基于Ngn3和Caspase-3探讨姜黄素对宫内发育迟缓仔鼠胰腺发育及糖脂代谢的影响

【目的】观察宫内发育迟缓（IUGR）仔鼠的胰腺发育及糖脂代谢情况及姜黄素的干预机制。【方法】采用日粮限饲的方法构建IUGR新生大鼠模型。将20只健康仔鼠分为健康组（健康仔鼠+基础饲料）、健康+姜黄素组（健康仔鼠+姜黄素+基础饲料）,20只IUGR仔鼠分为IUGR组（IUGR仔鼠+基础饲料）和IUGR+姜黄素组（IUGR仔鼠+姜黄素+基础饲料）。给药结束后,检查仔鼠血糖、血脂水平,采用苏木素-伊红（HE）染色法观察胰腺发育情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法测定胰岛β细胞凋亡率,免疫组织化学法、蛋白免疫印迹（Western Blot）法分别检测胰腺组织中Ngn3、Caspase-3阳性细胞数、蛋白表达水平。【结果】（1）与健康组比较,IUGR组仔鼠空腹血糖、总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平均升高,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平降低（均P<0.05）;与IUGR组比较,IUGR+姜黄素组仔鼠空腹血糖、TC及LDL-C水平降低,HDL-C水平升高（均P<0.05）。（2）与健康组比较,IUGR组仔鼠胰腺发育不完善;与IU...     

慢病毒载体靶向介导p66shc基因沉默

目的：构建p66shc基因重组慢病毒表达载体,并将之转染至293T细胞,通过RNA干扰致使p66shc基因沉默,为进一步研究p66shc基因功能奠定基础。方法筛选3个RNA靶点,命名为p66shc‐shc1、p66shc‐shc2、p66shc‐shc3,与双酶切后的pLenR‐绿色荧光蛋白（GPH）（含有GFP表达）连接,转化入感受态的DH5α细胞,挑取阳性克隆测序正确后,与pRsv‐REV、pM‐Dlg‐pRRE、pMD2G一起转染293T细胞,于倒置荧光显微镜下检测GFP的表达,证实病毒包装成功。使用荧光定量PCR及Westernblot技术检测p66shc在基因及蛋白水平的表达,选取有效沉默p66shc基因的p66shc‐shc1靶点,为后续试验做准备。结果成功构建表达p66shc的shRNA慢病毒载体并转染至真核生物细胞内,通过荧光定量PCR及Westernblot技术检测其通过RNA干扰导致细胞内p66shc基因沉默。结论靶向表达p66shc的shRNA慢病毒载体,转染入真核生物细胞内可通过RNA干扰在分子及蛋白水平导致p66shc基因沉默。     

异常标本对STA-R型血液凝固分析仪结果的影响

目的对法国Stago公司生产的STA-R型血液凝固分析仪的抗干扰能力作试验研究。方法重复测定正常血浆凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(aPTT)和纤维蛋白原(Fbg)含量各15次;采用日本统一标准干扰物(溶血性血红蛋白、直接胆红素、间接胆红素和乳脂蛋白)分别加入到试验血浆中,再测定各种浓度干扰物-试验血浆的PT、aPTT和Fbg。结果重复测定PT、aPTT和Fbg的CV1.46%;测定干扰物试验血浆PT、aPTT和Fbg的影响范围在±3.7%。结论STA-R型血液凝固分析仪具有强力抗溶血性血红蛋白、直接胆红素、间接胆红素和乳脂蛋白干扰的能力。     

儿童弱视与微量元素关系的临床研究

目的探讨儿童弱视与微量元素关系.方法对弱视儿童258名和视力正常的儿童120名的头发及血液进行微量元素锌、铁、铜的检验.结果微量元素锌、铜含量存在显著性差异.微量元素铁无显著性差异.结论微量元素的变化与弱视可能存在一定的因果关系.     

新生儿窒息后多器官功能障碍综合征的临床研究

目的 研究新生儿窒息后多器官功能障碍综合征(multipse organ dysfunction syndrome ,MODS)的发生及其与病情预后的关系.方法 窒息后24h之内入院的足月新生儿89例,进行经皮血氧饱和度和心电监测3d,同时作肝功、肾功、心肌酶、电解质、血常规、尿常规、血气分析及心电图和头颅Cr等检查,结合临床表现统计窒息后全身炎症反应综合征(systemic inflammatory respons syndrome SIRS)和MODS的发生情况及其疾病的转归情况.结果 与轻度窒息组相比,重度窒息组危重病评分、SIRS和MODS发生率以及多器官损伤的程度明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与预后好组相比,预后差组SHRS和MODS发生率明显增高(P<0.05).结论 新生儿室怠可导致SIPS和MODS的发生,与窒息程度和疾病的预后密切相关.     

胸椎结核外科治疗不同术式选择探讨

目的探讨不同解剖节段胸椎结核外科治疗术式的选择策略及疗效。方法回顾分析2005年5月至2009年5月手术治疗36例成人胸椎结核的临床资料,其中男19例,女17例;年龄17~60岁,平均32.2岁;病变破坏2个椎体23例,3个椎体7例,4个椎体6例。术前所有患者均有不同程度的后凸畸形,后凸角10°~110°,平均21°。22例伴有神经功能障碍。将胸椎按照解剖特点分为颈胸结合部(C7~T2)、中部(T3~5)、下胸椎(T6~12)。依据解剖特点不同采用5种不同的手术入路(颈胸结合部前入路、经胸腔胸膜外入路、开胸、肋横突旁入路、后正中入路)对36例胸椎结核患者行一期病灶清除、植骨融合内固定术。结果所有患者随访18~48个月,平均26个月,术后胸背部疼痛减轻,切口一期愈合,术后1~3个月血沉逐渐恢复正常,术后后凸角度矫正至0°~60°,平均14°,自体骨植骨于术后3个月开始融合,22例伴有神经功能障碍者,术后Frankel分级提高1~2级,大部分完全恢复。结论根据胸椎结核病灶部位的解剖特点、累及的范围选择恰当的术式可有效清除结核病灶,矫正后凸畸形,重建脊柱的稳定性,改善神经功能,临床效果良好。     

白细胞介素-18与缺氧缺血性脑损伤的关系

白细胞介素-18(IL-18),最初被称为干扰素诱导因子(IGIF),它在结构上与IL-1同源,被半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)催化成熟,是一种重要的前炎性细胞因子。在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后其表达明显增强,促进了HIBD后炎性反应的发生及损伤的发展。近年来,IL-18在HIBD中的作用被广泛关注。本文主要就IL-18与HIBD的关系作一综述。     

痰热清注射液佐治危重新生儿伴全身炎症反应综合征疗效观察

目的观察痰热清注射液对危重新生儿伴全身炎症反应综合征(SIRS)的疗效及对预后的影响。方法将符合诊断标准的113例新生儿SIRS患儿随机分为两组。对照组47例给予治疗原发病及保护重要脏器等常规治疗;治疗组66例在常规治疗基础上加用痰热清注射液,连用7d。结果两组治疗后血小板计数明显升高,降钙素原水平明显下降;治疗组SIRS的持续时间缩短,多脏器功能不全(MODS)发生率显著减少、病死率均明显降低。结论痰热清注射液可缩短新生儿SIRS持续时间,降低MODS的发生率及病死率。     

促红细胞生成素对窒息新生儿血清诱导人肾小管细胞TLR4/MyD88表达的影响

目的 研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对新生儿窒息后血清诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)TLR4/MyD88(Toll-like receptors 4/myeloid differentiation factor 88)表达的影响.方法 将HK-2分为对照组、窒息组、EPO组,每组12份,分别检测TLR4和MyD88表达情况.对照组加入DMEM/F12培养液,窒息组加入含200 ml/L新生儿窒息后血清的DMEM/F12培养液,EPO组加入含50 IU/ml的EPO培养液预处理后再加入含200 ml/L新生儿窒息后血清的DMEM/F12培养液.其余培养条件3个实验组完全相同,即在37℃、50 ml/L CO2培养箱中培养24 h后,应用倒置相差显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测各组细胞TLR4特异性荧光抗体阳性结合率;免疫组织化学法(SP法)检测各组细胞MyD88表达情况.结果 与对照组比较,窒息组细胞形态变化显著,TLR4特异性荧光抗体阳性结合率和MyD88的表达明显增加;与窒息组比较,EPO组细胞形态明显改善,TLR4特异性荧光抗体阳性结合率和MyD88的表达明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 EPO可减少新生儿窒息后血清诱导的人肾小管上皮细胞TLR4/MyD88的表达.     

Omi/HtrA2在窒息后血清诱导人近曲肾小管皮细胞凋亡中的作用

Objective To investigate the mechanism of inducing apoptosis of Omi/HtrA2 in renal tubular cells with postasphyxial serum of neonate. Methods Human renal proximal tubular cell line HK-2 cell was used as target cell. They were divided into three groups: control group, asphyxia group and Ucf-101 (Omi/HtrA2 special inhibitor) treated group. The challenge concentration of serum obtained from neonates 24 hours after asphyxia was 20%,and the treatment concentration of Ucf-101 was 10 μmol/L.The Omi/HtrA2 translocation in renal tubular cells was observed with confocal microscopy, and the rate of apoptosis was detected with flow cytometer. Results It was found that Omi/HtrA2 was translocated into cytoplasm in asphyxia group, and the rate of Omi/HtrA2 translocation in HK-2 cells of asphyxia group was significantly increased [(28. 1 % vs. (9.4±2.1)%, P<0. 01]. Compared with the control group, after being treated with postasphyxial serum, the rate of apoptosis of HK-2 cells in asphyxia group wa ssignificantly increased [(36. 3±4. 4)% vs. (12. 4±2. 9) %, P<0. 01]. Compared with asphyxia group, the rate of apoptosis in HK-2 cells in Ucf-101 treated group was significantly decreased [(27. 0± 3. 9)% vs. (36.3±4.4) %, P<0. 01]. Conclusion These experimental data demonstrates that postasphyxial serum of neonate can induce apoptosis of HK-2 cells, and translocation of Omi/HtrA2 from mitochondria into cyto-plasm may play an important role in its intracellular signal transduetion mechanism in induction of apoptosis.