白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562/AO_2细胞增殖和凋亡的影响

背景:对白血病患儿在白血病细胞获得耐药、抗凋亡特性的过程中机制的研究目前其少,多数研究集中在正常骨髓间充质干细胞和已建系的基质细胞,而未重视患儿骨髓间充质干细胞与自血病细胞之间的相互作用.目的:课题创新性提出白血病患儿骨髓间充质干细胞可能对白血病细胞株K562/AO_2生长增殖及凋亡产生影响的理论假设.设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2007-12/2008-08在广州医学院第一附属医院儿科实验室完成.材料:骨髓间充质干细胞来源于广州医学院第一附属医院住院的30例自血病患儿,其中急性淋巴细胞白血病患儿22例,急性粒细胞白血病8例,患儿家属对实验均签署知情同意书.K562/AO_2细胞株由天津血液病研究所提供.方法:Ficoll密度梯度法分离培养白血病患儿骨髓间充质干细胞.设立2组:K562/AO_2细胞组单独悬浮培养处于对数生长期的K562/AO_2细胞:K562/AO_2细胞+骨髓间充质干细胞共培养组在骨髓间充质干细胞贴壁呈融合状态时,加入1×10~8 L~(-1)处于对数生长期的K562/AO_2细胞,24 h后去除未黏附的K562/AO_2细胞.主要观察指标:白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562/AO_2细胞生长的影响,AnnexinV-FITC法检测阿霉素对K562/AO_2细胞凋亡的影响,流式细胞仪测定不同条件培养下的K562/AO_2细胞周期,Taqman-MGB探针实时荧光定量PCR检测不同条件培养下耐药基因mdr1的表达.结果:与单独悬浮培养的K562/AO_2细胞比较,K562/AO_2细胞+骨髓间充质干细胞共培养组的K562/AO_2细胞生长较为缓慢,无明显的对数生长期;早期凋亡细胞数明显减少(P＜0.05);处于G0-G1期的K562/AO_2细胞明显增多,S期细胞减少;K562/AO_2细胞mdr1耐药基因的表达无明显差异(P＞0.05).结论:体外细胞学实验结局证实,白血病患儿骨髓间充质干细胞诱导的K562/AO_2细胞耐药与mdr1基因无关,而是通过黏附作用改变K562/AO_2细胞周期,进而逃避药物的促凋亡作用.     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562/A02 细胞株耐药的影响

本研究探讨急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)对K562/A02细胞耐药性的影响及其机制。从白血病患儿骨髓中分离、培养并鉴定MSC;建立K562/A02细胞株与MSC共培养的体系,应用AnnexinV-FITC检测一定浓度的阿霉素(ADM)对不同培养条件下K562/A02细胞凋亡的影响;RT-PCR检测K562/A02细胞中的凋亡基因家族中bcl-2和bax基因;荧光定量PCR检测多药耐药基因mdr1浓度。结果表明,单独培养组白血病细胞早期凋亡率为(8.38±0.29)%,而黏附培养组为(1.97±0.11)%,差异具有统计学意义(p<0.05)。相对于单独悬浮培养的K562/A02细胞,黏附共培养的K562/A02细胞bcl-2基因表达明显增强,bcl-2/bax比值显著增高;K562/A02单独悬浮培养组、黏附共培养组细胞中mdr1的水平比较无统计学差异(p>0.05)。结论:白血病患儿MSC能够使白血病细胞逃避药物的促凋亡作用,K562/A02对阿霉素产生耐药性可能与黏附共培养后bcl-2基因表达增强有关,而与其本身含有的mdr1基因无关。     

科研促进课程建设的实践

在医学院校如何处理好教学、医疗、科研的关系始终是一个没有解决好的问题．我们教研室以科研工作和科研成果带动学术水平与教学水平的提高，促进课程建设工作，较好地解决这个问题，做到三者相互促进．通过近十年的实践表明，“出人才、出成果”是促进课程建设最有力的措施，也是提高教学质量的最有力保证．我们深深体会到科研促进课程建设工作的重要性和优越性，即是：通过科研实践培养了青年骨干，提高了师资素质，使优秀青年教师脱颖而出；利用科研设备和经费，加强和完善了教学条件建设；科研工作取得的成果，促进了教学水平和学术水平…     

儿童哮喘控制测试在儿童哮喘管理中的应用

目的:探讨儿童哮喘控制测试(Children Asthma Control Test,C-ACT)在儿童支气管哮喘管理中的作用。方法:选择2010年5月～2011年2月呼吸专科门诊就诊的初诊哮喘患儿50例,其中男23例,女27例;年龄5～11岁,平均(7.8±2.1)岁。于治疗前、治疗后1个月、3个月时进行肺功能检测,测定PEF%、FEV1%,并同时填写C-ACT。观察入选时和治疗1个月时、3个月结束时的C-ACT评分和肺功能的变化。结果:在治疗后1个月及3个月时,C-ACT评分及PEF%、FEV1%较治疗前均有明显提高,差异有统计学意义(P值均<0.01)。治疗后1个月时哮喘患儿完全控制28例(56%);治疗后3个月时,哮喘患儿完全控制42例(84%)。C-ACT评分与肺功能检查指标PEF%、FEV1%具有良好的相关性。结论:C-ACT评分具有简便、安全、有效的特点,值得推广。     

儿童急性淋巴细胞白血病诱导化疗费用及成本效果分析

目的：对儿童急性淋巴细胞白血病诱导化疗的成本及成本效果进行分析，探讨经济有效的治疗方法及降低成本的方法。方法：对34例急淋白血病患儿诱导化疗的两种方案进行回顾性分析评价，用药物经济学方法进行成本效果分析。结果：两化疗方案的成本费用、费用构成比、副作用发生率无统计学差异，与住院总费用相关最密切的前三位费用为药费、检查费、输血费；VDLP1持续完全缓解率为66．67％，VDLP2持续完全缓解率为81．25％。结论：药物经济学可为临床合理用药，优选治疗方案提供参考，使有限的卫生资源发挥更大社会效益。     

特发性肺含铁血黄素沉着症9例临床分析

目的：探讨小儿特发性肺含铁血黄素沉着症(IPH)的误诊原因、治疗及远期疗效。方法：通过对我院1998年6月-2002年6月收治的9例特发性肺含铁血黄素沉着症病例进行分析，并对其出院后进行调查及回访。结果：首诊误诊率100％，误诊原因为本病临床表现缺乏特异性或临床以贫血为主要表现。口服和局部吸入激素对近期和远期治疗有效。结论：对反复咳嗽、咯血或不明原因的中重度缺铁性贫血的患儿应警惕特发性肺含铁血黄素沉着症的可能。肾上腺糖皮质激素治疗本病有效，且用量要足疗程要长，以减少复发、肺间质纤维化，提高生存率。局部吸入表面激素临床有效且可以减少激素副作用，但需进一步研究和探讨。     

55例小儿肾脏病患者阴离子间隙临床分析

阴离子间隙（aniongap，AG）是指血清中未测定的阴离子与未测定的阳离子之差，它是由血清电解质经计算而导出。本文通过对肾脏疾病患者的AG分析判断机体内的电解质、酸碱平衡紊乱，在临床治疗上具有一定的实用价值。1资料与方法1．1一般资料：55例均为1994－1997年住院治疗的小儿肾脏病患儿，男37例，女18例。年龄2－10岁。急性肾小球肾炎2例，原发性肾病综合征26例，迁延型肾炎23例，亚临床型肾炎1例，乙肝相关性肾炎2例，IgA肾病1例。重度浮肿13例，轻-中度浮肿40例，无浮肿2例。1．2方法：与AG计算有关的全部实验，检查包括血清K+、N…     

急性肺损伤患儿氧交换指标动态监测的临床意义

目的　探讨急性肺损伤 (ALI)患儿的氧交换指标动态监测在临床的意义。方法　回顾性分析临床诊断ALI需呼吸支持的 33例患儿 ,根据其转归分为生存组和死亡组 ,分别在通气后 0 5h、2 4h、72h取动脉血做血气分析 ,并记录相同时点的吸入氧体积分数 (FiO2 ) ,以此计算不同时段的氧合指数 (PaO2 /FiO2 )、肺泡气 动脉血氧分压差 [P( A a)DO2 ]和动脉血氧分压 /肺泡氧分压(PaO2 /PAO2 )的数值。结果　生存组P(A a)DO2 在治疗 2 4h、72h后逐渐下降 ,与死亡组比较差异有显著性意义(P <0 0 5 ) ;PaO2 /FiO2 、PaO2 /PAO2 的数值变化在治疗 72h后才与死亡组比较差异有显著性 (2 4h ,P >0 0 5 ;72h ,P <0 0 5 )。PaO2 随治疗时间的推移 ,在生存组与死亡组间比较均无统计学意义 (P >0 0 5 )。提示PaO2 /FiO2 、PaO2 /PAO2 和P(A a)DO2 是对ALI早期治疗反应的敏感指标 ;PaO2 对预后的预警作用较为滞后。结论　在ALI呼吸支持患儿中 ,氧交换指标P(A a)DO2 、PaO2 /FiO2 和PaO2 /PAO2 更能反映肺损伤的程度 ,对预后的估计价值更大 ;动态监测氧交换指标可为临床预后的评估提供参考信息。     

间歇应用去铁胺降低重度珠蛋白生成障碍性贫血儿童铁负荷的研究

目的　观察去铁胺 (DF)对重度珠蛋白生成障碍性贫血 (β地中海贫血 ,β地贫 )患儿长期采用输血治疗后铁负荷过多的驱铁作用。方法　 16例确诊为 β地贫患儿 ,明确体内铁负荷过高时应用去铁胺治疗 ,共治疗12 4例次。每次治疗前后用放射免疫方法检测其血清铁 (SI)、铁蛋白 (SF)及尿SF水平 ,比较用药前后铁负荷变化。并观察DF治疗对肝肾功能的影响。结果　重型 β地贫患儿长期高量输血治疗后铁负荷明显增高 ,SI、SF分别为 33.6 9± 6 .72mmol/L、4 4 1.19± 5 4 .70 μg/L ,尿SF为 8.6 4± 6 .79μg/L(与对照组相比t =6 .173　P <0 .0 1)。 12 4例次DF治疗后与治疗前相比 ,尿铁蛋白排出量明显增加 ,血清SI、SF明显下降 ,SI 16 .6 6± 3.39mmol/L、SF 10 2 .34± 2 0 .4 8μg/L ,尿SF为 14 .15± 9.34μg/L(t =5 .5 98　P <0 .0 1)。肝肾功能无明显变化 (t=2 .132　P >0 .0 5 )。结论　间歇应用DF静脉滴注治疗铁负荷过多 ,驱铁效果肯定 ,安全 ,无明显毒副作用     

舒弗美治疗小儿哮喘的临床疗效观察

目的观察舒弗美治疗小儿支气管哮喘的疗效及其可能存在的副作用。方法30例支气管哮喘患儿，按每次5～8mg/kg，口服舒弗美，12小时1次。分别在治疗后第3,7,14天检测患儿的茶碱血药浓度及观察临床疗效。结果治疗第3天，茶碱的血药浓度(4.951±0.917)mg/L，临床症状评分减少(68.8±23.2)％；治疗第7天，茶碱浓度(6.764±1.102)mg/L，临床症状评分减少(91.2±12.4)％；治疗第14天，茶碱浓度为(6.861±0.996)mg/L，临床症状评分减少(99.3±3.7)％。观察中无-例出现不良反应。结论舒弗美能有效地控制支气管哮喘的发作，血药浓度平稳，具有安全、有效、不良反应少等优点。