白及mRNA水平较UUO组明显降低(P＜0.05),但较Sham组高(P＜0.01).结论 CAN能有效地延缓UUO大鼠肾间质纤维化的进展,其延缓肾间质纤维化作用可能与下调OPN蛋白和mRNA有关.     

新型多酸化合物NCW-6的毒理学安全性评价

目的：评价具有抗病毒活性的多酸化合物NCW-6的安全性,阐明NCW-6的毒性及潜在的危险。方法：依据新药临床前毒理学评价方法进行NCW-6经口急性毒性实验和致畸敏感期实验。急性毒性实验中,将健康的昆明小鼠随机分为7组,每组10只,雌雄各半;给药剂量最低为4 000.00 mg•kg^-1、最高为6 000.00 mg•kg^-1,组距为400.00 mg•kg^-1;经口灌胃1次给药,观察给药后14 d小鼠的中毒表现,记录死亡数,用Bliss法计算半数致死剂量(LD_^50);致畸敏感期实验中,孕鼠随机分为5组,每组至少20只;给药组剂量分别为91.7、366.8和1 467.5 mg•kg^-1;阴性对照组给予5 mL•kg^-1蒸馏水,于受孕后第6～15天连续给药,每天灌胃1次;阳性对照组于妊娠第10天一次灌胃给予130 mg•kg^-1的维甲酸;各组孕鼠于孕期第20天颈椎脱臼处死,检查受孕情况,记录黄体数、活胎数、死胎数和吸收胎数等,做胎鼠一般外观检查（体质量、身长、尾长和外观有无异常）,取胎鼠雌雄各半行内脏形态检查和骨骼形态检查。结果：急性毒性实验,NCW-6的LD₅₀为5 869.9 mg•kg^-1,属于无毒化合物。致畸敏感期实验,3 个给药组孕鼠的体质量和增重与阴性对照组比较差异无统计学意义( P>0.05),各给药组胎鼠的平均体质量、身长、尾长以及平均胎质量、窝质量与阴性对照组比较差异无统计学意义( P>0.05),各给药组胎鼠外观、内脏畸形率、骨骼畸形率与阴性对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。结论：NCW-6属于无毒化合物,且对大鼠无致畸作用,具有深入研究开发的价值。     

单增李斯特菌多克隆抗体制备及其在乳胶凝集试验中的应用

目的：制备高效价高纯度兔抗单增李斯特菌（LM）多克隆抗体,并初步探讨其在乳胶凝集试验(LAT)中的应用。方法：复苏并扩大培养LM标准菌株,制备灭活疫苗免疫家兔,采用ELISA法测定耳缘静脉血抗体效价。4次免疫后,颈动脉采血分离血清,采用辛酸-饱和硫酸铵法粗分离,经蛋白亲和层析柱HiTrap Protein G HP进行IgG纯化,采用SDS-PAGE电泳、紫外分光光度法、间接ELISA法分别测定蛋白纯度、蛋白含量及抗体效价。得到的高效价提纯IgG与乳胶微球进行共价偶联,并选择偶联乳胶的IgG含量及偶联时间等条件,建立快速检测模拟样品中LM的方法。结果：制备并纯化的兔抗LM IgG蛋白浓度为23.364 g·L^-1,效价为1∶12 800~1∶25 600,与霍乱弧菌、沙门氏菌、志贺菌等多种菌均无交叉反应,与斯氏李斯特菌有弱交叉反应;致敏时IgG与乳胶微球偶联比率为1∶40;利用LAT方法检测246份样品,阳性检出率为87.5％,最低检出抗原含量为0.039 8 g·L^-1。结论：制备了高效价、高纯度的兔抗LM多克隆抗体;建立的LAT方法特异性强,敏感性较高,重复性好,便于基层推广使
用,为LM的现场检测提供了一种新手段。     

重组钩端螺旋体多抗原位点同源合成基因的表达及其抗原性鉴定

目的：构建重组钩端螺旋体(钩体)优势抗原表位原核表达系统,以期获得高纯度的钩体优势抗原表位重组融合蛋白,为进一步研究钩体快速检测方法奠定基础。方法：利用基因重组的方法构建表达质粒pET-rLP。经IPTG诱导后,获得高效表达带组氨酸标签的以包涵体形式存在的融合蛋白,包涵体蛋白经尿素变性溶解,采用镍离子亲和纯化,利用SDS-PAGE、Western blotting和间接ELISA法鉴定。结果：在相对分子质量为20 000处有1条特异性蛋白条带,为重组钩体优势抗原表位融合蛋白;ELISA结果显示其可与钩体阳性血清特异性结合,而与其他血清无交叉反应。结论：成功构建重组钩体优势抗原表位原核表达系统,并获得高纯度的重组钩体优势抗原表位融合蛋白。     

输尿管-肾下盏距离在输尿管软镜治疗<2 cm肾下盏结石中的应用

目的:探讨一种新的评估方法——输尿管-肾下盏距离(ureter-lower calyx distance, ULD)在肾下盏结石患者中的运用效果。方法:回顾性分析2021年10月—2022年12月华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科收治的126例肾下盏结石患者的临床资料。所有患者均行输尿管软镜处理肾下盏结石。分析分别采用肾盂漏斗部夹角(infundibulopelvic angle, IPA)分组与ULD分组比较患者手术时间和术后清石率的差异。结果:以IPA进行分组，分为IPA>30°组和IPA≤30°组，2组手术时间和清石率比较差异有统计学有意义(P<0.05);以ULD进行分组，分为ULD>3 cm组和ULD≤3 cm组，2组手术时间和清石率比较差异有统计学意义(P<0.05)。IPA>30°组与ULD>3 cm组手术时间和清石率比较差异无统计学意义。结论:ULD作为一种全新的输尿管软镜术前评估指标，较IPA更方便简单，实用性强，值得在临床进一步推广。     

猪股骨头内血管铸型标本制备技术的研究

<正>股骨头缺血性坏死(Avascular necrosis of femoral head,ANFH)是骨科常见疾病，有较高的致残率，迄今尚无较为理想的治疗方法。因此，明确股骨头内动静脉的解剖学特点尤为重要。目前关于股骨头的血管研究，仅见通过Micro CT灌注扫描^[1]、超选择性数字减影血管造影^[2](DSA)、增强MRI^[3]等间接手段显示股骨头内动脉，尚无直接的股骨头内动静脉三维立体构筑显示报道。本研究通过显微灌注环氧树脂联合碱腐蚀酸脱钙法制作猪股骨头内动静脉共显示铸型标本，以期为股骨头内血管研究及ANFH等髋部疾病病因、治疗方式的进一步探索提供参考。     

单纯钢丝加压固定法治疗骨性锤状指的解剖学研究

目的 探讨单纯钢丝加压固定法治疗骨性锤状指的手术方法的可行性。方法 选用4只成人尸体手标本，示、中、环、小指共16指，测量并研究伸肌腱止点处肌腱的宽度、伸肌腱止点距甲基质距离、末节指骨全长、甲基质长度。选取12指（示、中、环、小指各3指）成人手指标本进行模拟手术，人为设计骨性锤状指模型。钢丝从肌腱与骨块连接处横穿并折弯，找到末节指骨的钢丝穿出点。沿穿出点及远、近端侧方用克氏针横向钻孔3个，钢丝穿出后与另一头拧紧，埋于皮下。观察不同穿出点的钢丝在骨块上方交叉加压点的位置变化。结果 末节指骨穿出点移动方向与钢丝交叉点的移动方向一致，穿出点向两端移动后撕脱骨块均不稳定。当穿出点为末节指骨的近端1/3时，钢丝交叉于骨块正上方，撕脱骨块无松动。结论 钢丝的最适合穿出点为骨块交叉点的延长线与末节指骨的交点。单纯钢丝加压法治疗骨性锤状指是可行的。