类肝素酶在胃癌组织中的表达及其临床价值

目的：研究胃癌组织中类肝素酶（Ｈｅｐａｒａｎａｓｅ,ＨＰＳＥ）的表达与临床病理特征及生存期的关系,探讨其作为胃癌预后指标的可行性。方法：应用免疫组化方法检测具有随访资料的１０３例胃腺癌标本中ＨＰＳＥ的表达,并将检测结果与临床病理特征进行综合分析。结果：（１）１０３例胃癌组织中ＨＰＳＥ的阳性表达率为５７.３％（５９／１０３）,在胃正常组织中均无表达;（２）ＨＰＳＥ的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位和分化程度均无相关性（Ｐ＞０.０５）,而与肿瘤的浸润深度、临床分期、淋巴结转移和远处转移相关（Ｐ＜０.０５）;（３）ＨＰＳＥ阳性表达患者中位生存时间为１１.０个月,阴性表达患者中位生存时间为７０.０个月（Ｐ＜００５）。结论：测定胃癌组织中ＨＰＳＥ的表达,有助于临床胃癌患者的诊断以及预后判断。     

Ⅳ期结直肠癌患者血清中VEGF水平的临床意义

目的 探讨血清中血管内皮生长因子(VEGF)水平在Ⅳ期结直肠癌诊疗中的意义.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测45例Ⅳ期结直肠癌患者血清VEGF水平,20例健康体检者作为正常对照.结果 Ⅳ期患者姑息术后第7天血清中VEGF水平较术前显著降低(P<0.01).能从bevacizumab治疗中获益的患者与未能从中获益的患者相比,其治疗前VEGF水平无统计学差异(P=0.554).结论 Ⅳ期结直肠癌患者血清中VEGF水平随肿瘤负荷减小而降低.Ⅳ期结直肠癌患者治疗前血清中VEGF水平的高低似乎不能预测其能否从含bevacizumab的治疗方案中获益.     

喜泊芬对人食管癌Eca-109细胞的光动力效应

目的：探讨不同孵育浓度和不同光照剂量密度喜泊芬介导的光动力治疗（photodynamic therapy,PDT）对人食管癌细胞Eca-109体外效应的影响。方法：以不同浓度喜泊芬孵育食管癌Eca-109细胞,并分别在不同光照剂量密度（0、12、24、30J/cm2）下行PDT,24h后通过四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞生存率。结果：不同孵育浓度喜泊芬在4种不同光照剂量密度下食管癌Eca-109细胞生存率间均有显著差异（P〈0.01）。在同一光照剂量密度下,不同喜泊芬浓度的食管癌Eca-109细胞的生存率有显著差异（P〈0.01）,而同一喜泊芬孵育浓度下,不同光照剂量密度的食管癌Eca-109细胞的生存率有显著差异（P〈0.01）。结论：喜泊芬的不同孵育浓度和不同光照剂量密度对人食管癌Eca-109细胞体外PDT效应有显著影响。     

胃镜下支架置入治疗恶性食道狭窄

目的：观察经胃镜定位置入镍钛合金记忆金属支架治疗恶性食道狭窄的疗效及安全性。方法：在胃镜引导定位下,为36例食管癌引起的食道狭窄患者放置镍钛合金记忆金属支架。结果：36例患者放置支架后进食困难立即得到缓解,所有病例随访1～3月,支架无移住,管腔通畅,治疗过程未发生严重并发症。结论：胃镜引导下镍钛合金记忆金属支架置入治疗食管癌引起的食道狭窄,定位准确,安全有效。     

希罗达联合奥沙利铂治疗晚期结直肠癌的临床观察

目的评价希罗达联合奥沙利铂方案治疗晚期结直肠癌的疗效与毒副反应。方法25例晚期结直肠癌患者均采用希罗达联合奥沙利铂治疗，治疗方案为：希罗达片1250mg／m^2，每天2次，第1～14天口服，休息7天；奥沙利铂注射剂130mg／m^2，第1天静滴，维持2h。21天为1个疗程，每例患者至少化疗2个疗程。通过RECIST标准评价患者治疗后的疗效，通过WHO标准观察治疗过程中出现的不良反应。结果25例患者中可评价疗效：CR0例，PR12例，SD10例，PD3例，总有效率48%（12／25）。初治患者有效率100％（3／3），复治患者有效率41％（9／22）。主要毒副反应有手足综合征（40％，10／25）、皮肤色素沉着（68%，17／25）、厌食（40％，10／25）等，但症状较轻，均可耐受；未见明显胃肠道反应；血液学毒性较低，只有16％（4／25）的患者出现I度骨髓抑制。结论希罗达联合奥沙利铂方案用药方便，疗效肯定，副作用低，可广泛应用于晚期结直肠癌的辅助化疗，特别是老年人及门诊患者。     

TIP30基因表达对吉非替尼体内抑瘤作用的影响研究

目的 探讨TIP30基因的表达与吉非替尼体内抑瘤作用的相关性.方法 选取小鼠24只,随机分为实验组和对照组,每组12只.两组小鼠均经皮下种植肺癌细胞获得肿瘤模型,实验组通过沉默TIP30基因建立TIP30低表达模型,对照组裸鼠则不作任何处理,利用实时定量PCR和Western blot方法检测两组TIP30基因的表达情况.对两组小鼠未用吉非替尼10 mg/d进行处理,15d后观察两组小鼠的体内肿瘤抑制程度.结果 成功建立小鼠肺癌模型,实验组TIP30表达情况显著低于对照组,两组表达情况比较差异具有统计学意义（P＜0.01）.对两组小鼠利用吉非替尼进行处理后,在第5天两组的瘤体平均重量未见显著差异,但第7天及第15天实验组瘤体重量显著低于对照组（P＜0.05）,病理切片显示实验组肿瘤抑制效果明显强于对照组.结论 TIP30基因对吉非替尼的体内抑瘤作用具有促进作用.     

TIP30基因表达对吉非替尼体外抑瘤作用的影响研究

目的：探讨TIP30基因的表达对吉非替尼体外抑瘤的作用效果。方法：构建TIP30基因抑制的A549细胞,并采用靶向EGFR药物吉非替尼对TIP30基因有抑制和无抑制两组的细胞株进行处理。采用MTT法检测各组细胞生长抑制率和细胞生长情况。结果：成功构建TIP30基因抑制细胞,并在TIP30基因抑制的肺癌细胞（ TIP30＿Down ）和正常 TIP30细胞（ TIP30＿Normal ）两组均给予1μmoL/L的EGFR抑制剂吉非替尼后,TIP30＿Down细胞的生长速度明显慢于TIP30＿Normal细胞（ t＝7．21,P＜0．01）。观察5d后,TIP30＿Down组与TIP30＿Normal组肿瘤细胞抑制率分别为83．15％＆#177;3．28％和49．8％＆#177;4．63％,两组比较有统计学差异（t＝10．18,P＜0．01）。结论：TIP30基因上调可增加吉非替尼的体外抑瘤的敏感性,有望作为吉非替尼靶向治疗的预后指标。     

抗EGFR单抗对人结肠癌细胞化疗敏感性的影响作用研究

应用MTY法分别检测伊立替康（CPT-11）、奥沙利铂（L—OHP）、氟尿嘧啶（5-Fu）单药或与抗表皮生长因子受体（EGFR）单抗联合应用对人结肠癌细胞株Lovo体外增殖的抑制作用;金正均法计算不同药物联合时的q值,以确定药物的相互作用;应用流式细胞术检测不同处理方案对细胞凋亡率及细胞周期分布的影响。发现联合尼妥珠单抗（h—R3）或西妥昔单抗（C-225）均能显著提高CPT-11对Lovo细胞的细胞抑制率,诱导更多肿瘤细胞发生凋亡以及产生G0／G1期、G2／M期阻滞;h—R3与5-Fu联合具有类似的协同增效作用,而与L-OHP联合有药效相加的作用;C-225与L—OHP联合亦有增效作用,但与5-Fu联用时呈拮抗作用。认为抗EGFR单抗可提高多数化疗药物对结肠癌细胞的杀伤作用,其机制可能与诱导细胞凋亡及影响细胞周期分布有关。     

西妥昔单抗对耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞和NK细胞的双重免疫调节作用

目的：探讨西妥昔单抗(cetuximab)对耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2D配体（natural killer group 2 member D ligands,NKG2DLs）的表达及NK细胞分泌IFNγ的影响。方法：流式细胞术检测高、低表达ABCG2（ATPbinding cassette superfamily G member 2)的耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞（简称ABCG2lowCNE2/DDP细胞和ABCG2highCNE2/DDP细胞）表面EGFR的表达水平,以及西妥昔单抗处理前后两种CNE2/DDP细胞表面NKG2DLs的表达水平。西妥昔单抗处理前后的两种CNE2/DDP细胞分别与NK细胞共培养,ELISA检测上清中IFNγ的分泌水平,LDH释放法检测NK细胞对不同组CNE2/DDP靶细胞的杀伤。结果：ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞表面EGFR的表达率分别为（43.60±2.01）%和（47.20±207）%。西妥昔单抗上调ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞表面MICA、MICB、ULBP1和ULBP2的表达,但下调ABCG2highCNE2/DDP细胞表面ULBP3的表达。西妥昔单抗处理两种CNE2/DDP细胞后,与NK细胞的共培养体系中IFNγ的分泌水平明显上调（P<001）;西妥昔单抗增强两种CNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性（P<0.01）。结论：西妥昔单抗可上调耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达,间接刺激NK细胞分泌IFNγ,具有双重免疫调节作用。     

苹果酸舒尼替尼诱导高表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2的耐药鼻咽癌细胞高表达NKG2D配体

目的:探讨苹果酸舒尼替尼(sunitinib malate, SU11248)对高表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP(ABCG2high CNE2/DDP)表达NKG2D配体的诱导作用.方法:利用免疫磁珠技术分离ABCG2highCNE2/DDP细胞及同种异体反应性自然杀伤细胞(allo-reactive natural kill cell, Allo-NK),流式细胞技术检测分离后细胞的纯度及苹果酸舒尼替尼处理前后ABCG2highCNE2/DDP细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测苹果酸舒尼替尼处理前后ABCG2highCNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性.结果:ABCG2highCNE2/DDP细胞分离后ABCG2的表达率为(91.40±2.32)%,Allo-NK细胞分选后CD3-CD16 CD56 细胞的纯度达90%以上.经苹果酸舒尼替尼处理后,ABCG2highCNE2/DDP细胞的NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3的表达率由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±0.62)%、(11.10±3.15)%、(7.75±1.14)%分别上升到(89.12±4.56)%、(66.10±2.22)%、(67.56±4.19)%、(69.37±8.83)%、(63.28±3.31)%.在效靶比为10∶1、20∶1时,苹果酸舒尼替尼处理前后Allo-NK细胞对ABCG2highCNE2/DDP细胞的杀伤率分别为(15.32±13.86)%、(27.26±6.81) % 及(41.12±4.12)%、(57.25±2.37)%,处理后的杀伤率有明显的提高(F=15.58, P＝0.000).结论:苹果酸舒尼替尼通过诱导高表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),使ABCG2high CNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性明显增强.