新生大鼠脑缺氧缺血对脑组织谷氨酸及环核苷酸的影响

目的　研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)时谷氨酸 (Glu)和环核苷酸 (cAMP和cGMP)的代谢改变及意义。方法　选 7日龄Wistar新生大鼠 ,随机分为对照组和缺氧缺血组。采取结扎左侧颈总动脉并吸入低氧的混合气体制作HIBD动物模型。用氨基酸自动分析仪与放免法测定不同时间脑组织Glu、cAMP和cGMP含量。结果　脑缺氧缺血后即刻Glu(17.5 6± 5 .32mol/g　P <0 .0 1)和cAMP(15 .0 1± 3.80nmol/g　P<0 .0 5 )较对照组显著升高 ,随后逐渐下降 ,于 6 0～ 180min降至正常 ,cGMP则显著升高 (0 .88± 0 .19nmol/ g　P <0 .0 5 )。结论　新生大鼠HIBD时脑组织Glu、cAMP、cGMP含量发生变化 ,引起细胞兴奋性毒性和代谢改变是加重脑损害的重要因素     

L-肌肽预处理对小鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的探讨L-肌肽防治心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制,为缺血性心脏病的防治提供实验依据。方法健康昆明种小鼠24只,随机分成3组,每组8只;对照组腹腔注射生理盐水0.1 mL.10 g-1,每隔30 min注射1次,共3次;心肌缺血再灌注(MIR)组腹腔注射生理盐水0.1 mL.10 g-1,30 min后腹腔注射垂体后叶素(Pit)0.1 mL.10 g-1,间隔30 min后腹腔注射硝酸甘油(Nit)0.1 mL.10 g-1;L-肌肽预处理组腹腔注射L-肌肽0.1 mL.10 g-1,30 min后腹腔注射Pit 0.1 mL.10 g-1,间隔30 min后腹腔注射Nit0.1 mL.10 g-1。观察3组小鼠心率变化,检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、心肌组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果3组小鼠注射Pit前心率比较差别无统计学意义(P>0.05);注射Pit后各时点MIR组心率明显低于对照组(P<0.01),L-肌肽预处理组各时点心率明显高于MIR组(P<0.01);与对照组相比,MIR组小鼠血清LDH含量明显升高(P<0.01),心肌组织中SOD活性降低(P<0.01),而MDA水平升高(P<0.01);与MIR组比较,L-肌肽预处理组小鼠血清中LDH的含量心肌组织中的MDA水平显著降低(P<0.01),心肌组织中的SOD活性明显升高(P<0.01)。结论L-肌肽对缺血再灌注心肌具有保护作用,其作用机制可能与抑制脂质过氧化反应,增强其抗氧化能力有关。     

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

背景水飞蓟宾(silybin)具有抗自由基活性、抗脂质过氧化作用和抗脂氧酶作用、极低的毒性,但由于其人体生物利用度低,故影响其疗效.水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(Silybin-phosphatidylcholine compound,SPC)具有较好的生物利用度,并且SPC中所含磷脂酰胆碱也具有抗自由基活性、抗脂质过氧化作用,理论上可以认为SPC具有更好的药理作用.目的了解水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.设计完全随机设计,对照实验研究.地点和材料所有研究工作均在新乡医学院药物研究室进行.水飞蓟宾(Silybin,含量98%),辽宁盘锦第三制药厂提供;水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC,含量＞95%),本室合成;丙二醛(MDA)试剂盒,南京建成生物工程研究所提供.仪器SHIMADZU 2550紫外-可见光分光光度计,武汉科学仪器厂DL-6低温离心机.实验动物有新乡医学院动物中心提供.干预各组受试大鼠给与供试样品灌胃;灌胃容积为0.5 mL/100 g.将SPC和Silybin分别悬浮于5 g/L羧甲基纤维素钠(CMC)溶液中;①伪手术组和②单纯脑缺血-再灌注模型组(单纯模型组)2次/d给与5 g/LCMC灌胃.③SPC-1组每日2次给与SPC 5 mg/100g(5 g/L CMC悬浮液)灌胃.④SPC-2组2次/d次给与SPC 10mg/100g(5 g/L CMC悬浮液)灌胃.⑤Silybin组每日2次给与给与Silybin 10 mg/100g(5 g/LCMC悬浮液)灌胃.于第6次灌胃(第3 d)后2 h对各组大鼠进行手术.手术在100 g/L乌拉坦(125 mg/100g)腹腔注射麻醉下,沿颈部正中切口,小心钝性分离并暴露气管和双侧颈总动脉,用无损伤小动脉夹夹闭双侧颈总动脉和迷走神经,造成脑不完全缺血,60 min后放开动脉夹,再灌注6 h后,迅速取血、并断头处死取脑,迅速检测.伪手术组不夹闭颈总动脉.各项操作均由本研究室有经验实验师完成.主要观察指标对比观察水飞蓟宾和两种剂量的水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)对大鼠脑缺血再灌注损伤模型脑组织含水量、病理学改变、血浆丙二醛(MDA)含量的影响.结果①除伪手术组外,各组受试大鼠均出现脑水肿改变.单纯模型组大鼠脑组织表面肿胀,蛛网膜血管增粗,可见散在小出血点;光镜下可见细胞外间隙增大,毛细血管基底膜疏松,内皮细胞肿胀、饮泡扩大、胞浆疏松、核淡染;神经细胞和胶质细胞肿胀、胞浆出现少量空腔小泡,细胞器轻度扩张、染色变浅.SPC-1组、SPC-2组和Silybin组大鼠脑组织肉眼观察病变似单纯模型组,唯小出血点少见;光镜下细胞肿胀和细胞外间隙增大较轻,胞浆内空泡较少,SPC-2组细胞器未见扩张、核染色和伪手术组相似.②受试各组大鼠脑组织含水量存在差异伪手术组(76.53±0.71)低于单纯模型组(80.90±0.62)、SPC-1组(79.35±0.32)、SPC-2组(77.63±0.68)和Silybin组78.81±0.57(t检验均P＜0.05).单纯模型组明显高于SPC-1组、SPC-2组和Silybin组(P＜0.01).SPC-1组类似于Silybin组(P＞0.05),而明显高于SPC-2组(P＜0.01).各组受试大鼠血浆MDA含量也存在明显差异伪手术组低于单纯模型组、SPC-1组、SPC-2组和Silybin组;单纯模型组明显高于SPC-1组、SPC-2组和Silybin组(均P＜0.01);SPC-1组类似于Silybin组(P＞0.05),而明显高于SPC-2组(P＜0.01).结论水飞蓟宾和水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对大鼠脑缺血-再灌注损伤均有保护作用,但不能完全阻断脑缺血-再灌注损伤;水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物作用优于水飞蓟宾,并在一定范围内显示出量-效关系.     

流式细胞术免疫分型在急性白血病诊断中的应用

目的 评价流式细胞术免疫分型在急性白血病(AL)诊断及治疗中的意义.方法 对本院2002年1月-2006年12月收治的46例AL患儿进行免疫学分析,取患者肝素抗凝骨髓或静脉血2 mL,采用FACSCan型流式细胞仪进行测定.用CD45/侧向角光散射(SSC)设门分析R2内细胞,根据细胞CD45的抗原表达及细胞颗粒表达程度区分各种细胞及异常细胞群.阳性细胞≥20%为阳性.结果 46例患者中,有2例形态学误诊被免疫分型纠正.形态学不典型无法准确判断者3例,经免疫学检查确诊为急性杂合细胞白血病.32例急性髓性白血病10例(31.25%)伴淋系抗原表达;11例急性淋巴细胞白血病3例(27.27%)伴髓系抗原表达.结论 流式细胞术免疫分型可提高AL诊断的准确性,有利于患者进行个体化治疗及预后的判断.     

线粒体与心肌缺血-再灌注损伤

目的　探讨线粒体的改变与心肌缺血-再灌注损伤(IR)的关系。方法　查阅近年来国内外资料并进行分析、整理、总结。结果　心肌缺血-再灌注时能量耗竭、自由基形成、钙超载、细胞凋亡等过程中线粒体发挥重要的作用。结论　改善线粒体功能在防治心肌缺血-再灌注损伤中具有重要的意义。     

微量血真假胆碱酯酶活性定量的研究

血液胆碱酯酶（ChES）可分为存在于红细胞膜上的真性胆碱酯酶（AChE）和存在于血清中的假性胆碱酯酶（PChE），两者活性之和为总胆碱酯酶（TChE）。早在50年代，胆碱酯酶活力测定就开始应用于急慢性有机磷中毒的诊断［'1，现在仍广泛用于环境检测［'］、法医学鉴定、毒物分析［     

玉屏风散提取液对小鼠脾淋巴细胞增殖及转化的影响

目的研究玉屏风散提取液对小鼠脾淋巴细胞增殖、转化的影响。方法分别制备玉屏风散水煎液、玉屏风散蒸馏水超声提取液、玉屏风散无水乙醇超声提取液和玉屏风散乙酸乙酯超声提取液。分离健康昆明种小鼠原代脾淋巴细胞进行体外培养,培养基中分别加入不同剂量上述药液使终末浓度达到1.67 mg.mL-1、3.33 mg.mL-1、8.33 mg.mL-1、16.67 mg.mL-1(折合生药)进行细胞培养,以0 mg.mL-1组为对照组。培养72 h后加入2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐(WST-8)用酶标法分别检测4种玉屏风散提取液对脾淋巴细胞增殖和刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞转化的影响。结果与对照组相比,玉屏风散(1.67 mg.mL-1、3.33 mg.mL-1、8.33 mg.mL-1、16.67 mg.mL-1)可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖和ConA诱导的脾淋巴细胞转化(P<0.01)。除1.67 mg.mL-1玉屏风散乙酸乙酯超声提取液外,其他剂量的玉屏风散超声提取液促进小鼠脾淋巴细胞增殖和ConA诱导的脾淋巴细胞转化的效果均低于同剂量组的玉屏风散水煎液(P<0.05)。结论玉屏风散可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖和ConA诱导的脾淋巴细胞转化,但玉屏风散的超声提取条件需进一步摸索。     

水飞蓟宾—磷脂酰胆碱复合物对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的探讨水飞蓟宾—磷脂酰胆碱复合物(SPC)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法SD大鼠50只,适应性喂养1周后,随机选10只作为对照组,其余40只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)60 mg.kg-1,72 h后测空腹血糖,将血糖值>16.7 mmol.L-1的大鼠33只随机分为模型组、SPC高剂量组和SPC低剂量组,每组11只,对照组和模型组每日灌胃质量分数1%的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)混悬液,SPC高、低剂量组分别灌胃给予SPC(用质量分数1%CMC-Na配成混悬液)300 mg.kg-1、150 mg.kg-1,连续12周,第12周末称体质量、心脏穿刺取血,分离血清检测血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、血清果糖胺(FMN),同时取左肾测肾系数,取右肾测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和晚期糖基化终末产物(AGEs)。结果与对照组比较,模型组大鼠体质量明显下降,肾脏系数明显升高(P<0.001);SPC各剂量组与模型组比较体质量明显升高,肾脏系数明显下降(P<0.05);与对照组比较,模型组大鼠血清FMN、Cr、BUN及肾组织中的AGEs值、MDA值明显升高,SOD活力明显下降(P<0.001);SPC各剂量组与模型组比较,血清中的FMN、Crea、BUN及肾组织中的AGEs值、MDA值均明显下降(P<0.05),SOD活力明显升高(P<0.05)。结论SPC对糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用。     

水飞蓟宾-卵磷脂复合物红外光谱和磷核磁共振波谱特征

目的确定水飞蓟宾-卵磷脂复合物(SLC)中水飞蓟宾与卵磷脂之间是以共价键还是以其他次级键结合.方法应用红外光谱、磷核磁共振波谱方法对本室合成的水飞蓟宾-卵磷脂复合物进行检测分析.结果水飞蓟宾-卵磷脂复合物具有水飞蓟宾和卵磷脂的红外光谱特征,其磷核磁共振波谱显示水飞蓟宾和卵磷脂间以非共价键结合.结论水飞蓟宾-卵磷脂是以非共价键结合,未形成新的化合物,二者自身化学性质在体内不会改变.     

新生儿缺氧缺血性脑病儿血清电解质的变化

新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）可引起多脏器功能损害及电解质紊乱。现将我们1995年1月～1997年12月收治的42例HIE的血清电解质改变报告如下。临床资料一、一般资料42例中男27例，女15例。年龄为生后1h～72h。其中早产儿11例、HIE的诊断均依据1989年济南会议标准［1]。临床分度：