ENHANCEMENT OF HLA-DR EXPRESSION IN HUMAN HEPATOCELLULAR CARCINOMA WITH INTERFERON

HLA--DRisoneofthemajortypesofhumanmajorhistocompatiblecomplex(MHC)type11molecule.Asamainkilldofsurfaceantigeninhumancells,itplaysanimportantroleintheimmunoreactionandimmunoregulationofthehumanbody.Manystudiesindicatethatinterferon(IFN)canenhancetheHLA-DRexpressionintumorcellsandregulatetheimmunoreactivesituationofthetumor.[l]CurrentlythereisnosuchreportthatIFNregulatestheHLADRexpressioninhepatocellularcarcinoma(HCC).TheexpressionofHLA-DRinHCCcellsandnormallivercellsbeforeandafter…     

超抗原和免疫受体间相互作用的研究

超抗原(superantigen，SAG)是细菌或病毒产生的外毒素，它通过同时结合主要组织相容复体Ⅱ(major histoconlpatibility complexⅡ，MHCⅡ)和T细胞识别受体(T cell receptor，TCR)而连接抗原递呈细胞(antingen—presenting cell，APC)和T细胞。与普通抗原不同，SAG不需要APC的内处理，而是以完整蛋白的形式被肠、胃的上皮细胞吸收，在MHCⅡ抗原结合槽的外侧直接与之特异性结合，     

057 辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用

机体抗肿瘤免疫反应中起重要作用的是细胞免疫,近年来辅助性T淋巴细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用越来越为人们所重视.Th细胞不仅可以分泌细胞因子调控肿瘤免疫,而且具有免疫记忆和直接杀伤肿瘤细胞的作用,随着一系列被Th细胞识别的肿瘤抗原被鉴定出来,人们对于Th细胞在抗肿瘤免疫反应中的作用有了进一步的认识.本文综述了近年来Th抗肿瘤作用机理及Th细胞表位研究进展.     

肝癌靶向性超抗原基因疫苗的设计和预测

目的：探讨AFP顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原疫苗(SEA(D227A)—Linker—CD80tm)设计的合理性。方法：应用核酸和蛋白质分析软件Cene Construction Kit2.0、ANTHERPRO5.0、JAMBW1.1和www.expasy.com网站提供的方案，分析重组体的开放读框以及融合蛋白的可及性、柔性、抗原性和疏水性，并作了跨膜区和二级结构模拟。结果：重组体的转录受AFP顺式作用元件调控，Linker所在部位柔性高，可及性弱，不改变两侧蛋白分子的抗原性和疏水性。融合蛋白表达后，被CD80tm锚定于肝癌细胞表面，超抗原部分(SEA)表达在细胞膜外，二级结构预测Linker不改变蛋白结构，完全符合作者设计疫苗的初衷。结论：重组疫苗设计合理，特异性高，融合蛋白有很大可能保留了SEA和CD80tm的理化特性，为进一步的实践操作提供了可靠的理论基础。     

MAGE-n的原核表达与分离纯化

目的　构建MAGE n的原核表达质粒 ,在大肠杆菌中进行表达 ,并通过谷胱甘肽巯基转移酶 (GlutathioneS trans ferse,GST)纯化系统进行分离纯化。方法　用ANTHEPROTV5 .0软件预测MAGE n的生物学特性 ,从中选择抗原性及特异性较强的一段。利用PCR方法扩增MAGE n基因片段 ,连入原核表达载体pGEX 4T 1,构建MAGE n的原核表达质粒pGEX MAGE n并测序。将该质粒转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化。结果　成功地扩增了MAGE n基因片段 ,测序结果表明与GenBank公布的序列一致 ,成功地构建了pGEX MAGE n原核表达质粒 ,含有该质粒的大肠杆菌经异丙基 β D 半乳糖苷 (Isopro pyl beta D thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后表达一Mr 约为 4 30 0 0的蛋白 ,经GST融合蛋白纯化系统纯化 ,得到了MAGE n的重组蛋白。结论　首次获得了新的肿瘤抗原MAGE n的重组蛋白 ,并进行分离纯化 ,为进一步研究MAGE n抗原在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础     

肝癌细胞CD80表达与MHC-I分子的关系

研究共刺激分子ＣＤ８０在肝癌细胞中的表达与ＭＨＣ－１（Ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ）分子相互关系，，以探讨在肿瘤细胞所诱发的免疫排以应中共刺分子对抗的提呈机制的影响。方法：通过逆转录病毒载体介导，将ＣＤ８０基因转入肝癌细胞系ＨＨＣＣ，以流式细胞仪检测其表面ＭＨＣ－Ｉ分子的表达情况。同时检测ＬＡＫ细胞转染前后的细胞的杀伤效果。结果：表达ＣＤ８０的肝癌细胞基表达ＭＨ     

肝癌“双弹头”免疫导向药物的实验研究

以肝细胞癌单克隆抗体ＨＡｂ１８为载体，用葡聚糖作桥的间接交联方法和氯胺Ｔ法，同时将阿霉素（ＡＤＭ）和１３１Ｉ连接到ＨＡｂ１８上，制备出“双弹头”肝癌免疫导向药物１３１Ｉ－ＨＡｂ１８－ＡＤＭ。其免疫结合率为４３．５％。细胞毒实验结果显示，１３１Ｉ－ＨＡｂ１８－ＡＤＭ对靶肿瘤细胞ＳＭＭＣ－７７２１的杀伤效果较单独应用ＡＤＭ相同浓度的ＨＡｂ１８－ＡＤＭ和比放射性相同的１３１Ｉ－ＨＡｂ１８时，有明显的增强。１３１Ｉ－ＨＡｂ１８－ＡＤＭ具有选择性高效杀伤的作用，它集中了化疗与内放射治疗的优点，互相补充，展示了肿瘤导向治疗的良好前景。     

肿瘤抗原MAGE-3基因的克隆及其重组表达载体的构建意义

目的 构建MAGE-3基因重组真核表达质粒pcDNA3．1／MAGE-3，制备肿瘤DNA疫苗，为提高患者生存期内生活质量选择更优秀的治疗措施。方法 从人黑色素瘤细胞株中提取总RNA，进行RT-PCR扩增出全长cDNA，并克隆入PUCl9载体，经DNA测序证实序列无误后，将MAGE-3基因克隆入pcDNA3．1( )真核表达载体。结果 经RT-PCR扩增出大小约950bp的基因片段，成功克隆人PUCl9载体，经DNA测序证实为MAGE-3，编码MAGE-3基因全部947bp序列，读框正确，进一步亚克隆获得携有MAGE-3基因的重组质粒pcDNA3．1／MAGE-3。结论 成功构建了MAGE-3真核表达质粒，为其作为新型DNA疫苗用于肿瘤免疫治疗奠定了基础，对提供有效治疗方案，提高患者的生存率和延长患者的生存期产生正面意义。