结缔组织生长因子介导转化生长因子β1促进瘢痕成纤维细胞转分化的研究

目的 了解结缔组织生长因子(CTGF)介导TGF-β1发挥促人增生性瘢痕Fb(HSFb)转分化的作用.方法 体外培养人HSFb,取5份细胞标本分别加入不同浓度TGF-β1(0、2.5、5.0、7.5、10.0 ng/mL),作用48 h后待测.余下标本分为:空白对照组;CTGF刺激组,培养液中加入终浓度10.0 ng/mL重组人CTGF;TGF-β1刺激组,培养液中加入终浓度10.0 ng/mL重组人TGF-β1;CTGF反义寡脱氧核苷酸(ASODN)转染组,细胞转染CTGF ASODN后,加入培养液;CTGF ASODN转染+TGF-β1刺激组,细胞转染CTGF ASODN后2 h,加人含终浓度10.0 ng/mL重组人TGF-β1的培养液.蛋白质印迹法分析不同浓度TGF-β1刺激对细胞CTGF表达的影响,比较各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化;流式细胞仪检测α-SMA阳性细胞百分率.结果 TGF-β1浓度为10.0 ng/mL时,CTGF的表达明显高于未受刺激的细胞(P<0.05).CTGF刺激组与TGF-β1刺激组α-SMA表达明显高于空白对照组(P<0.01).CTGF ASODN转染组以及CTGF ASODN转染+TGF-β1刺激组α-SMA表达与空白对照组接近(P>0.05).上述各组细胞α-SMA阳性细胞百分率依次为(10.8±2.8)%、(29.1±4.0)%、(28.7±4.8)%、(10.7±2.3)%、(14.3±2.9)%,统计学分析结果类似于α-SMA表达.结论 CTGF是TGF-β1发挥促人HSFb转分化的重要下游效应分子之一.     

JAK-STATs通路在CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化中的作用

目的:探讨JAK-STATs是否参与CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞(human hypertrophic scar fibroblast,hHSF)增殖分化过程。方法:原代培养hHSF,将其分为①对照组:hHSF组;②CTGF刺激hHSF组。取0min、5min、10min、20min、30min、45min、60min、90min八个时相点,采用western-blot方法检测各时相点JAK1、JAK2、JAK3、TYK2、STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5、STAT6蛋白活化(磷酸化)情况。再对筛选出的蛋白用免疫荧光化学染色和凝胶阻滞电泳(EMSA)方法进一步验证分析其表达及活化情况,以筛选出参与CTGF调控hHSF增殖和分化的JAK-STATs信号分子。结果:通过western-blot、免疫荧光化学染色和凝胶阻滞电泳(EMSA)方法筛选出JAK1、STAT1蛋白在CTGF刺激后蛋白活化程度明显增强。结论:JAK1、STAT1可能参与了CTGF调控hHSF增殖过程。这从一定程度上揭示了CTGF调控hHSF增殖分化过程的信号转导机制,从而为抑制瘢痕纤维化提供了新的研究方向,有助于更深入地调控CTGF的促纤维化作用,为hHSF及其它纤维化疾病的研究及防治提供新的思路。     

保留部分瘢痕真皮的改良瘢痕切除减张缝合术

瘢痕是临床上的常见病、多发病,尤其是发生在颜面等暴露部位者,常严重影响患者的外观。尽管瘢痕的治疗方法有很多,对于较小、较窄的瘢痕,切除缝合仍是目前应用得最多的方法,也是最简单、效果最理想的方法[1-2]。临床上笔者常常观察到,虽然刚拆线时瘢痕切除缝合后的切口瘢痕很不明显,但随着时间的推移,切口瘢痕会越来越宽,甚至     

结缔组织生长因子影响体外培养瘢痕成纤维细胞ERK/MAPK信号通路活化及增殖的研究

Objective To explore the signal mechanism of proliferation stimulating effect of connec-tive tissue growth factor (CTGF) on hypertrophic scar (HS) derived fibroblasts. Methods <'3>H-TdR in-corporation technique was used to determine the proliferative effect of CTGF at different concentration. Western blot was applied to semi-quantitively analyze the expression of phosphorylated and total ERK1/2 protein after 0, 5, 10, 15, 30, and 60 min of CTGF stimulation, and the relative value of which was de-fined as AI to measure the activation of ERK1/2 signal pathway. PD98059 was admitted to specifically block the ERK1/2 pathway, and subsequently cell proliferation stimulated by CTGF was studied by MTT. Results CTGF could stimulate fibroblasts proliferation with a dose-dependant manner, and activa-ted the ERK1/2 signal pathway, and AI built up to 0.209±0.0201, reaching the apex at 15 min after stimulation performed. Inhibition of ERK1/2 activation by PD98059 suppressed CTGF-mediated HS fi-broblasts proliferation significantly, while OD significantly dropped. Conclusion CTGF induces a prolif-erative response in HS fibroblasts, and this action is mainly dependent on the activation of ERK1/2 signal pathway.     

恶性疟原虫的一种过氧化物氧化还原酶的分子克隆和鉴定

恶性疟原虫在人体内的红内期和肝期寄生于富含氧的环境。宿主免疫系统、疟原虫自身代谢(如消耗红细胞中的血红蛋白)以及某些抗疟药的使用而产生的活性氧族(ROS)使疟原虫受到毒性作用。超氧化物歧化酶(SOD))、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶是三种主要的抗活性氧酶。在恶性疟原虫中内源性SOD、GPx已得到鉴定,但内源性过氧化氢酶的存在尚无明确的报道。     

13例先天性束带综合征的治疗及观察

先天性束带综合征(congenital constricting band syndrome,CCBS)为临床少见病种,对此类疾病的称谓较多,如先天性环沟畸形、先天性绞扼轮综合征、Streeter′s畸形等。患儿出生时身体出现完全性或不完全性环绕肢体软组织的凹陷,多发于小腿、足趾、前臂及手指等,偶尔在躯干亦有发现,可同时伴肢体畸形。目前CCBS的病因尚不清楚,国外有学者认为该     

先天性心脏病术后患儿6分钟步行试验前后心电参数对照研究

目的 研究先天性心脏病（CHD）患儿术后中远期随访6 min步行试验（6MWT）前后心电参数的变化.方法 选取复旦大学附属儿科医院心血管中心经心脏外科手术纠治的年龄≥3岁且随访时间≥6个月的CHD患儿为CHD组;选取健康儿童作为对照组.将CHD组和对照组同时分为3～5岁、～8岁、～12岁和～15岁亚组.CHD组根据CHD类型分为复杂CHD亚组和简单CHD亚组.比较各组6MWT前后P波离散度（Pwd）、QRS时限和QT离散度（QTd）变化.结果 CHD组89例,男51例,女38例,行外科手术时的平均年龄为（3.0±2.3）岁（36 d至11.0岁）,术后平均随访时间为（3.6±3.2）（0.5～14.2）年.3～5岁、～8岁、～12岁和～15岁亚组分别为39、27、11和12例.复杂和简单CHD亚组分别为29和60例.对照组133名（男75名,女58名）,3～5岁、～8岁、～12岁和～15岁亚组分别为26、39、39和29名.①CHD组和对照组各年龄亚组6MWT后Pwd、QRS时限和QTd均较6MWT前减小,但差异无统计学意义（均P〉0.05）.②CHD组3～5岁和～12岁亚组6MWT前QTd均较对照组显著增大,3～5岁亚组：（0.025±0.018） vs （0.012±0.011） s,P＝0.004;～12岁亚组：（0.029±0.014） vs （0.019±0.012） s,P＝0.019.CHD组各年龄亚组6MWT后QTd与对照组比较差异无统计学意义（均P〉0.05）.③CHD组～8岁和～15岁亚组6MWT前后QRS时限均较对照组显著延长（P分别为0.000和0.007）;各年龄亚组6MWT后差异均有统计学意义.④复杂CHD亚组6MWT前后QRS时限均较简单CHD亚组延长,6MWT前：（0.102± 0.025） vs （0.080 ± 0.021） s,P=0.000;6MWT后：（0.103 ± 0.026） vs （0.080 ± 0.021） s,P=0.000,两亚组6MWT前后Pwd和QTd差异均无统计学意义.结论 CHD术后中远期随访患儿心脏电活动仍不稳定,但其6MWT前后心电参数Pwd、QRS时限及QTd的变化趋势与健康儿童相一致,提示亚极量运动有助于增强心脏电活动的稳定性.     

改进阴茎延长术的临床效果

目的 探讨一种效果满意并能避免长时间术后水肿的阴茎延长手术方法.方法 在新鲜尸体上采用淋巴管间接注射法、常规HE染色研究阴茎淋巴管走行及分布特点;观察发现阴茎淋巴回流主要通过背侧及双侧侧方浅层淋巴管,这部分淋巴管在阴茎背侧根部集中后向耻骨联合上区及双侧腹股沟分行；而以往的阴茎延长术切口大部分存在阴茎背侧根部主要回流淋巴管集中区域的横向切口,造成大部分淋巴回流通道受阻.在上述观察结果的基础上,将原有阴茎根部手术切口上移1.5 cm,并采用阴囊皮瓣转移覆盖延长的阴茎海绵体创面.结果 80例患者阴茎水肿于术后3d逐渐消退,6～7 d左右肿胀基本消失,效果满意.结论 改进的阴茎延长手术方法,由于避开了上述回流淋巴管集中区域,减少了主要淋巴管回流通道的损伤,术后水肿消退进程较以往明显加快,且成功率高,外形满意,感觉好,是一种较为理想的手术方法.     

结缔组织生长因子体外促进人增生性瘢痕成纤维细胞转分化的研究

目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)在人增生性瘢痕成纤维细胞转分化中的作用.方法培养人增生性瘢痕成纤维细胞,分别给予不同剂量CTGF刺激(10 ng/ml),以及CTGF ASODN转染,48 h后用Western blot方法比较各组间α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达变化.结果刺激48 h后,对照组表达少量α-SMA蛋白;小剂量CTGF刺激组和大剂量CTGF 刺激组作用48 h后,α-SMA表达量均显著增多,且成浓度依赖性变化(P<0.01);而CTGF ASODN转染组α-SMA蛋白表达与对照组比较明显减少(P<0.05).结论 CTGF在体外能促进人增生性瘢痕成纤维细胞向肌成纤维细胞(myofibroblast ,MyoF)的转分化,阻断或者抑制其表达可能将更有效的治疗瘢痕挛缩.     

恶性雀斑样痣和恶性雀斑样黑素瘤的分阶段治疗（附10年临床观察结果）

恶性雀斑样痣于1892年首次被Hutchinson描述为长期慢性晒伤后非典型黑素细胞在真皮表皮交界部的过度增生。由于其临床特征不典型,常常影响皮肤科及整形科医师及时诊治。恶性雀斑样黑素瘤由恶性雀斑样痣发展而来,其发病率与年龄、性别、地理、阳光暴晒有关。