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11.
突变特异性扩增系统方法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因C1024T及G392T 总被引:1,自引:0,他引:1
突变特异性扩增系统 (Amplifiedrefractorymutationsystem ,ARMS)法是用来检测葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (G6PD)基因已知点突变的简便、快速、准确的方法[1 ,2 ] 。杜传书等发现的中国人中的 6种点突变中 ,占比例较高的G1388A ( 2 7.8%)、G1376T( 2 5 .0 %) [3 ] 及A95G[4] 的ARMS方法已经建立[1 ,2 ] ,而占比例较低的C10 2 4T( 5 .6 %)的ARMS方法还未建立 ,G392T( 8.3%)的ARMS方法虽已建立 ,但未经测序证实。我们建立了这两种方法 ,并经测序证实 ,现报道如下。病例和方法1 病… 相似文献
12.
用WHO推荐的G6PD变异型鉴定法鉴定了一对孪生G6PD缺乏新生儿的变异型。发现所有检测生化学参数极为相似。检索了文献资料后确认为一新的G6PD变异型,定名为Gd(-)Shunde(顺德)。 相似文献
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本文从2例葡萄糖6磷酸脱氢酶变异型——台湾客家型[Gd(一)Taiwan-Hakka]患者基因组DNA中,回收经EcoRI完全酶解的3~5kb片段,与载体λgt10插入重组,用SMR10单菌种系统制备包装提取物,对重组的λgt10进行体外包装,构建成二个基因组基因丈库。用~(32)P标记的G6PD cDNA成功地从文库中初选出12个阳性克隆,挑选其中4个阳性克隆再次杂交予以证实,提取其中2个克隆DNA,经限制酶酶切电泳及斑点杂交鉴定,分离到该变异型基因的插入片段,并将其克隆到M13mp19噬菌体。在国内首次完成Gd(一)Taiwan—Hakka型部份基因克隆化分离与鉴定,为DNA序列分析寻找突变部位打下基础。 相似文献
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目的 探讨彩色B超(彩超)引导下局部尿激酶溶栓治疗下肢深静脉血栓效果.方法 25例下肢深静脉血栓患者,从惠肢行彩超引导下局部溶栓治疗.结果 治疗后经症状、体征、下肢彩色B超检查,痊愈11例(44%),有效12例(48%),总有效率92%.未发生出血征象.结论 彩超引导下局部溶栓治疗下肢深静脉血栓是一种疗效明显、安全、经济实惠的治疗方法 . 相似文献
18.
目的 研究脑脊液宏基因组测序(mNGS)与传统培养在不同病原中枢神经系统感染性疾病鉴别诊断中的差异性。方法 选取2017年6月-2022年6月中国人民解放军联勤保障部队第九二八医院收治的87例中枢神经系统疾病患者,以临床诊断标准将患者分成病毒性脑炎组(n=52)、结核性脑膜炎组(n=9)、化脓性脑膜炎组(n=21)和隐球菌性脑膜炎组(n=5)。所有患者均接受脑脊液mNGS和传统培养,计算、比较两种方式对不同病原体神经系统疾病的敏感度、特异度等诊断效能指标。结果 病毒性脑炎mNGS在Unique reads条数≥2,敏感度为76.92%,特异度为88.57%,传统培养敏感度为32.69%,特异度为74.29%; mNGS在发现结核分枝杆菌序列数>1时敏感度为55.56%,特异度为70.51%,传统培养敏感度为44.44%,特异度为69.23%;化脓性脑膜炎mNGS在Unique reads条数≥5,敏感度为71.43%,特异度为90.91%,传统培养敏感度为47.62%,特异度为65.15%; mNGS发现隐球菌DNA时敏感度为60.00%,特异度为84.15%,传统培养敏感度为4... 相似文献
19.
目的: 克隆人β地中海贫血IVSII654突变基因, 构建该致病基因的体外真核表达体系。为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法: 抽提β654纯合子患者DNA进行PCR扩增,将其克隆到pBGT51质粒中, 然后将人β珠蛋白基因座控制区(LCR)及β654基因亚克隆至真核稳定表达质粒pcDNA3.1+中。脂质体转染至小鼠红白血病细胞(MEL), DMSO诱导MEL细胞表达, 逆转录PCR检测人β654基因在MEL中的表达。结果: 成功构建了几乎真实模拟人体内β654基因调控的真核表达系统。结论: β654基因在MEL细胞中的表达情况同人体内β654基因的表达完全一致, 为该病的基因治疗研究提供了一个理想模型。 相似文献
20.
目的探讨血中同型半胱氨酸(HCY)水平及其代谢酶———亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性与脑血管狭窄的关系。方法采用回顾性病例对照研究的方法,纳入脑血管狭窄患者85例,其中单纯颅内动脉狭窄40例,单纯颅外动脉狭窄45例。选择同期年龄和性别匹配的无脑血管狭窄者65例作为对照组。采用荧光偏振免疫法和聚合酶链反应-限制片段长度多态性技术,测定和分析各组血浆HCY水平和MTHFR C677T基因多态性。结果①脑血管狭窄组患者血浆HCY水平中位数[11.00(8.05~15.00)μmol/L]高于对照组[8.40(5.50~10.95)μmol/L],差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,颅内动脉狭窄组[11.75(8.10~15.25)μmol/L]和颅外动脉狭窄组[9.00(8.00~14.05)μmol/L]HCY水平均升高(P<0.05)。②在脑血管狭窄组和对照组中,MTHFR C677T基因突变TT纯合子的HCY水平中位数分别为[16.00(11.93~17.30)μmol/L]、[12.90(8.90~14.05)μmol/L],高于CC无突变纯合子者的[9.00(8.00~12.80)μmol/L]、[8.60(5.10~11.05)μmol/L],P<0.05。③多因素Logistic回归分析显示,高HCY血症(OR=2.686,95%CI:1.051~6.869,P=0.039)、高血压(OR=2.431,95%CI:1.226~4.822,P=0.011)是脑血管狭窄的独立危险因素。MTHFR C677T基因型多态性不是脑血管狭窄的独立危险因素(P=0.909)。结论高同型半胱氨酸血症可能是脑血管狭窄的危险因素。MTHFR C677基因型突变是影响HCY水平的重要因素,但与脑血管狭窄无明确关系。 相似文献