结直肠癌中miR-21表达与临床病理因素及预后的关系

目的探讨结直肠癌组织中miR-21表达与临床病理因素及预后的关系。方法取59例结直肠癌组织标本及癌旁正常黏膜组织标本,采用茎环逆转录实时荧光定量PCR方法检测结直肠癌组织及癌旁正常黏膜组织中miR-21的相对表达量,并分析癌组织中miR-21表达与临床病理因素的关系。用Kaplan-meier法计算生存率,采用log-rank检验、Cox比例风险回归模型分析结直肠癌预后影响因素。结果结直肠癌组织中miR-21的相对表达量明显高于其癌旁正常黏膜组织（P＜0.05）。结直肠癌组织miR-21表达水平与肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期有关（均P＜0.05）;与性别、远处转移、分化程度、浸润深度和肿瘤位置无关（均P＞0.05）。远处转移、分化程度、miR-21表达水平是影响患者预后的独立危险因素（均P＜0.05）,其RR值及95%CI分别为5.053（1.395~5.787）、3.998（1.395~18.305）、3.837（1.266~11.631）。结论miR-21与结直肠癌患者预后和疾病进展密切相关。     

门静脉血K-ras和p53基因突变与胃癌肝转移的关系

目的探讨门静脉血K-ras、p53基因突变与胃癌肝转移的关系。方法应用PCR单链构象多态性分析技术,对胃癌患者的门静脉血、外周静脉血分别进行K-ras、p53基因检测,术后随访半年,了解肝转移情况。结果62例胃癌患者外周血和门静脉血中的p53和K-ras基因突变阳性率分别为8.06%、4.83%和38.71%、33.87%;有无肝转移者p53和K-ras基因突变阳性率分别为92.30%、76.92%和24.49%、22.45%;剖腹后探查前或胃癌探查后门静脉血p53和K-ras基因突变阳性率分别为38.71%、33.87%和56.45%、62.90%,上述两组指标之间相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论检测门静脉血K-ras、p53基因突变对预测胃癌肝转移,判断预后有重要意义。     

结直肠癌组织中p27基因甲基化与其临床病理的关系

Objective To investigate the relationship between p27 gene methylation and pathology of colorectal carcinoma. Methods p27 gene methylation promotor region and p27 protein expression were detected respectively by methylation specificity polymerase chain reaction and immunohistochemical staining SP in 106 cases of colorectal carcinoma and each adjacent normal mucous membrane tissue and 22 cases of colorectal adenoma tissue. Results The positive expression rate of p27 gene methylation was statistically different in colorectal carcinoma tissue compared with normal mucous membrane and colorectal adenoma tissue (P＜0.05). Their positive expression rate were 59.4% (63/106), 18.2% (4/22) and 3.8%(4/106) respectively in colorectal carcinoma tissue,colorectal adenoma and normal mucous membrane tissue (P ＜ 0. 05). p27 gene methylation in poorly differentiated group was significantly higher than that in welldifferentiated group (48.0% vs. 24. 7%, P ＜0. 05), in Dukes-A + B stage group was significantly lower than that in Dukes C + D stage group(20. 0% vs. 41.2%, P ＜ 0. 05 ), and it was higher in lymph nodes metastases group than that in lymph nodes negative group(41.5% vs. 23. 1%, P ＜0. 05), that in positive serosa infiltration group was higher than negative serosa infiltration group(32. 5% vs. 24. 1%, P ＞ 0. 05 ).Conclusions Methylated p27 gene protein expression in colorectal carcinoma was significantly higher than normal mucous membrane and colorectal adenoma tissue. The methylation rate of p27 gene in colorectal carcinoma was significantly associated with tumor differentiation, invasive depth, Dukes stage, lymph node metastasis.     

高频超声引导下8G麦默通微创旋切系统在临床触诊阴性乳腺良恶性病灶治疗中的应用价值

目的探讨麦默通微创旋切系统在临床触诊阴性乳腺良恶性病灶治疗中的应用价值。方法对68例共88处乳腺病灶行麦默通旋切术。结果所有临床触诊阴性病灶均被完整切除;病理提示良性病灶75处,恶性病灶13处,良恶性病灶在患者年龄及病灶数目、性质、边界、回声、分级指数、典型钙化特性方面存显著性差异;非良性病灶行二次手术后病理提示乳腺癌检出灵敏度83-3％（5／6）,特异度100％（7／7）,假阳性率0（0／7）,假阴性率16．7％（1／6）;术后无严重并发症发生,随访患者美观效果满意度96．2％（50／52）。结论麦默通微创旋切系统以便捷、安全、美观等特点成为治疗临床触诊阴性乳腺良性病灶的首选方法,同时对于乳腺良恶性病灶的鉴别有重要指导意义,但对于乳腺非良性病灶需增加旋切次数并行二次手术以降低乳腺癌漏诊率。     

大肠癌患者外周血CD_8和CD_(28)检测的临床意义

目的 探讨大肠癌患者外周血淋巴细胞表型CD_8、CD_(28)的变化及其临床意义.方法 应用CD_8、CD_(28)单克隆抗体,采用流式细胞仪技术,对50例大肠癌患者(大肠癌组)CD_8、CD_(28)进行测定,并与30例非肿瘤患者(对照组)进行比较.结果 大肠癌组CD_8的表达显著高于对照组[(32.24±8.38)%比(22.18±7.55)%](P<0.01);而CD_(28)、CD_8~+,CDf的表达低于对照组[(52.03±10.94)%比(60.60±7.98)%,12.18-I-4.28比16.38±4.94](P<0.01).大肠癌组Dukes分期D期患者CD_8~+/CD_(28)~+的表达明显低于Dukes分期B期患者(P<0.05),有淋巴结转移患者CD_(28)、CD_8~+/CD_(28)~+的表达低于无淋巴结转移患者(P<0.01),已浸润浆膜层患者CD_(28)、CD_8~+/CD_(28)~+的表达则低于未浸润浆膜层患者(P<0.01).结论 大肠癌患者CD_8、CD_(28)的表达与肿瘤的生物学行为密切相关.观察淋巴细胞表型CD_8、CD_(28)变化,对大肠癌患者的免疫状态及预后监测具有一定的参考价值.     

590例乳腺肿块术中冷冻切片诊断分析

目的探讨乳腺肿块冷冻切片的准确性及提高准确率的方法，进一步密切临床与病理的联系，以提高对冷冻切片的认识，降低误诊率。方法回顾对比分析近8．5年来术中590例乳腺肿块冷冻切片与术后石蜡切片的诊断结果。结果590例冷冻切片报告中，确诊586例，确诊率为99.32％；误诊4例，均为假阴性，误诊率为0．68％，其中2例是制片质量问题导致浸润性导管癌误诊为良性病变，另2例是因取材局限导致叶状囊肉瘤误诊为纤维腺瘤。结论冷冻取材的局限，病变形态的多样以及冷冻切片的质量是造成误诊和延期诊断的主要原因。只要熟悉乳腺病变诊断和鉴别诊断要点，加强外科与病理医师间的联系，乳腺肿块冷冻切片是一种准确性比较高，可靠性比较强的检查手段。     

胃癌患者门静脉血中p53和K-ras基因突变的检测及其临床意义

目的 检测胃癌患者门静脉血中p53和K-ras基因突变,探讨其与胃癌肝转移的关系.方法 应用PCR-SSCP技术检测62例胃癌手术患者门静脉血中p53和K-ras基因的突变率.结果 外周血和门静脉血中的p53和K-ras突变阳性率分别为8%、5%和39%、34%;有无肝转移p53和K-ras突变阳性率分别为92%、77%和24%、22%;剖腹后探查前或胃癌探查后门静脉血p53和K-ras突变阳性率分别为39%、34%和56%、63%,上述两组指标之间相比差异均有统计学意义（P＜0.05）,但与患者性别、年龄、肿瘤的分化程度之间无显著性相关（P＞0.05）.结论 门静脉血内微转移癌细胞的基因突变检测有助于判断胃癌临床分期,对预测胃癌肝内微小转移有一定的临床价值.     

Hsa_circ_0001946/miR-7/KLF4轴调控乳腺癌进展的研究

目的探讨环状RNAhsa_circ_0001946在乳腺癌组织中的表达情况及hsa_circ_0001946/miR-7/Kruppel样因子4（KLF4）轴调控乳腺癌细胞发生侵袭和转移的机制。方法收集2018年6月至2019年8月在温州医科大学附属第三医院切除的乳腺癌组织标本及其癌旁正常乳腺组织标本91例。采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌及其癌旁正常组织中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4mRNA表达情况及乳腺癌细胞株MCF-7中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）mRNA表达情况;采用细胞侵袭实验分析乳腺癌MCF-7细胞株的侵袭能力;采用Westernblot法检测乳腺癌细胞株MCF-7中E-cadherin及N-cadherin蛋白表达情况。结果与癌旁正常乳腺组织比较,乳腺癌组织中hsa_circ_0001946和KLF4mRNA表达水平均升高,miR-7表达水平下降（均P＜0.05）。与正常乳腺组织、乳腺导管原位癌组织比较,乳腺浸润性导管癌组织中hsa_circ_0001946mRNA表达水平升高（均P＜0.05）。分析82例乳腺浸润性导管癌患者发现,有淋巴结转移者hsa_circ_0001946mRNA表达水平高于无淋巴结转移者（P＜0.05）。Pearson相关显示,乳腺癌组织中hsa_circ_0001946mRNA的表达与miR-7的表达呈负相关（r=-0.418,P＜0.05）,miR-7的表达与KLF4mRNAmRNA的表达呈负相关（r=-0.340,P＜0.05）。与阴性对照组相比,转染sh-hsa_circ_0001946组MCF-7细胞中miR-7表达升高,KLF4mRNA表达下降（均P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染miR-7mimics组MCF-7细胞中KLF4mRNA表达下降（P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染sh-hsa_circ_0001946组侵袭细胞数减少（P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染KLF4siRNA组MCF-7细胞中E-cadherinmRNA及蛋白表达水平均升高,N-cadherinmRNA及蛋白表达水平均下降（均P＜0.05）。结论Hsa_circ_0001946在乳腺癌细胞中表达升高,可通过miR-7/KLF4调控轴使癌细胞发生上皮-间质转化,促进癌细胞的侵袭和转移。     

乌骨藤提取物通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制黑色素瘤细胞的活力并诱导细胞凋亡

目的:探究乌骨藤提取物(Marsdenia tenacissima extract,MTE)对黑色素瘤细胞活力及凋亡的作用及机制。方法:用不同浓度(0、50、100和200 mg/L) MTE处理小鼠皮肤黑色素瘤B16-F10细胞24 h或不同浓度MTE处理不同时间(0、24、48、72和96 h),MTT法检测细胞活力。流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞增殖、凋亡和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达,同时检测通路激动剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理细胞后p-PI3K及细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达。结果:根据预实验结果,选择MTE作用时间为72 h。MTE浓度为100 mg/L和200 mg/L时能明显抑制B16-F10细胞活力及增殖相关蛋白Ki67和PCNA的表达,并且还可诱导B16-F10细胞凋亡,提高凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白水平;同时,MTE还可显著降低p-PI3K、p-AKT和mTOR的蛋白水平;此外,激动剂IGF-1可明显减弱MTE抑制细胞活力及诱导细胞凋亡的作用。结论:MTE可通过下调PI3K/AKT/mTOR通路活性抑制黑色素瘤细胞活力,诱导细胞凋亡。     

PDCD4蛋白、Ki67和PCNA 在大肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨程序性死亡因子4(PDCD4)蛋白在正常黏膜组织、腺瘤组织及大肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,并分析在大肠癌组织中PDCD4蛋白的表达与PDCDmRNA及增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67 的关系.方法 采用qPCR技术和免疫组化SP 法分别检测43例大肠癌组织及其对应的正常黏膜组织中PDCD4 mRNA 及Ki67、PCNA 的表达水平;用免疫组化SP 法检测124 例大肠癌组织、61例正常黏膜组织以及32例腺瘤组织中PDCD4 蛋白的表达水平.结果 正常黏膜组织、腺瘤组织及大肠癌组织中PDCD4 蛋白表达的阳性率分别为90.16%、62.50%和33.87%,3 组间的差异有统计学意义(P＜0.05).PDCD4 蛋白的表达与肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移和临床分期有关(均P＜0.05);而与患者的年龄、肿瘤部位、肿瘤大小及有无远处转移无关(均P＞0.05).PDCD4蛋白的表达与增殖蛋白Ki67、PCNA的表达存在明显的负相关(均P＜0.05);而与PDCD4mRNA的表达无相关性(P ＞0.05).结论 PDCD4 蛋白表达水平下调提示大肠癌预后不良;在大肠癌组织中PDCD4蛋白表达缺失可促进大肠癌细胞增殖;与转录前水平相比,在转录后水平恢复PDCD4蛋白的表达可能是个更好的治疗大肠癌的策略.