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背景:研究已表明利福平能在体内、外实验起重要的神经保护作用。尽管介导这一效应的确切机制尚不清楚,但一些研究提示利福平可能是通过拮抗线粒体功能障碍和氧化应激作用。
目的:探讨利福平对鱼藤酮诱导的分化PC12细胞线粒体氧化应激的保护作用和分析其可能机制。
设计、时间和地点:本实验是从2007年12月至2008年11月在中山大学附属第二医院神经科进行的随机重复测量的细胞实验。
材料:PC12细胞由中山大学中山医学院生理实验室馈赠。MTT购自美国MB chem.公司。鱼藤酮,利福平,罗丹明123,DCFH-DA,Hoechst 33342及Annexin V-FITC 凋亡检测试剂盒购自美国Sigma公司。还原型和氧化型谷胱甘肽测定试剂盒和蛋白定量试剂盒购自中国江苏碧云天生物技术研究所。
方法:PC12细胞经100 ng/ml 7S神经生长因子处理九天成分化细胞后培养于含有10%胎牛血清的DMEM/F12中,并孵育在含5% CO2的37 ℃培养箱中。隔天更换培养基。根据不同的处理条件分成六组:对照组(常规加培养基)、利福平组(300μmol/L利福平作用26h)、鱼藤酮组(2.5μmol/L鱼藤酮作用24h)和三组利福平预处理组(先分别给予100, 200 and 300 μmol/L利福平预处理2h,然后2.5μmol/L鱼藤酮再作用24h)。
主要结果测量:(1)MTT检测细胞活性;(2)Hoechst 33342核染和流式细胞仪检测细胞凋亡;(3)荧光显微镜和流式细胞仪测量经罗丹明123标记的线粒体膜电位;(4)流式细胞仪分析DCFH-DA标记的细胞内活性氧生成和酶标仪检测细胞内还原型谷胱甘肽。
结果:鱼藤酮诱导分化PC12细胞凋亡增加同时伴有细胞线粒体膜电位丢失、活性氧生成及谷胱甘肽耗竭;当细胞经过100, 200 and 300 μmol/L利福平预处理后,鱼藤酮诱导的这一线粒体功能障碍能够被利福平以剂量依赖方式所阻断。
结论:利福平预处理的分化PC12细胞能够通过减轻线粒体功能异常和氧化应激阻断鱼藤酮诱导的细胞凋亡。 相似文献
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左旋多巴类药物短期“休假”在帕金林病治疗中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
探讨对长期用左旋多巴(L-Dopa)类药物的帕金森病(PD)病人,经短期停用L-Dopa否疗效、降低L-Dopa剂量和减少并发症。方法 选择20例PD病人,均存在明显的疗铲减退或药物并发症。在较严密观察下停L-Dopa类药物0天,丙从小剂量开始服用,并且分别在停药前用重新服药1、3和6个月对病人的病情和并发症先进进行分级。结果 短期“休假”疗法后,L-Dopa类药物剂量减少近50%;连续观察1、3 相似文献
74.
细胞色素P4502D6Ch型突变与帕金森病遗传易感性陶恩祥1刘焯霖1陈彪2潘锡榜1(1中山医科大学神经病学教研室;广州,5100802美国帕金森病研究所)主题词细胞色素C氧化酶;帕金森病/遗传学中图号R742.5;394帕金森病(Parkinson′... 相似文献
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帕金森病 (Parkinson sdisease,PD)的病因和发病机制至今尚不清楚。近年来人们开始注意到遗传和环境对PD发生的相对作用。有关PD家族聚集性和多病例家族常染色体显性遗传方式的研究也提示遗传因素在PD的病因学中起基础性作用[1 ,2 ] 。PD以黑质多巴 相似文献
77.
[目的]用RT-PCR法获得人类神经元性芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)基因全序列,并建立优化方法.[方法]从人嗜铬细胞瘤中提取组织总RNA,自行设计引物,采用两步RT-PCR法扩增出长约1550bp的基因片断,凝胶回收后与高效克隆PCR产物的新型载体T-载体连接,并转化入大肠杆菌,通过蓝白斑反应筛选出重组体,质粒提取后进行重组体的酶切鉴定及基因测序.[结果]BamHⅠ和HindⅢ酶切证实了目的基因同克隆载体进行了有效的连接,基因测序证实了所克隆的片断为人AADC基因.[结论]本实验通过对引物,Taq酶的选择及反应条件的优化,保证了扩增的有效性和特异性.新型的克隆载体明显提高了克隆效率.基因测序证实了AADC基因扩增的成功.本研究为AADC基因治疗帕金森病等多巴胺能缺乏疾病的研究打下了基础. 相似文献
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[目的]观察一个肢带型肌营养不良伴心肌损害家系患者的临床病理特点。[方法]行家系调查,家系成员行心肌酶及肌钙蛋白T、心电图、肌电图、彩超检查;4位患者取肌肉标本进行组织化学的病理观察。[结果]系谱显示4代共有9位患者,每代都出现,男女均受累及。健在5位患者,均出现进行性肌肉无力、萎缩,以肩带及盆带部明显;心肌酶及肌钙蛋白T检查正常;部分患者出现心脏扩大、心律失常、心力衰竭。病理检查见明显肌萎缩、核内移、肌裂等现象,符合肌营养不良的典型表现,Dystrophin免疫组化结果为(+)。[结论]该家系符合常染色体显性遗传的特点;根据患者临床及病理特点,诊断为肢带型肌营养不良症伴心肌损害,以肢带型肌营养不良症ⅠB型(LGMD-ⅠB)可能性大;进一步明确其基因分型需行分子遗传学检查。 相似文献
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目的:研究聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂鲁卡帕尼对于鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响.方法:将呈对数生长的SH-SY5Y细胞分为3组:对照组(正常培养)、模型组(鱼藤酮10μmol/L诱导)、药物组(鲁卡帕尼5μmol/L预处理1小时后加入鱼藤酮10μmol/L),用CCK8检测各组细胞的存活率,用蛋... 相似文献
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第13届国际帕金森病会议纪要 总被引:23,自引:0,他引:23
第13届国际帕金森病会议于1999年7月24~28日在加拿大温哥华举行,参加会议的代表来自46个国家的2500多名。我国有30多名代表参加了会议,王新德教授被选为会议咨询委员。会议上交流了近500多篇论文,内容包括帕金森病的流行病学、遗传学、病理学、药物治疗、康复治疗、手术治疗研究等广泛的领域。一、流行病学研究Weitzel对2个岛上居民的调查发现挪威的Rogaland岛居民帕金森病的患病率(209.0/10万人口)明显高于丹麦南部地Ais岛居民的患病率(98.3/10万人口),说明该病发病率有明显的地区差异,提示遗传易患性和环境因素起着作用。… 相似文献