艰难梭菌感染的预防及疫苗研究进展

艰难梭菌是抗生素相关性腹泻及伪膜性肠炎等医院获得性感染性疾病的主要病原菌。近些年高致病性BI/NAP1/027核糖体分型成为流行菌株,时常出现感染爆发流行,复发率及病死率呈上升趋势,造成极大的人力、财力、物力损失。因此,重视起艰难梭菌感控是必要的。疫苗研究是防治艰难梭菌的重要手段,国外研制艰难梭菌疫苗近20年,取得了一定进展。本文将对艰难梭菌预防及疫苗研究现状进行总结,期望能为临床医师和科研人员提供参考。     

幽门螺杆菌粘附素保守区蛋白的制备及其免疫原性、安全性和粘附作用的体外评价

目的通过基因工程技术制备幽门螺杆菌(Hp)保守区(AB)蛋白,并在体外探讨其安全性、免疫原性和黏附作用,以确定AB在卸疫苗研制中的应用价值.方法运用PCR技术从Hp总DNA中扩增出AB结构基因.装入pET-22b(+)载体进行序列及生物信息学分析,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,采用金属螯合亲和层析(MCAC)的方法纯化AB,免疫印迹法检测其抗原性;流式细胞术检测AB致T细胞表达FasL的作用,ELISA法测定Hp感染者血清中抗AB抗体,MTT法测定T细胞对AB的增殖反应,光镜计数法研究AB抗体对Hp与胃癌细胞粘附的影响.结果成功构建了AB的重组质粒pET-22b(+)/AB,序列分析显示获得了段588 bp的基因,完整的包含了粘附素C-端的7个保守区,Parker法和Welling法分析显示AB具有良好的抗原性。进一步应用INTERNETExPASY、NNPREDICT、ISREC等生物信息软件分析,发现其为膜孔素样结构,是跨膜区膜外区域的重要表位组成部分。在Genebank中BLAST分析了836767个蛋白序列,与其具有同源性者均为厅声外膜蛋白序列。蛋白电泳分析和凝胶扫描表明获得了高效表达AB的克隆株,其分子量为22.5kD,占菌体总蛋白的29.6％,其中可溶性表达占上清的21.9％,纯化后获得纯度达90％的重组蛋白AB,免疫印迹显示该蛋白可被AlpA兔抗血清抗体识别;体外安全性实验表明AB无明显调节T细胞表达FasL的作用;ELISA法共检测了55份血清,同时以RUT作为平行对照,两法的评价判断一致性程度的指标卡帕系数为0.76.同时,低剂量AB即可刺激Hp+PBL的增殖:AB抗血清能部分阻断Hp与胃癌细胞系的粘附,在光镜下表现为经抗AB兔血清预处理后,每细胞周围粘附的细菌数较免疫前兔血清预处理组显著减少(p<0.05).结论获得HeAB的基因工程蛋白产物,为Hp疫苗研制提供了一种新抗原,生物信息学分析显示其为良好的抗原成分;体外实验证实AB是安全的、具有免疫原性的Hp菌体成分,既可以刺激体液免疫,又能够提高细胞免疫,并已其抗体还可防止Hp与胃上皮细胞的粘附。     

幽门螺杆菌感染的免疫防治

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡的主要病因,与胃腺癌、B细胞淋巴瘤的发生亦密切相关,世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)已将该菌列为Ⅰ类致癌因子。现有的根除Hp的手段主要是联合应用抑酸剂及二或三种抗生素,但Hp感染的普遍性、耐药菌株的不断增加以及病人的低依从性等限制了抗菌疗法的成功使用,进行免疫防治研究十分迫切。已有许多学者对免疫接种防治Hp的可行性、免疫原及佐剂的选择、动物模型的建立以及免疫保护机制等进行了相当程度的探讨。本文就这一领域的进展情况作一综述。     

幽门螺杆菌粘附素基因hpaA的克隆及表达

通过基因工程技术获得具有良好免疫原性的重组Ｎ－乙酰神经氨酰乳糖结合原纤维样血凝素。方法利用ＰＣＲ技术从幽螺杆菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ，Ｈｐ）总ＤＮＡ中钓取ｈｐａＡ结构基因，克隆及序列分析后在大肠杆菌中进行高效表害，表达产物纯化后用酶联免疫吸附法检测其抗原性。     

降调日加用生长激素预处理在反复种植失败患者中的应用效果

目的 探讨降调日加用生长激素预处理在反复种植失败患者中的应用效果.方法 将138例反复种植失败的不孕患者,分为观察组88例和对照组50例.两组均接受黄体中期长方案促排卵和体外受精-胚胎移植(IVF-ET),仅观察组同时在降调日加用生长激素.比较观察组和对照组的IVF-ET相关临床数据、妊娠结局,观察组本周期和前一周期的...     

阿司匹林联合腺苷蛋氨酸治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的临床效果及对妊娠结局的影响分析

目的：观察研究阿司匹林联合腺苷蛋氨酸治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的临床效果及对妊娠结局的影响分析。方法选择2013年1月至2016年1月于我院就诊的妊娠期肝内胆汁淤积患者共84例。将所有患者随机分为观察组和对照组,42名对照组患者予以腺苷蛋氨酸治疗,42名观察组患者采用阿司匹林联合腺苷蛋氨酸治疗。结果观察组患者的总胆汁酸、总胆红素、ALT显著优于对照组患者,差异有统计学意义（P<0.05）,观察组瘙痒评分显著低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,观察组患者的羊水污染、早产、新生儿窒息比例显著低于对照组患者,差异有统计学意义（P<0.05）。结论在妊娠期肝内胆汁淤积患者治疗过程中应用阿司匹林联合腺苷蛋氨酸治疗,可显著优化患者生化指标,减缓瘙痒病症,改善妊娠结局,获得非常理想的治疗效果,值得在临床上大力推广。     

抗PML-RARα反义核酸对NB4细胞生长、细胞周期及细胞凋亡的影响 *

目的：研究能分泌人白细胞介素２的重组卡介苗（ｒＢＣＣ－ＩＬ－２）对小鼠腹腔巨噬细胞体外杀伤活性功能的改变,探讨ｒＢＣＧ－ＩＬ－２对宿主免疫功能的影响。方法：采用基因工程技术和电转化技术构建卡介苗,采用ＭＴＴ法测定小鼠腹腔巨噬细胞体外的杀伤活笥。结果：ｒＢＣＧ－ＩＬ－２组小鼠腹腔巨噬细胞杀伤尖性明显大于ｒＢＣＣ组和对照组,且巨噬细胞的杀伤活性在一周内达到最大。结论：ｒＢＣＣ－ＩＬ－２能提高巨噬细胞的     

大黄总蒽醌提取物对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨大黄总蒽醌提取物抗脑缺血再灌注损伤的作用机制,为开发大黄总蒽醌类药物预防治疗脑缺血再灌注损伤提供参考依据。方法将雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组、尼莫地平组,大黄总蒽醌提取物高、中、低剂量组,每组8只,造模前一周开始灌胃给药,假手术组与模型组给予等体积生理盐水。末次给药30 min后,建立大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,造模1.5 h再灌注24 h后,进行神经功能评分、脑指数、脑含水量、脑梗死体积的测定,使用ELISA试剂盒检测脑组织中超氧化歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及血清中白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)的含有量。结果大黄总蒽醌提取物能显著改善大鼠神经功能评分,降低脑指数、脑含水量,减小脑梗死面积(P0.05),能显著提高脑组织中SOD活性(P0.01),降低MDA、NO的水平(P0.01),同时还可以显著降低血清中IL-6、TNF、IL-1β的含有量(P0.01)。结论大黄总蒽醌提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定的保护及改善作用,其机制可能与抑制炎症反应和抗氧化相关。     

血液净化治疗流行性出血热合并急性肾衰竭15例临床分析

目的 分析和探讨血液净化治疗流行性出血热合并急性肾衰竭的疗效。方法 15例流行性出血热合并急性肾衰竭患者为研究对象,均行血液净化治疗。观察患者治疗结果,治疗前及治疗后第3、10天的血常规、肾功能、肝功能指标。结果 15例患者中,14例治愈出院,1例因多器官功能衰竭死亡。住院时间(17.50±8.11)d。治疗前、治疗后第3天、治疗后第10天,患者的白细胞计数(WBC)分别为(15.87±4.78)、(11.57±3.01)、(7.24±1.42)×10⁹/L,中性粒细胞百分比(NEUT%)分别为(72.84±11.54)%、(67.53±10.88)%、(60.76±11.59)%,血小板计数(PLT)分别为(60.73±31.31)、(111.27±43.80)、(186.6±61.71)×10⁹/L,C反应蛋白(CRP)分别为(50.89±22.39)、(26.93±18.19)、(4.48±3.16)mg/L。患者治疗前、治疗后第3天、治疗后第10天的WBC、NEUT%、PLT、CRP比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗...     

青年男女多部位深静脉血栓危险因素差异分析

目的分析青年男性与女性发生多部位深静脉血栓的危险因素,探讨男性与女性危险因素的差异。方法 262例深静脉血栓患者,根据性别分为男性组147例和女性组115例,比较2组血红蛋白C反应蛋白、同型半胱氨酸、血脂水平及凝血功能等临床资料,比较2组深静脉血栓发生部位、是否伴有肺栓塞及常见血栓危险因素的差异;采用多因素logistic回归分析青年男性和女性发生多部位深静脉血栓的影响因素。结果男性组红细胞计数[(4.77±0.78)×10¹²/L]、血红蛋白[(143.86±21.41)g/L]、血红蛋白≥160 g/L比率(20.4%)、纤维蛋白降解产物[7.90(4.35,22.65)ng/L]、白蛋白[(38.90±6.91)g/L]及血清C反应蛋白[10.62(3.36,29.50)mg/L]、乳酸脱氢酶[224.50(182.25,284.75)u/L]、同型半胱氨酸[13.80(10.80,18.95)mmol/L]水平均高于女性组[(4.08±0.54)×10¹²/L、(117.50±20.54)g/L、1.7%、6.50(3.24,16.0...