C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生物学特性及饲养层制备

背景：昆明小鼠胚胎成纤维细胞是目前最常用的饲养层细胞,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层的研究鲜有报道。目的：体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,制备饲养层,力求扩大小鼠胚胎成纤维细胞的来源。方法：用不同浓度胰蛋白酶分步消化法体外分离和培养C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞,观察其生物学特性,研究其生长规律,并制备小鼠胚胎成纤维细胞饲养层,检测干细胞在所制备饲养层上的生长状态。结果与结论：不同浓度胰蛋白酶分步消化法制备的C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞生长状态好,获得的成纤维细胞数量多,增殖活跃。在细胞冻存后1,2周、1,3,6个月内复苏的细胞存活率差异无显著性意义。C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞在第2-5代增殖旺盛,第6代以后细胞增殖出现明显下降。种植到培养皿上的C57BL/6小鼠饲养层细胞在种植后3 d内活力高,种植4 d以后细胞活力急剧下降。所以C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞来源的饲养层的最佳使用时间为灭活后3 d内,C57BL/6小鼠胚胎成纤维细胞饲养层和昆明小鼠胚胎成纤维细胞饲养层一样,能很好地支持胚胎干细胞及诱导多能干细胞生长。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

双色FISH检测人精子染色体非整倍体方法的建立

目的　建立用双色FISH检测人精子染色体非整倍体的方法。方法　采用双色荧光原位杂交 (FISH)方法取适量精子标本用EDTA/PBS处理 ,然后用二硫苏糖醇 (DTT) ,使精子去凝集。固定后滴片 ,然后与双色荧光直接标记探针杂交。结果　在OLYMPUS荧光显微镜下可以清楚看到精子头部的蓝色杂交信号 ,头部有 1个绿色荧光杂交信号的精子为X染色体精子 (X精子 ) ,有 1个红色荧光杂交信号的精子为Y染色体精子 (Y精子 )。精子头部有 2个荧光杂交信号的精子为染色体数目异常精子。结论　双色荧光原位杂交 (FISH)方法可以用于测定人精子染色体非整倍体率的变化。     

植入前诊断中胚胎活检的动物实验研究

目的以小鼠胚胎为材料进行植入前胚胎活检的研究.方法通过输卵管冲洗,获得4～8细胞期胚胎,用"一"字机械法、化学法和激光法分别对4、8细胞的胚胎进行活检,观察其囊胚形成及孵出情况并进行比较.结果 "一"字机械法、化学法、激光法胚胎活检后胚胎的囊胚形成率、囊胚孵出率与未活检对照组比较无显著性差异(P>0.05). "一"字机械法与化学法、激光法的囊胚形成率有显著性差异(P<0.05)、囊胚孵出率无显著性差异(P>0.05).化学法与激光法的囊胚形成率、囊胚孵出率均无显著性差异(P>0.05).logistic回归分析表明:细胞数越多越有利于胚胎进一步发育.结论用"一"字机械法进行单个卵裂球活检,不影响胚胎的进一步发育,是一种较好的胚胎活检方法.     

护理干预运用在泌尿外科医院感染的影响分析及效果

目的：探讨综合护理干预在泌尿外科医院感染的影响分析及效果。方法：将该院泌尿外科收治的手术治疗患者作为本文研究对象，随机将患者分为两组，两组采用不同护理模式，统计分析感染发生部位、发生原因及病原菌分布，比较两组医院感染发生率。结果：医院感染发生部位中以泌尿系统及肺部感染为主，感染患者中共检出34株病原菌，其中以金黄色葡萄球菌及肺炎克雷伯菌为主。观察组患者医院感染发生率明显低于对照组（P ＜0.05）。结论：泌尿外科发生医院感染的主要部位为泌尿系统及肺部，而认知不足及手术室布局不合理是感染的主要原因，综合护理干预可针对上述危险因素介入有效预防措施，从而显著降低院内感染发生率。     

广东汉族人群细胞因子基因多态性研究

目的　探讨细胞因子基因多态性分布。方法　采用PCR -SSP对 5 8名随机人群的肿瘤坏死因子、转化生长因子、IL - 6、IL - 10、干扰素等细胞因子分别作基因多态性研究。结果　肿瘤坏死因子三个基因型频率分别为 0 4 31、0 4 31、0 138,等位基因频率G =0 6 4 6、A =0 35 4 ;转化生长因子九个基因型频率分别是 0 0 6 9、0 0 5 2、0 172、0 0 17、0 190、0 190、0 0 34、0 0 6 9、0 2 0 7,等位基因频率T =0 5 0 9、C =0 4 91、C =0 2 76、G =0 72 4 ;IL - 6三个基因型频率分别是 0 2 0 4、0 6 38、0 15 5 ,等位基因频率C =0 2 5 9、G =0 74 1;IL - 10六个基因型频率分别是 0 0 86、0 10 3、0 15 5、0 0 6 9、0 2 76、0 310 ,等位基因频率GCC =0 2 16、ACC =0 2 5 9、ATA =0 5 2 5 ;干扰素三个基因型频率分别是 0 5 5 1、0 310、0 138,等位基因频率A =0 70 7、T =0 2 93。结论　本组数据对细胞因子基因多态性研究有助于从分子水平去认识细胞因子在机体免疫调节的重要作用 ,对临床上某些疾病发病机理的研究、诊断和防治提供有力的依据。     

胚胎种植前诊断中胚胎活检的动物实验研究

目的 :以小鼠胚胎为材料进行种植前遗传学诊断 (preimplantationgeneticdiagnosis ,PGD)胚胎活检 (Biop sy)的临床前研究。方法 :通过输卵管冲洗 ,获得 4～ 8细胞期胚胎 ,用机械法分别对 4、8细胞的胚胎进行活检 ,然后继续培养 ,观察其囊胚形成及孵出情况并进行比较。结果 :活检胚胎的囊胚形成率 ( 4细胞期 78 8% ,n =6 6 ;8细胞99 0 % ,n =10 0 )、囊胚孵出率 ( 4细胞期 84 6 % ,n =5 2 ;8细胞 94 9% ,n =99)与未活检对照组比较差异无显著意义(P >0 0 5 )。结论 :在小鼠胚胎 4细胞或 8细胞期进行单个卵裂球活检 ,不影响胚胎的进一步发育。机械法是一种较好的胚胎活检方法。     

五色荧光原位杂交技术的建立以及在种植前诊断中的应用探索

目的 :建立五色荧光原位杂交技术在外周血、羊水及单个胚胎细胞样本中的实验方法 ,探索其在种植前诊断中的应用。方法 :取外周血淋巴细胞、羊水细胞和不适于胚胎移植及冷藏的受精胚胎细胞分别制片 ,用五色荧光标记的探针进行原位杂交 ,用荧光显微镜观察。结果 :获得稳定可行的各类标本的实验方法。结论 :应用五色荧光原位杂交技术可对染色体进行快速准确的诊断 ,并可应用于产前诊断和胚胎种植前诊断。     

开展优质护理服务示范病房在泌尿外科的实施和体会

目的：探讨优质护理服务示范病房在泌尿外科中的应用效果。方法：按照是否开展优质护理服务示范病房活动,将该院泌尿外科收治的患者分为观察组和对照组,对照组为2014年1－12月收治的61例患者,此期间未开展优质护理服务示范病房,观察组为2015年1～12月收治的64例患者,此期间开展了优质护理服务示范病房,比较两组医患满意度、患者健康知识知晓率、生活质量及并发症发生率。结果：观察组医患满意度及患者健康知识知晓率均高于对照组（P＜0.05）。观察组患者生活质量评分明显高于对照组,而并发症发生率则低于对照组（P＜0.05）。结论：优质护理示范病房能有效提高患者生活质量,降低术后并发症发生率,在泌尿外科临床中具有重要应用价值。