重组Lac-Z、反义c-myc腺病毒载体的增殖及鉴定

目的：建立重组反义c-myc腺病毒载体（Ad-AS-c-myc）、LacZ腺病毒（AD-Lac-Z）的增殖的方法。方法：对培养的293细胞转染重组反义c-myc、Lac-Z腺病毒载体,使重组反义c-myc、Lac-Z腺病毒载体在293细胞内大量复制,及时收集病变细胞,反复冻融以释放293细胞中的病毒载体,过滤除细胞碎片,利用倍比稀释法测定病毒载体滴度。PCR技术对扩增重组反义c-myc、Lac-Z腺病毒载体进行鉴定。结果：利用293细胞扩增重组腺病毒载体,获得的Ad-AS-c-myc滴度为：2.3×109pfu/ml;Ad-LacZ滴度为：1.2×1010pfu/ml。在Ad-LacZ可见在800bp出现一特异性PCR扩增条带,为腺病毒特异扩增带。Ad-AS-c-myc在800及608bp处出现两条特异扩增条带,分别为腺病毒及反义c-myc特异扩增条带。结论：对转染的293细胞冻融后收集重组腺病毒载体具有高效、可靠、简便、相对经济实用的优点,有推广价值。     

c-myb表达变化在造血定型、分化及造血相关基因表达中的作用

目的 通过基因打靶建立c-myb / 和c-myb /-胚胎干细胞(ES)模型,了解转录因子c-myb在造血定型和分化中的作用.方法 采用去除白血病抑制因子的甲基纤维素体外ES细胞诱导分化体系进行造血分化,收获c-myb / 和c-myb /-(表达55%的c-myb)胚胎体进行甲基纤维素克隆形成分析.运用实时定量PCR比较分析c-myb) / 和Pmyb /-造血分化过程的造血相关基因表达.结果 c-myb / 和c-myb /-ES细胞胚胎体形成相似,但c-myb /-组胚胎体体积小于c-myb / 组.两组红系克隆形成单位(CFU-E)克隆形成相似,但c-myb /-组CFU-E克隆小于c-myb / 组.两组红系爆式克隆形成单(BFU-E)均出现于第7天,高峰在第10天.两组巨噬系克隆形成单位(CFU-M)形成相似,但c-myb /-组CFU-M数目多于c-myb / 组.c-myb /-组粒-单系克隆形成单位(CFU-GM)形成数目少于c-myb / 组.PCR分析显示c-myb / 和c-myb /-组β-globin、ζ-globin、GATA 3,CD34、Lys、c-fms和c-mpl基因表达没有明显差异.结论 亚表达水平的c-myb可以满足祖细胞扩增的需要,但却影响其终末分化.亚表达水平c-myb影响前体细胞向红系和粒系的分化,但不影响巨噬细胞的分化.c-myb表达水平不影响β-globin、ζ-globin、GATA 3、CDB4、Lys、c-fms和c-mpl基因的表达.     

三氧化二砷诱导人宫颈癌细胞凋亡及bcl-2高表达对其影响

采用脂染素（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）介导的ＤＮＡ 转染,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹, ＭＴＴ和克隆形成实验,流式细胞术和细胞凋亡原位检测法探讨Ａｓ２Ｏ３ 对人宫颈癌ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞的生物学效应和ｂｃｌ－２ 高表达对这一效应的影响． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 处理的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞,存活率和克隆形成能力明显降低,细胞周期的Ｇ１ 期前有低于２ 倍体的凋亡峰,细胞被阻滞在Ｇ２／Ｍ 期,有细胞凋亡时出现的ＤＮＡ 断裂． 而Ａｓ２Ｏ３ 处理的ｂｃｌ－２ 高表达的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞存活率和克隆形成能力增加,凋亡率减少,Ｇ２／Ｍ 期阻滞程度显著降低． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 可诱导ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞凋亡,Ｇ２／Ｍ 期阻滞可能是其诱导凋亡的原因之一;ｂｃｌ－２ 高表达可能通过减轻Ｇ２／Ｍ 期阻滞的程度而部分阻止Ａｓ２Ｏ３ 诱导的细胞凋亡．     

宁波市江北区溺水“黑点图”受众使用效果评价

目的评估宁波市江北区溺水"黑点图"对流动儿童防溺水意识的干预效果。方法研究利用宁波市医疗急救中心收集的溺水事件地理信息制做溺水"黑点图"。采用多阶段抽样方法抽取380名流动儿童,向其展示"黑点图"8～10 min作为干预方式,并在干预前后分别对其进行自填问卷测试。结果干预前后,流动儿童对"认为溺水是宁波市一个严重的健康问题"、"认为在你周围有很多溺水危险区域"、"认为你接触溺水危险区域的可能性大"和"认为你会注意刻意回避那些溺水危险区域"等信念的持有率分别为26.6%vs 55.8%、21.6%vs 50.0%、12.1%vs 29.2%和81.6%vs 89.5%,改变均有统计学意义(P均0.01)。儿童对"黑点图"核心信息总接受率为79.5%,对画报整体平均评分为(30.9±4.7)分(满分为40分)。结论溺水"黑点图"能有效改善流动儿童防溺水相关信念,值得推广。     

宁波市六区初中生吸烟行为调查研究

近年来我国青少年的吸烟率呈现持续上升的趋势,且青少年开始吸烟年龄有前推的倾向[1].大部分吸烟者都是从青少年时期开始吸烟,而最后成为长期吸烟者,如何有效地预防和控制青少年吸烟,已经成为我国当前迫切需要解决的社会问题,这也是有效降低我国成年人总吸烟率的关键[2].为了解宁波市6区青少年吸烟行为现状和相关环境影响因素,笔者组织了本次调查.     

幽门螺杆菌感染及其根除治疗对血清胃泌素水平的影响

为了解幽门螺杆菌相关性胃炎及溃疡病与高胃泌素血症的关系，以及ＨＰ根除治疗对高胃泌素血症的影响，我们对９４例患者，进行空腹胃泌素测定，胃粘膜组织学及ＨＰ培养检查。应用胃病冲剂和三联疗法，进行治疗，疗程２８天。停药１月后重复上述检查。