血管性血友病因子裂解酶金属蛋白酶域的克隆和表达

目的:克隆和表达血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)的金属蛋白酶域。方法:应用PCR从含有人vWF-cp金属蛋白酶域的质粒中扩增出该区域,克隆至pUC18载体后行序列分析,并将其重组于带有6×HisTag的融合蛋白表达载体pET28a(+)中,在大肠杆菌DE3／plySs中诱导表达。融合蛋白经Ni-NTA柱纯化后,采用Westernblot印迹鉴定。结果:PCR扩增得到658bp的vWF-cp金属蛋白酶域的基因片段,测序结果与GenBank序列一致。重组表达质粒经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导5h后表达的融合蛋白占菌体总蛋白的28％,进一步纯化后其纯度在95％以上。结论:在大肠杆菌中高效表达了人vWF-cp的金属蛋白酶结构域,为深入研究vWF-cp结构与功能的关系奠定了基础。     

胃巨大异位胰腺一例

本文报道了1例胃巨大异位胰腺并发胰腺炎病例,位于胃体后壁,大小为7.0 cm×7.5 cm×3.2 cm,手术病理证实为异位胰腺,比较罕见。     

U6/H1双启动子siRNA表达框架构建及其对肿瘤细胞端粒酶活性的干扰作用

目的：构建针对端粒酶hTERT基因的U6/H1双启动子siRNA表达框架（SEC）,并观察其转录产物对HeLa细胞端粒酶活性的干扰作用。 方法：利用融合PCR技术,针对人端粒酶hTERT基因开放阅读区构建3条U6/H1双启动子SEC以及针对其3''端非翻译区构建1条U6/H1双启动子SEC,对各SEC鉴定后,分别转染人宫颈癌HeLa细胞,用端粒重复序列扩增法（TRAP）检测HeLa细胞的端粒酶活性。 结果：4种针对端粒酶hTERT基因的U6/H1双启动子SEC均成功构建,转染HeLa细胞后,对端粒酶活性的抑制率分别为36.8%、57.39%、80.47%、70.31%。 结论：针对端粒酶hTERT基因的U6/H1双启动子SEC的成功构建,为开展肿瘤端粒酶基因干扰的实验研究提供了新的有效手段。     

内皮抑素基因转移对乳腺癌细胞生长影响的体内和离体研究

目的：探讨内皮抑素(ES)基因转移在乳腺癌抗血管新生中的作用。 方法: 通过建立逆转录病毒介导的ES基因转移系统，用ES病毒转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231。以聚合酶链反应（PCR）、MTT法和裸鼠成瘤实验分析ES的生物学特性及其功能。 结果： 脂质体转染与交互感染策略获得ES病毒生产细胞；以ES病毒转染MDA-MB-231细胞后，经PCR分析显示其内有ES基因整合并持续表达，其分泌的ES能明显抑制内皮细胞EA.hy926的增殖(P<0.05)，但对肿瘤细胞的离体生长无明显影响（P>0.05）；裸鼠皮下移植瘤模型表明，ES基因表达可明显抑制MDA-MB-231细胞的生长(P<0.01)；实验组的肿瘤微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子(VEGF)表达低于对照组(P<0.05)。 结论: 逆转录病毒载体介导的ES基因在乳腺癌细胞中可有效表达，能明显抑制血管内皮细胞生长，并通过旁分泌方式抑制血管新生，具有显著的抗肿瘤生长的作用。     

妇科临床实习教学方法改革

临床实习是由学生转变为医生角色的一个重要的学习阶段.近年来,由于社会环境的影响,患者的自我保护意识增强,医务人员的法治意识相对滞后,尤其是妇科是一个特殊的科室,男实习医生接触女患者受到一定的限制[1],导致妇产科临床教学面临着极大的困境[2].如何作好妇科临床实习带教,培养高质量的临床专科医生,是当今妇科教员需要深思的问题.在临床实习带教过程中,作者针对如下影响实习质量的因素,采取了一系列改革的方法,取得了可喜的成效.要解决临床实习带教中的问题,应当注重以下方面,首先认真分析制约的因素,才能寻找出解决的方法.     

皮质酮对动物骨髓间充质干细胞迁移活性的影响及其修复学意义

目的 研究下丘脑-垂体-肾上腺轴效应激素--糖皮质激素(GC)对不同动物骨髓间充质干细胞迁移活性影响.方法 分离、培养并鉴定大鼠和小鼠骨髓间充质干细胞,通过不同方法观察两种来源的骨髓间充质干细胞趋化活性的变化,评价GC对不同来源的骨髓间充质干细胞迁移活性的影响.结果 尽管不同种属来源的骨髓间充质干细胞在形态上存在一定差异,但一定浓度的GC能够显著增强其趋化活性(P<0.05).结论 急性应激条件下,骨髓间充质干细胞迁移活性增强对损伤组织修复具有潜在的临床意义.     

生脉饮合沙参麦冬汤联合西药治疗晚期非小细胞肺癌疗效研究

目的:探讨生脉饮合沙参麦冬汤对晚期非小细胞肺癌患者的疗效及安全性。方法:选取193例晚期非小细胞肺癌患者,随机分为两组,中医组予生脉饮合沙参麦冬汤联合岩舒注射液或艾迪注射液治疗,中西医结合组在中医组治疗基础上加用化疗或靶向治疗。治疗4个周期后,观察两组免疫学指标、近期疗效、生存期及安全性。结果:治疗后,中医组CD4⁺改善情况优于中西医结合组。近期疗效评价显示中医组具有较好的疾病控制率,中西医组具有较好的客观缓解率。193例晚期非小细胞肺癌患者的中位生存期为32个月,1年生存率为81.3%,2年生存率为64.0%,3年生存率为45.7%,5年生存率为28.2%。中位无进展生存期为18个月。两组肝功能损伤发生率22.27%、肾功能损伤发生率8.8%、骨髓抑制发生率18.1%。单纯中医药治疗未见肝肾功能损害。结论:生脉饮合沙参麦冬汤对晚期非小细胞肺癌具有较好的疾病控制率,可改善免疫功能状态,延长生存期,且未增加不良反应。     

卫生行业建立法律事务协作中心的构想

当前，“强化医疗责任追究、强化病人利益维护”已逐渐成为一种社会趋势。相形之下，卫生行业长期形成的在法律事务上各自为阵的格局。已愈来愈显示出其难以避免的弱点，如何加强横向协作，发挥群体优势，在依法执业、自觉守法的基础上充分利用法律武器保护自身合法权益已成为卫生行业普遍面临的一个课题。     

T-载体在聚合酶链反应扩增产物克隆中的应用

目的　探讨克隆聚合酶链反应 (PCR)扩增产物的简便方法。方法　用PCR方法分别特异性扩增Wilms瘤基因wt1和尿激酶受体 (UPAR)基因 ,并利用Taq聚合酶具有的延伸酶活性将扩增产物直接克隆入T -载体 ,EcoRⅠ酶切鉴定阳性重组子。结果　设计的引物可分别扩增wt1基因锌指区 (34 3bp)和UPAR基因编码区全长 (10 83bp) ;未经修饰的常规PCR和高保真PCR扩增产物可被直接克隆入pGEM -TEasy载体 ,其中正确重组率为 6 2 .5 %～ 87.5 % ;克隆的wt1基因和UPAR基因已被成功用于竞争性PCR或表达。结论　T -载体法是克隆PCR产物通用而有效的方法。     

对做好学校健康促进工作的认识

世界卫生组织在《组织法》中提到,“不分种族、宗教、政治、信仰、经济和社会状况,享有可达到最高水准的健康,是每个人的基本权利之一。”为更好地贯彻这一原则,世界卫生组织在世界范围内积极倡导和推动学校卫生工作,建立了健康促进学校项目。其精神是学校社区内的所有成员,为促进学生健康而共同奋斗。我国政府有关部门对此项