冠心病患者肺炎衣原体感染的研究

目的 :探讨肺炎衣原体感染与冠心病之间的关系。方法 :采用微量免疫荧光方法检测 76例冠心病(包括急性心肌梗塞 )患者和 76例对照组患者的外周血肺炎衣原体ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体 ;采用ＰＣＲ法检测以上所有病人的鼻咽拭子。结果 :两组患者ＩｇＧ抗体的几何平均滴度差异显著 (Ｐ <0 0 5)。ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体阳性率在冠心病组 (包括急性心肌梗塞 )分别为 75 4%、2 3 1 % ,而在对照组分别为 52 1 %和 5 2 % ,差异均有显著 (Ｐ <0 0 5)。 1 52例患者中ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体阳性率男性分别为 66 3%、1 5 1 % ,女性分别为 60 6%和1 3 6% ,男性略…     

知识经济时代医学研究生创新能力的培养

知识经济时代 ,一切以知识为基础 ,知识更新的速度与科技产业化程度直接相关 ,实现知识更新与科技产业化需要有知识、有能力的高素质创新人才。研究生教育是培养创新人才的有效途径。为了培养研究生的创新能力 ,促进研究生教育发展 ,我们从知识经济时代对人才的要求 ,研究分析创新人才的基本特征 ,同时针对本学科研究生教育现状 ,结合实际工作需求 ,探寻培养研究生创新能力的方法与策略 ,并实施于本学科研究生教育的全过程     

bcl-2反义核酸增强柔红霉素诱导原代白血病细胞凋亡的研究

研究表明 :bcl 2基因的过度表达可明显降低化疗药物引起的细胞凋亡 ,针对bcl 2mRNA翻译起始部位的反义核苷酸可抑制许多肿瘤细胞中bcl 2的表达 ,促进细胞的凋亡 ,提高肿瘤细胞对化疗的敏感性[1] 。我们在前一阶段的研究中[2 ] ,已经在bcl 2mRNA翻译起始区和蛋白编码区发现了2个有效反义作用靶点。本研究进一步观察这两个有效序列的反义寡核苷酸是否会增强柔红霉素 (DNR)诱导原代培养的急性白血病 (AL)、慢性淋巴细胞白血病 (CLL)的细胞凋亡 ,期望为白血病的治疗开辟一条新的途径。一、材料与方法1.病例选择 :AL 13例中急性粒细胞白血…     

miR-122表达载体的构建及其对Bcl-xL,Bcl-2基因的抑制作用

目的构建miR-122真核表达载体并检测其表达对BEL-7402/5-FU细胞中耐药相关基因Bcl-xL,Bcl-2基因表型的作用。方法人工合成miR-122成熟cDNA序列,以质粒载体pSilencer 3.1-H1 neo为母本,构建miR-122真核表达载体,空载体作为对照,利用脂质体2000和G418筛选稳转至BEL-7402/5-FU细胞中。其中转染miR-122载体的细胞为miR-122转染组,转染空载体的细胞为空载体转染组,通过实时荧光定量RT-PCR检测未转染组、转染空载体组和miR-122转染组细胞中miR-122表达水平。验证miR-122载体是否在细胞中稳定表达。并通过实时荧光定量RT-PCR检测未转染组、空载体转染组和miR-122转染组中耐药相关基因Bcl-xL,Bcl-2的基因表达情况。结果 miR-122真核表达载体在BEL-7402/5-FU细胞中稳定表达,与未转染组和空载体转染组比较,miR-122转染组中Bcl-xL,Bcl-2的基因表达水平显著降低。结论 miR-122可下调耐药相关基因Bcl-xL,Bcl-2的基因表达,MiR-122是降低BEL-7402/5-FU细胞的5-氟尿嘧啶药物敏感性影响的潜在因素。     

缺氧—复氧诱导ECV304细胞与中性粒细胞粘附的分子机制

为探讨缺氧-复氧诱导人脐静脉内皮细胞ECV304与中性粒细胞粘附的信号转导机制，以缺氧-复氧诱导粘附为模型，采用比色法检测粘附率，流式细胞术检测ECV304细胞表面粘附分子E选择素、细胞问粘附分子1的表达，Western blot法检测ECV304细胞亲环素A、磷酸化细胞外信号调节激酶、总细胞外信号调节激酶、磷酸化D70核糖体S6激酶、总p70核糖体S6激酶蛋白的表达。结果发现，经缺氧-复氧处理后，ECV304细胞E选择素、细胞间粘附分子1的表达上调，其表面中性粒细胞粘附增加。总细胞外信号调节激酶、总p70核糖体S6激酶蛋白表达无明显改变，亲环素A蛋白表达明显上调，细胞外信号调节激酶和p70核糖体S6激酶显著活化。亲环素A抑制剂环孢霉素A以及亲环素A反义寡核苷酸均明显减轻缺氧-复氧诱导的细胞外信号调节激酶和p70核糖体S6激酶激活，显著减少ECV304细胞与中性粒细胞粘附。p70核糖体S6激酶阻断剂雷帕霉素显著抑制p70核糖体S6激酶的激活，中性粒细胞与ECV304细胞的粘附亦明显减少。细胞外信号调节激酶信号通路特异性阻断剂PD98059亦显著抑制ECV304细胞与中性粒细胞粘附。结果提示，亲环素A-细胞外信号调节激酶-p70核糖体S6激酶信号通路介导缺氧-复氧诱导的ECV304细胞与中性粒细胞粘附。     

心房颤动患者心房组织中差异表达miRNA的初步研究

目的：应用基因芯片技术研究心房颤动（房颤）患者心房组织中miRNA的表达谱,分析差异表达的miRNA,为进一步研究miRNA在房颤发生、发展中的作用奠定基础。方法：采用miRNA基因芯片技术检测房颤患者和非房颤患者心房组织样本中miRNA的表达水平;采用实时定量PcR（quantitativereal,timePCR,qRT．PCR）对部分差异表达的miRNA进行验证。结果：MiRNA基因芯片分析结果显示,与非房颤组织相比,房颤组织中差异表达的miRNA共有26个,其中16AmiRNA表达上调,10个miRNA表达下调。qRT．PCR验证结果与芯片结果相一致。结论：MiRNA在房颤患者心房组织中存在差异性表达。     

MiR-503靶向bcl-2增强BEL-7402细胞对顺铂的敏感性

目的：探讨miR-503是否能通过调控bcl-2的表达增强BEL-7402细胞对顺铂的敏感性。方法：采用实时荧光 定量PCR检测肝癌细胞中miR-503和bcl-2 mRNA的表达水平;Western印迹观察肝癌细胞中Bcl-2蛋白的表达水平;脂质 体转染法将miR-503模拟物瞬时转染至BEL-7402细胞;生物信息学软件预测miR-503潜在靶基因;双荧光素酶活性验证 miR-503潜在的靶位点;MTT法检测细胞药物敏感性的改变。结果：相比于HL-7702细胞,miR-503在BEL-7402细胞中 表达水平下调,Bcl-2蛋白的表达水平上调;miR-503能够与bcl-2靶向结合,下调bcl-2的表达;miR-503转染组的细胞活 力较miRNA阴性对照组显著降低。结论：MiR-503可能通过靶向bcl-2增强BEL-7402细胞对顺铂的药物敏感性,抑制肝 癌细胞增殖。     

MiR-122下调Bcl-2蛋白家族增强BEL-7402/FU细胞对氟尿嘧啶的敏感性

目的:探讨MiRNA-122对肝癌耐药细胞株BEL-7402/氟尿嘧啶(fluorouracil,FU)的FU敏感性的影响及其作用机制。方法:构建miR-122及其阴性对照空载体并稳定转染至BEL-7402/FU细胞中,Western免疫印迹检测miR-122转染组(n=3)、阴性空载体转染组(n=3)和未转染组(n=3)中与耐药相关的Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达水平。用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT)]法检测三组细胞对FU敏感性。结果:与未转染组、阴性空载体转染组比较,miR-122转染组Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达明显降低(P<0.05)。MTT结果显示:在不同浓度FU处理下,miR-122转染组的细胞抑制率较未转染组和阴性空载体转染组高(P<0.05)。结论:miR-122能特异性地下调Bcl-2和Bcl-XL表达,可增加BEL-7402/FU细胞对FU敏感性。     

MicroRNA-98对A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响

目的探讨MicroRNA-98（miR-98）对肺腺癌耐顺铂细胞系A549／DDP顺铂耐药性的影响。方法利用MicroRNA（miRNA）芯片及生物信息学筛选出miR-98。将miR-98质粒载体瞬时转染至A549／DDP细胞：M．rr检测细胞药物敏感性的改变。结果在A549／DDP细胞中miR-98表达水平下调。转染miR．98的A549／DDP细胞生长抑制率明显增高。结论miR-98能够增加肺腺癌耐药细胞株A549／DDP对顺铂的药物敏感性。     

microRNA let-7与肿瘤

微小RNA(miRNA)是一类长18～25个核苷酸的非编码小分子RNA,能与靶mRNA的3′UTR碱基配对,通过抑制mRNA的翻译或直接使mRNA降解,在转录后水平使基因沉默。miRNA调节的基因调控机制与肿瘤的发生、发展密切相关。Let-7是目前研究最为广泛的miRNA之一。在多种肿瘤中,let-7表达下调,提示let-7必然与肿瘤存在一些重要的联系。本文就对let-7的生物学特性、作用机制与肿瘤的关系及其在肿瘤治疗方面的潜在作用进行综述。