Gli1表达抑制对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响

目的 抑制Glioma-associated oncogene homoglog（GLI）基因在卵巢癌SKOV3细胞中的表达,探讨GLI1表达抑制对SKOV3细胞增殖的影响.方法 构建并筛选GLI1基因的RNAi表达质粒,转染SKOV3细胞,CCK-8法比较转染前后卵巢癌细胞增殖变化,流式细胞仪检测紫杉醇诱导转染前后细胞凋亡比例,流式细胞仪检测转染前后SKOV3的细胞周期情况.Westem blot检测cyclinD、Bcl-2及Capase3蛋白表达的影响.结果 转染48 h后,在SKOV3细胞中Control组、N-Control组、GLI1 shRNA-1组、GLI1 shRNA-2组、GLI1shRNA-3组、GLI1 shRNA-4组的GLI1 mRNA水平分别为1.00±0.00、1.03 ±0.02、0.73±0.07、0.98 ±0.08、0.53±0.08、0.68±0.04,与Control组相比,GLI1 shRNA-1、GLI1 shRNA-3、GLI1 shRNA-4组GLI1 mRNA表达量均下降（P＜0.05）,转染GLI1 shRNA-3的SKOV3细胞中GLI1蛋白表达水平低于GLI1 shRNA-1、GLI1shRNA-2、GLI1 shRNA-4组（P＜0.05）,具有显著的干扰效果.转染GLI1 shRNA-3的SKOV3细胞增殖受到明显抑制（P＜0.05）,在紫杉醇的诱导下细胞凋亡比例明显增加,细胞周期主要阻滞在G1/S期.Western blot检测发现Bcl-2蛋白表达下降（P＜0.05）,Capase3蛋白表达升高（P＜0.05）,细胞周期蛋白CyclinD1蛋白表达下降（P＜0.05）.结论 GLI1 shRNh对SKOV3细胞增殖抑制作用明显,促进细胞凋亡,GLI1信号可通过抑制cyclinD1活化抑制细胞恶性增殖.     

HIF-1α、ALDH1 和Hedgehog 信号通路协同促进三阴性乳腺癌中癌症干细胞活化的相关性研究

目的:探讨HIF-1α、ALDH1 和Hedgehog 信号通路在三阴性乳腺癌中癌症干细胞活化的相关性及其临床意义。方法:采用免疫磁珠法从三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231 细胞中分选出ALDH1+乳腺癌干细胞和ALDH1-乳腺癌细胞,采用qRT-PCR 方法比较HIF-1α和Hedgehog 信号传导通路主要分子SHH、PTCH1、SMO、GLI1 在这两种细胞中的表达差异;采用免疫组化方法了解HIF-1α和ALDH1 在三阴性乳腺癌组织中的表达以及与干细胞信号传导通路Hedgehog 的相互关系。结果:HIF-1αmRNA、SMO mRNA 和GLI1 mRNA 在ALDH1+乳腺癌干细胞中的表达均明显高于ALDH1-乳腺癌细胞,差异具有显著统计学意义(P 均<0.05)。在三阴性乳腺癌与非三阴性乳腺癌组织中HIF-1α的阳性表达率分别为90.0% 和70.0%,ALDH1 的阳性表达率分别为93.3%和66.7%,差异均具有显著统计学意义(P 均<0.05)。在三阴性乳腺癌组织中HIF-1α和ALDH1 的表达呈正相关(r =0.53,P<0.01)。HIF-1α的表达与三阴性乳腺癌的淋巴结转移和TNM 分期有关(P 均<0 .05),ALDH1 的表达与组织学分级和TNM 分期有关(P 均<0.05)。HIF-1α与Hedgehog 信号通路分子SHH(r = 0.584,P<0.01)、SMO(r=0.467,P<0.01)和GLI1(r =0.439,P<0.05)的表达呈正相关,ALDH1 与SHH(r =0.426,P<0.05)和GLI1(r =0.394,P<0.05)的表达呈正相关。结论:HIF-1α和Hedgehog 信号通路在ALDH1+ 乳腺癌干细胞中活化,HIF-1α、ALDH1 与Hedgehog信号传导通路可能相互协同激活癌症干细胞从而促进三阴性乳腺癌的恶性进展。     

在乳腺癌干细胞中Hedgehog信号通路相关基因表达增强

目的 了解Hedgehog信号通路在乳腺癌发生发展中的作用.方法 用免疫磁珠法从无血清培养的乳腺癌悬浮细胞中分选CD44+CD24-细胞和非CD44+CD24-细胞,用real-time RT-PCR法检测Hedgehog信号通路主要分子$HH、PTCH1、SMO和GLI1 mRNA在细胞中的表达,用免疫组织化学法检测上述因子在乳腺癌组织中的表达.结果 分选出的CD44+CIDA-细胞约占乳腺癌悬浮细胞总数的8.25%,分选出的CD44+CD24-细胞表达干细胞标志蛋白ALDHA1和Oct-4;SHH、PTCH1、SMO和GLI1 mRNA在CD44+CD24-细胞中的表达均高于其在非CD44+CD24-细胞中的表达(P＜0.05);SMO和GLI1蛋白在三阴性乳腺癌的表达均高于非三阴性乳腺癌组织(P＜0.05).结论 在乳腺癌干细胞CD44+CD24-细胞中Hedgehog信号通路被激活,抑制癌症干细胞中Hedgehog通路的活化可能会降低或阻止乳腺癌的复发及化疗耐受.     

微卫星DNA不稳定性与遗传性非息肉病性大肠癌的相关性研究

目的:探讨微卫星DNA不稳定性(microsatelliteinstability,MSI)与遗传性非息肉病性大肠癌(hereditarynonpolysiscolorectalcancer,HNPCC)的关系。方法:采用PCR-SSCP方法,检测2例遗传性非息肉病性大肠癌、11例散发性大肠癌的2、17号染色体的2个位点的MSI。结果:2例遗传性非息肉病性大肠癌均存在一个位点的MSI,11例散发性大肠癌中1个有MSI。结论:MSI是HNPCC常见的分子学事件,HNPCC有其特有的分子生物学特性。     

大连大学非医学专业学生临床常见疾病认知情况调查

目的了解大学生对一些常见疾病的认知状况,为开展常见疾病健康教育提供依据。方法采用自编调查问卷,对大连大学2910名大一至大三年级学生的常见疾病认知情况进行抽样调查。结果多数学生对于常见疾病的了解相当有限(P值均0.05),而且疾病知识结构单一,但91.48%的被调查者表示渴望接受更多的常见疾病健康教育。结论非医学专业大学生临床常见疾病了解程度有待进一步提高,应在大学生健康教育中加强常见疾病医学教育。     

Oct-4、SOX2和KPNA2在三阴性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨三阴性乳腺癌(TNBC)组织中Oct-4、SOX2和KPNA2的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测Oct-4、SOX2和KPNA2在30例TNBC和30例非TNBC患者癌组织中的表达,分析三者的表达与TNBC患者临床病理因素及预后的关系。结果:与非TNBC组织比较,TNBC组织中Oct-4的阳性表达率(86.7%vs.73.3%,P0.05)和SOX2的阳性表达率(90.0%vs.70.0%,P0.05)均明显升高,KPNA2的阳性表达率无统计学差异(P0.05)。在TNBC组织中,Oct-4、SOX2和KPNA2彼此间的表达均呈正相关(Oct-4和SOX2:r=0.680,P0.0001;Oct-4和KPNA2:r=0.581,P=0.0008;SOX2和KPNA2:r=0.770,P0.0001)。在TNBC患者中,Oct-4的表达与年龄、组织学分级、淋巴结转移和TNM分期均有关,SOX2的表达与淋巴结转移和TNM分期有关,KPNA2的表达与淋巴结转移有关(均P0.05);Oct-4、SOX2、KPNA2阳性表达患者生存率明显低于各自阴性表达患者(均P0.01)。结论:Oct-4、SOX2在TNBC组织中表达均增加,且两者可能与KPNA2共同参与了TNBC的恶性进展。     

面部皮肤病患者蠕形螨感染情况调查

目的　了解面部皮肤病患者蠕形螨感染情况。　方法　采用挤粘结合法对大连市 373名面部皮肤病患者进行蠕形螨感染调查。　结果　总感染率为 89.81% ,男女感染率和感染度间差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;男女皮肤病患者均以蠕形螨重度感染多见 ;毛囊蠕形螨为优势螨种 ;蠕形螨面部寄生部位排序为鼻、额、下颌、颊部 ;不同职业间蠕形螨感染差异有显著性 (P<0 .0 1) ,以学生感染率最低 ,为 6 4 .10 % ,工人、服务行业从业人员感染率最高 ,分别为 98.5 3%和97.18%。　结论　面部常见皮肤病与蠕形螨感染关系密切。     

Hedgehog信号通路在乳腺癌CD44^＋ CD24^-细胞中激活

目的了解Hedgehog信号通路在乳腺癌发生发展中的作用。方法采用免疫磁珠法从无血清培养的乳腺癌悬浮细胞中分选CD44＋CD24-细胞和非CD44＋CD24-细胞,分别接种于NOD/SCID鼠乳腺脂肪垫内,观察成瘤情况。采用real-time RT-PCR技术检测Hedgehog信号通路分子SMO和GLI1在CD44＋CD24-细胞和非CD44＋CD24-细胞中的表达情况。结果分选出的CD44＋CD24-细胞约占细胞总数的2.25%,SMO mRNA和GLI1 mRNA在CD44＋CD24-细胞中的表达均高于其在非CD44＋CD24-细胞中的表达（P均〈0.05）。CD44＋CD24-组乳腺癌发生率为100%（3/3）,发生肺转移、淋巴结和肺转移、肝脏和淋巴结转移各1只;非CD44＋CD24-细胞组乳腺癌发生率为50%（2/4）,未见有转移发生。结论在乳腺癌CD44＋CD24-细胞中Hedgehog信号通路分子表达增强,其与乳腺癌的浸润转移关系密切。     

E-钙粘素、基质金属蛋白酶-2及其抑制剂与大肠癌浸润转移的关系

目的:探讨E-钙粘素(E-Cad)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制剂(TIMP-2)表达与大肠癌浸润转移的关系。方法:采用S-P免疫组织化学染色技术,检测30例大肠腺癌,60例大肠癌组织E-Cad、MMP-2和TIMP-2的表达情况。结果:E-Cad的表达率在大肠腺瘤中为87.10%,显著高于大肠癌中的55.10%(P<0.05);其表达与大肠癌的大体类型有关,且随着大肠癌分化程度的降低而减少,与淋巴结转移呈负相关,E-Cad表达率越高患者的预后越好(P均<0.05)。MMP-2的表达率在大肠腺瘤中为26.67%,显著低于大肠癌中的86.67％(P<0.05);其表达与大肠癌的Dukes分期、分化程度、淋巴结转移和生存期均密切相关(P均<0.05)。TIMP-2的表达在大肠腺癌和大肠癌组织中没有显著性差异(P均>0.05),但其表达与大肠癌的Dukes分期、淋巴结转移、远隔脏器转移及生存期均有关(P均<0.05)。结论:E-Cad、MMP-2和TIMP-2的检测可以成为临床判断大肠癌的恶性程度、转移及预后的重要参考指标。