前列腺癌特异性抗原基因检测研究进展

前列腺癌是男性常见肿瘤之一 ,且前列腺癌患者逐年增加。为了适应临床早期检出原发性和潜在的转移性肿瘤的要求 ,前列腺癌特异性抗原 (PSA)的基因检测方法发展很快。而前列腺癌微转移检测在肿瘤早期诊断、治疗监测及预后判断方面具有重要意义。本文就PSA基因分子生物学、检测方法学以及在前列腺癌微转移检测中的应用价值作一综述     

前列腺癌患者外周血中前列腺癌抗原3基因和前列腺特异性抗原基因联合检测的意义

目的 评价外周血前列腺痛抗原3基因(prostate cancer antigen 3,PCA3 mRNA)和前列腺特异性抗原基因(prostate specific antigen,PSA mRNA)联合检测对前列腺癌(PCa)及对其微转移诊断的价值.方法 用双重荧光实时定量逆转录(dFQ-RT)-PCR对49例PCa和71例前列腺增生(BPH)患者外周血PCA3 mRNA和PSA mRNA进行定量检测,通过受试者工作特征(ROC)曲线评价其在PCa诊断和微转移监测中的价值.结果 PCa组外周血PCA3 mRNA含量明显高于BPH组[2 362(<3-7 421)拷贝/ml比<30拷贝/ml,Z=-6.66,P<0.01],而PSA mRNA含量也明显高于BPH组[3 425(908～36 639)拷贝/ml比<200拷贝/ml,Z=-6.40,P<0.01];PCa组外周血PCA3mRNA和PSA mRNA的阳性率随临床分期增高而增加[B期:均为30.0%(3/10),C期:60.0%(9/15)和86.7%(13/15),D期:91.7%(22/24)和91.7%(22/24);χ2分别为13.534和16.451,P均<0.01],同时也随Gleason评分增高而增加[2～4分:20.0%(1/5)和40.0%(2/5);5～7分:66.7%(12/18)和72.2%(13/18);8～10分:84.6%(22/26)和92.3%(24/26);χ2分别为8.895和8.015,P均<0.05];ROC曲线显示,当PCA3 mRNA和PSA mRNA临界值分别为846拷贝/ml和280拷贝/ml时,诊断PCa敏感度分别为69.4%(34/49)和81.7%(40/49),特异度分别为90.1%(64/71)和77.5%(55/71);而联合检测时其敏感度可增至85.7%(42/49),但特异度下降为76.1%(54/71).PCA3 mRNA诊断PCa微转移的敏感度和特异度分别为90.9%(20/22)和84.7%(11/13).结论 外周血PCA3 mRNA和PSA mRNA检测是PCa诊断的良好指标,而联合检测可弥补PCA3 mRNA敏感度低和PSA mRNA特异度低的不足,而更有利于PCa诊断;PCA3 mRNA可能为PCa微转移诊断的良好指标.     

血清肿瘤标志物在腮腺肿物诊断中的价值

目的探讨血清中癌胚抗原(CEA)和糖类抗原(CA)15-3、CA19-9的测定对腮腺肿物临床诊断的价值。方法采用化学发光免疫法,对42例腮腺良性肿物和21例腮腺恶性肿瘤患者血清中CEA、CA15-3、CA19-9的水平进行检测,评价3项指标对腮腺肿物诊断的价值。结果腮腺恶性肿瘤组患者血清中CEA、CA15-3、CA19-9的检测值均高于良性肿物组,但差异无统计意义(P>0.05);恶性肿瘤组中CEA的阳性率高于良性肿物组,差异有显著性(P<0.01);CA15-3、CA19-9的阳性率均明显高于良性肿物组,但差异无显著性(P>0.05)。结论血清中CEA、CA15-3、CA19-9的检测对提高腮腺恶性肿瘤临床诊断率有一定的价值,能在术前确诊近半数的恶性肿瘤,3项指标联合检测可作为腮腺恶性肿瘤诊断的参考依据之一。     

白介素10-819 C>T位点多态性与浙江汉族人群膀胱癌易感性的关系

目的探讨白介素-10基因-819 C>T位点多态性与膀胱癌易感性的关系。方法以病例对照研究方法,应用等位基因特异性PCR(AS-PCR)分别检测400例膀胱癌患者和400例健康体检者的IL-10-819 C﹥T基因多态性,对各基因型和等位基因进行统计学分析。结果膀胱癌组变异纯合TT基因型的频率(54.5%)高于对照组基因型(42.0%),差异有统计学意义[χ2=4.740,P<0.05,OR=1.977(95%CI:1.064～3.674)],膀胱癌组携带变异T等位基因的频率(72.0%)高于对照组基因型(63.0%),差异有统计学意义[χ2=7.385,P<0.01,OR=1.510(95%CI:1.121～2.035)];IL-10-819 C>T的基因型频率在浅表型和浸润型膀胱癌之间无统计学意义。结论 IL-10-819 C﹥T基因多态性与浙江汉族人群膀胱癌易感性有关。     

哮喘大鼠血单个核细胞中STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的表达及布地奈德的影响

目的研究哮喘大鼠血单个核细胞中信号转导和转录激活因子STAT5bmRNA和IL-4mRNA的转录表达及布地奈德(BUD)对其表达的影响。方法30只体重为140￣200g清洁级SD雌性大鼠,随机分为3组:哮喘组(A组)、BUD组(B组)、正常对照组(C组)。对血中嗜酸性粒细胞(EOS)计数;应用双抗体夹心ELISA测定血浆中IL-4和IFN-γ水平;采用SYBRGREENI荧光定量PCR法测定STAT5bmRNA和IL-4mRNA的相对含量。结果(1)A组血中单个核细胞STAT5bmRNA和IL-4mRNA的表达均高于B组和C组(P<0.01);B组与C组之间差异无统计学意义(P>0.05)(。2)STAT5bmRNA与IL-4mRNA的表达呈正相关(P<0.01),且两者的表达分别与血浆中的IL-4水平、EOS绝对值呈正相关(P<0.01),与血浆中IFN-γ水平呈负相关(P<0.01)。结论哮喘大鼠血中单个核细胞STAT5bmRNA和IL-4mRNA的表达增强且呈正相关;布地奈德可以下调STAT5bmRNA和IL-4mR-NA的表达,可能是其抑制哮喘气道炎症形成的重要机制之一。     

平湖市农村儿童b型流感嗜血标菌病菌免疫接种情况调查

b型流感嗜血杆菌(Hib)是脑膜炎、肺炎、败血症等疾病的重要病原体,主要侵袭5岁以下儿童.接种由WHO推荐的Hib疫苗,是预防上述疾病的最有效、最简便的措施.为了探讨Hib疫苗在我国农村推广应用的可知地性,2000年6～7月,在平湖市2个乡镇首次推广使用了该疫苗,并对有关情况进行调查.     

接种卡介苗致同侧锁骨上及腋下化脓性淋巴结炎1例

患儿刘某，男，2001年5月22日出生，住平湖市当湖镇百步桥社区。2001年5月24日，由本市某医院妇产科婴儿室护士于左臂三角肌外侧上缘(正确接种部位应为三角肌外侧下缘)皮内接种卡介苗(上海生物制品研究所生产，批号20000401，失效期2001年7月15日)0．1ml。2足月时，家长发现婴儿左锁骨上淋巴结肿大，如蚕豆大小，到嘉兴市某医院就诊，     

外周血乙型肝炎病毒核酸水平与丙氨酸氨基转移酶关系的探讨

目的　探讨血清中乙型肝炎病毒核酸 (HepatitisBvirus -DNA ,HBV -DNA)含量与丙氨酸氨基转移酶 (Alanineaminotransferase ,ALT)的关系。方法　用荧光实时定量聚合酶链反应 (Fluorescencereal-timequantita tivepolymerasechainreaction ,FQ -PCR)和连续监测法分别检测了 5 2 8例乙型肝炎病毒感染者及非病毒感染者血清中HBV -DNA和ALT水平。结果　当血清中HBV -DNA含量在 10 6拷贝 /毫升以下时 ,随着血清中HBV -DNA含量的增加 ,血清ALT水平升高 ;但当HBV -DNA含量超过 10 6拷贝 /毫升后 ,ALT水平反而随着血清中病毒数量的增加而呈减弱趋势。结论　血清中乙型肝炎病毒数量与ALT之间存在一定的关系 ,但不能只依据血清ALT水平来推断乙型肝炎病毒在体内的复制活跃程度     

金马通络胶囊中东莨菪碱及士的宁成分的定量测定

目的 :建立一种用反相高效液相色谱法检测金马通络胶囊中东莨菪碱及士的宁含量的方法。方法 :用C18ODS柱为固定相。甲醇 :水 (5 8:4 2 ,V/V) (水相含 0 .0 5mol/L醋酸盐缓冲液及 0 .0 0 2 5mol/L十二烷基硫酸钠 )为流动相。检测波长2 2 6nm。结果 :该方法回收率为氢溴酸东莨菪碱 10 0 .3 3 % ,RSD =3 .19% (n =5 ) ;士的宁为 97.0 8% ,RSD =4 .5 1% (n =5 )。结论 :该方法操作简便、快捷、专一、准确性好 ,可用于金马通络胶囊质量控制。     

外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒核酸与细胞因子含量变化

目的：探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒核酸与血清细胞因子变化关系。方法：采用荧光实时PCR技术定量检测76例慢性乙型肝炎患者和15例健康者外周血单个核细胞中HBVDNA含量，用ELISA法定量检测血浆细胞因子(IFN-γ、TNF—α、IL-4、IL-6、TGF-β1、sIL-2R)水平。结果：①慢性乙型病毒性肝炎中细胞因子(IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、TGF-β1、sIL-2R)水平明显高于健康对照组；②单个核细胞HBVDNA阳性组IFN-γ、TNF-α含量明显低于阴性组，而sIL-2R含量则高于阴性组但无统计学差异，IL-4、IL-6、TGF-β1含量无差异；③随着PBMCs中HBVDNA含量升高，TNF—α含量逐渐降低，IL-4和sIL-2R含量逐渐升高，而IFN-γ，IL-6、TGF-β1含量无显著性变化。结论：外周血单个核细胞HBVDNA持续存在及含量变化与细胞因子相对异常有关，进而导致肝细胞损伤。