miR-19b下调大鼠H9c2心肌细胞Kir2.1蛋白表达

目的:检测miR-19b对大鼠H9c2心肌细胞Kir2.1表达的影响,探讨miRNA参与房颤发生发展的机制。方法:培养大鼠H9c2心肌细胞,构建miR-19b过表达质粒、miR-19b干扰质粒、阴性序列质粒,通过慢病毒载体感染大鼠H9c2心肌细胞;倒置荧光显微镜观察感染效率,qRT-PCR检测H9c2细胞中miR-19b mRNA表达水平。qRT-PCR检测H9c2细胞中Kir2.1mRNA水平。Western blot检测H9c2细胞中Kir2.1蛋白表达水平。结果:miR-19b慢病毒载体成功感染H9c2细胞;qRT-PCR检测,与阴性序列组相比,miR-19b过表达组Kir2.1 mRNA表达水平降低,miR-19b干扰组Kir2.1 mRNA表达水平升高;Western blot检测,与阴性序列质粒组相比,miR-19b过表达组Kir2.1蛋白表达水平降低,miR-19b干扰组Kir2.1蛋白表达水平升高。结论:miR-19b抑制KCNJ2的转录,下调Kir2.1蛋白表达,提示mi-19b可能参与房颤的发生发展。     

乳腺活检或手术前补充MRI检查的经济可行性评价

目的 以每个拟活检或手术前的乳腺疾病患者均行乳腺MRI筛选作为假设,从卫生经济学角度验证通过MRI筛查减免或节省的活检或手术费用能否支付乳腺MRI费用。资料与方法 选取2021年6月—2022年4月于北京市顺义医院和安徽省宿松县人民医院完成活检或手术的乳腺疾病患者271例,使用44例活检或术前行MRI检查者计算乳腺MRI的诊断效能,并依次虚拟计算227例无MRI检查者,根据组织病理、影像诊断和患者意愿分为可活检手术组和无需活检手术组（BSU）。按照实际医疗收费标准,计算和验证研究组患者在活检或手术前利用MRI检查划归为BSU所节省的医疗费用是否高于增加的MRI支出。结果 227例研究组中191例在组织病理水平判断为BSU,其医疗费用为2 890 227元;以研究组获得的MRI假阴性率为25%,在影像诊断水平以MRI的阴性预测值75%计算,BSU患者的医疗费用为1 715 061元;以影像诊断良性仍有50%患者主观选择活检或手术,BSU的医疗费用为857 530元,均高于227个乳腺MRI的费用283 750元。结论 如果在乳腺活检或手术前补充MRI检查来排除不必要的活检或手术,其节省的...     

研究生创新能力评估体系的建立

阐述了建立研究生创新能力评估体系的目的与意义 ,建立评估体系的基本思路 ,评估因素、评估指标和评估体系的确定 ,采用模糊数学方法量化研究生的创新能力 ,使评估体系更加客观、便于操作。     

bcl-2反义药物的设计及其对白血病细胞生长的影响

目的　通过计算机模拟bcl 2基因的mRNA二级结构 ,优化反义药物设计。方法　用计算机程序Mfold软件模拟mRNA的二级结构后 ,筛选出不稳定的二级结构区域 ,进行反义药物设计 ;用实验评价所设计反义药物的生物效应 ,筛选出的bcl 2反义寡核苷酸对白血病细胞株HL 60、K5 62生物学活性的影响。结果　有 2个位点的反义寡核苷酸在计量为 10 μmol·L-1以上时 ,能明显抑制细胞的生长活性。结论　bcl 2mRNA二级结构的模拟是设计反义药物的一条新的途径     

体外化学合成bcl-2 siRNA及脂质siPORT脂质体转染siRNA至细胞HL-60的鉴定

目的　为将RNA干扰技术深入应用到血液肿瘤做铺垫 ,体外化学合成bcl 2小干扰RNA(small interferenceRNA ,siRNA)及si PORT脂质体转染siRNA至细胞HL 6 0的鉴定。方法　通过互联网从GenBank获得人bcl 2mRNA全序列 ,经扫描bcl 2mRNA的全序列记录AA及下游 19个核苷酸肽并与基因组数据库比较去除与其它基因有高度同源性的序列 ,选取距离AUG启动子约 30个核苷酸以后的靶序列作siRNA模板的设计 ,且GC含量控制在 30 %～ 6 5 %之间。选择了三条序列作为我们实验设计的靶序列并由靶序列设计合成出它们的正、反义寡核苷酸肽模板。由化学合成试剂盒体外合成双链bcl 2siRNA ,纯化并定量后用Cy3红色荧光标记 ,利用脂质siPORT转染试剂将bcl 2siRNA转染入HL 6 0细胞 ,转染 4 8h后收集并固定细胞 ,荧光显微镜下观察转染结果。结果　纯化的siRNA经 2 %琼脂糖凝胶电泳证实其长度为 2 1bp ,说明bcl 2siRNA被成功合成。转染Cy3标记的siRNA 4 8h后的细胞荧光显微镜下经绿色光激发可见较亮的深红色荧光 ,而未转染bcl 2siRNA的细胞仅有微弱的红色自发荧光。结论　体外成功化学合成bcl 2siRNA ,LipidsiPORT转染试剂能将bcl 2siRNA成功转染入白血病细胞HL 6 0中。     

MiRNA-122对5-氟尿嘧啶诱导BEL-7402/5-FU细胞凋亡的影响

目的探讨微水RNA-122(miR-122)对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导BEL-7402/5-FU细胞凋亡的影响。方法构建miR-122和阴性对照质粒瞬时转染至BEL-7402/5-FU细胞;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测caspase-8,caspase-9和caspase-3蛋白表达水平。结果仅用miR-122处理BEL-7402/5-FU细胞时,与未转染组和转染对照组比较,miRNA-122转染组细胞凋亡率增加,用10μmol/m L 5-FU作用BEL-7402/5-FU细胞24 h后,与未转染组和转染对照组比较,miR-122转染组细胞凋亡率明显增加;与未转染组和转染对照组比较,转染了miRNA-122的BEL-7402/5-FU细胞中caspase-8、caspase-9和caspase-3前体蛋白表达降低,活化的caspase-8、caspase-9和caspase-3蛋白表达升高。结论 miR-122能够下调BEL-7402/5-FU细胞中caspase-8、caspase-9和caspase-3前体蛋白表达,上调活化的caspase-8、caspase-9和caspase-3蛋白表达,miR-122能促进5-FU诱导的BEL-7402/5-FU细胞凋亡。     

普通高校药学专业“三级平台”式实践教学体系的构建

本文在充分研究药学教育国内外现状与发展趋势基础上,提出了以知识、能力和素质协调发展为宗旨,创建药学专业“三级平台式”特色实践教学体系的研究思路.改革药学专业人才培养模式,主动适应社会经济发展和科技进步对人才的需要.     

氟伐他汀对高脂血症患者的血脂及细胞粘附分子的影响

为研究氟伐他汀对高脂血症患者的降脂作用及对细胞粘附分子的影响。选择高脂血症患者 5 8例 (男性 35例 ,女性 2 3例 ) ,予氟伐他汀 4 0mg口服 ,每晚一次 ,一周后改为 2 0mg ,每晚一次 ,疗程 6～ 8周。分别观测治疗前后血脂及细胞粘附分子的情况。结果发现 ,治疗后患者总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、血清可溶性细胞间粘附分子 1和血清可溶性血管细胞粘附分子 1明显降低 (P <0 .0 5 ) ,而高密度脂蛋白升高不明显。此结果提示 ,氟伐他汀不但能降低总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白水平 ,而且能降低血清可溶性细胞间粘附分子 1和血清可溶性血管细胞粘附分子 1浓度。     

球囊损伤后猪粥样硬化髂动脉壁原癌蛋白表达的时相

为探讨球囊损伤动脉后因管壁细胞增殖和凋亡与Ｐ５３，Ｂｃｌ－２，ｃ－Ｍｙｃ和ｃ－Ｆｏｓ等癌蛋白表达时相的关系。将贵州小型猪喂高胆固醇饲料合并球囊损伤诱导动脉粥样硬化病变，然后再生右髂动脉球囊血管成形术。术后１，３，８，１４，３０和９０天，分别用抗增细胞核抗原抗体标记检测细胞增殖；用末端脱氧核苷酸转移酶介导的ｄＵＴＰ－生物素平移末端标记检测细胞凋亡；ｐ５３，Ｂｃｌ－２，ｃ－Ｍｙｃ和ｃ－Ｆｏｓ蛋白表达的     

2002～2003年郴州市桶装饮用纯净水卫生质量分析

目的 为提高桶装纯净水卫生质量，找出不合格原因，研究控制对策。方法 对全市2002～2003年桶装纯净水进行抽样检验，对生产企业卫生状况进行卫生学调查。结果 共抽检样品117份，总合格率为58．12％，微生物超标占66．99％，理化超标占33．0l％。结论 对桶装纯净水生产企业实行GMP管理，是提高纯净水卫生质量最有效的方法。