HPLC-ELSD测定培植牛黄中主要胆汁酸类成分的研究

目的 建立适用于对培植牛黄进行质量评价与控制的HPLC-ELSD测定其中主要胆汁酸类成分的方法.方法 使用Agilent SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;柱温为35℃,乙腈与10 mmol·L-1乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1;ELSD漂移管温度为105℃,氮...     

赵凤林运用温阳法治颈动脉粥样硬化经验

<正>颈动脉粥样硬化属中医"脉积"、"脉痹"、"眩晕"、"胸痹"等范畴。为本虚标实之证,本虚为气虚、阳虚、阴虚,标实为血瘀、痰浊、气滞、毒浊、湿热[1]。病位在脉,涉及心、肝、脾、肾[2]。治法主要有活血化瘀,理气健脾,化痰消浊,解毒,补肾等[1],证型主要有痰浊中阻型,气滞血瘀型,肝肾亏虚型[3]。赵凤林主任中医师认为颈动脉粥样硬化往往是出现头晕头痛、心悸、胸闷等症状时检查发现,此时已有痰或瘀或湿结于颈部或心脉阻塞血管,脉道不利。因此,治疗须或化痰、或化瘀,或祛湿、或温心阳,或健脾阳,或补肾阳。     

局灶节段性肾小球硬化：推动规范治疗，改善长期预后

成人局灶节段性肾小球硬化（FSGS）的治疗已取得长足进步。然而,FSGS患者临床表现及预后异质性较大,如何正确选择治疗方案,已成为临床医师面临的桎梏。《成人局灶节段性肾小球硬化诊治专家共识》的出台将推动临床诊治规范化,改善患者长期预后。     

靶向甲型流感病毒N1亚型神经氨酸酶抗体的制备及鉴定

目的制备1株靶向甲型流感病毒N1亚型神经氨酸酶(neuraminidase, NA)的功能性抗体FNA1, 并对其进行鉴定。方法依据单链抗体(single-chain antibody fragment, scFv)序列信息, 合成FNA1重链以及轻链可变区序列, 连入抗体哺乳细胞表达载体pFRT-IgG1κ, 构建重组表达质粒pFRT-IgG1κ-FNA1。利用瞬时高效表达系统ExpiCHO以及亲和纯化技术获取抗体蛋白FNA1。ELISA检测FNA1与甲型流感病毒N1亚型NA抗原的结合, 流式细胞术分析FNA1与细胞膜表面表达N1亚型NA抗原的结合。通过抗体抑制NA蛋白活性试验检测抗体FNA1的体外功能活性。结果蛋白质电泳结果显示制备获取了高纯度FNA1。FNA1特异性识别结合N1亚型的NA抗原, 且呈浓度依赖效应。FNA1能通过结合细胞膜表面表达的N1亚型NA蛋白, 有效阻断细胞膜表面的NA活性, 从而抑制包装的假病毒从细胞表面释放, 继而抑制进一步的靶细胞感染。结论获得1株具有体外功能活性的靶向甲型流感病毒N1亚型NA蛋白的抗体FNA1。     

法布里病83例临床病理特点分析

目的了解法布里病(Fabry病)的临床病理特点。方法回顾性分析上海交通大学医学院附属瑞金医院2002年至2013年6月诊断收集的来自62个Fabry病家系83例Fabry病患者的临床、实验室及肾脏病理资料。结果83例患者中,男59例,女24例;平均年龄(33.1±12.9)岁,其中男(30.1±10.7)岁,女(40.6±14.9)岁。出现首发症状年龄为(18.1±14.5)岁,男性(16.1±13.6岁)早于女性(23.1±15.7岁),出现症状至诊断间隔时间分别为1~50年不等,平均(14.8±10.4)年。肢端疼痛为最常见的首发症状,其次为少汗、肾脏损害,经典型均以肢端疼痛和少汗为首发症状,迟发型首发症状多样。最常见临床症状为眼科病变,达79.5%,此后依次为肾脏损害74.7%、肢端疼痛67.5%、心脏损害56.3%、少汗51.8%、脑血管异常44.1%、听力下降40.6%,皮肤血管角质瘤36.1%、高血压34.9%、消化道症状22.9%。男性、经典型的临床表现分别较女性、迟发型重。40%的肾组织标本可见IgA沉积,易与原发性IgA肾病混淆。结论 Fabry病发病早,临床表现多样,累及全身多个器官,不同性别临床表现存在很大差异,仍存在漏误诊现象。肾脏病理检查具有重要的诊断意义,需保证电镜组织,以减少漏误诊。     

胶原Ⅲ肾小球病4例家系分析

目的探讨胶原Ⅲ肾小球病的临床病理表现、遗传特点及预后特征。方法回顾性分析2003—2013年上海交通大学医学院附属瑞金医院经过病理确诊为胶原Ⅲ肾小球病4例患者的临床表现、实验室检查及家系调查结果、病理特征及治疗和随访情况。结果入选4例患者为青年期起病(22~36岁),男性2例,女性2例。4例患者分别来自3个家庭,其中2例男性患者为兄弟(家庭1),其父母为近亲婚配;另2例女性患者中,其中1例患者父母也为近亲婚配(家庭2),另1例女性患者家庭中无近亲婚配史(家庭3)。所有患者均以水肿、大量蛋白尿为首发症状,3例伴有高血压,血尿不明显,起病时两兄弟均已出现不同程度的肾功能不全,另2例女性患者起病及随访期间肾功能未出现明显受累。2例男性患者合并左心室肥厚。家庭1包括2例患者在内的部分家庭成员血清胶原Ⅲ前肽显著升高,家庭2和3中则以血清透明质酸升高为特点。光镜下肾小球体积均增大,系膜区增宽,肾小球基膜弥漫增厚。家庭3的女性患者免疫荧光皆为阳性,其余3例患者免疫荧光IgA、IgG、IgM、C3、C4、Clq、Fn均阴性。所有患者胶原Ⅲ染色均为阳性。电镜显示肾小球基膜弥漫增厚,肾小球基膜内及系膜区可见大量平行排列成束的胶原纤维沉积(纤维直径60~100 nm)。家庭1中两兄弟疾病进展快,发病3年左右进入ESRD,其中弟弟曾给予激素治疗但效果差,哥哥未经正规治疗,发生ESRD 2年后死亡。1例女性患者(家庭2)予以血管紧张素转换酶抑制剂(ARB)治疗,另1例(家庭3)给予激素联合免疫抑制剂治疗,两者尿蛋白、肾功能均未见明显改善。结论水肿、大量蛋白尿、高血压及进行性肾功能衰竭是胶原Ⅲ肾小球病的主要临床特征,诊断主要依靠肾组织胶原Ⅲ免疫荧光检测及电镜,遗传方式符合常染色体隐性遗传。激素和(或)免疫抑制剂治疗反应差,预后不佳。     

系统性红斑狼疮并发感染的危险因素临床特点及早期诊断

感染是影响系统性红斑狼疮(SLE)患者病死率的重要因素之一,故早期诊断感染并发症能显著改善SLE患者预后。血清C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)有助于鉴别SLE并发感染和SLE活动,血清KL-6有助于鉴别SLE伴发感染和SLE累及肺脏。SLE合并感染的病原体除了最多见的细菌感染外,病毒和真菌感染近几年有上升趋势,需要引起足够重视。     

转化生长因子-β刺激人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子的表达

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RTP-CR)和蛋白印迹技术,观察TGF-β1对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGFmRNA及其蛋白质表达的影响,同时观察肾小管上皮细胞形态改变。结果:HK2细胞有基础量的CTGFmRNA和蛋白质分子表达,在TGF-β1刺激下,其表达量显著增加,经不同浓度TGF-β1干预24h后,CTGFmRNA表达量明显升高,且呈剂量依赖性。1ng/mlTGF-β1刺激时,CTGFmRNA表达量开始显著增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降,CTGFmRNA表达量分别为对照组的2.40倍,3.34倍和2.73倍(P<0.05)。CTGFmRNA表达量呈时间依赖效应。TGF-β1(5ng/ml)干预30min后,CTGFmRNA表达量开始呈现增加趋势,为对照组的1.48倍(P>0.05),2h后出现显著差异,为对照组的2.14倍(P<0.05);CTGFmRNA表达量在24h达到高峰,持续至36h,分别为对照组的3.19倍和2.75倍(P<0.005);0.5ng/mlTGF-β1刺激时,CTGF蛋白表达量略有增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降。在TGF-β1(5ng/ml)干预下,HK2细胞由立方形铺路石样逐渐转变为长梭形长条样,免疫荧光检测见梭形细胞胞浆中有大量αSMA表达。大部分细胞转分化的时间(72h)明显晚于CTGFmRNA     

低血镁与糖代谢异常

镁离子(Mg2 )是人体内含量第四的阳离子(钠离子、钾离子、钙离子、Mg2 ),亦是细胞内液中含量仅次于K 的第二大常见阳离子。Mg2 是许多酶促反应的辅酶。Mg2 和胰岛素之间存在密切的关系,Mg2 在胰岛素作用中担当第二信使的作用;反之,胰岛素也是细胞内Mg2 重要的调节因子。大量流行病学调查及实验表明糖尿病及糖代谢异常与Mg2 代谢之间存在密切关系。本文就镁与胰岛素、镁与糖稳态之间的关系作一综述。1镁的分布、吸收、转运与调节正常成年人体内含有21~28g镁元素,其中99%存在于细胞内,仅1%在细胞外。细胞内镁大约65%以矿物质形式存在于骨…     

重视慢性肾脏疾病早期的筛查和诊断

慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)是各种肾脏疾病的共同转归,慢性肾脏疾病(chronickidney disease,CKD)尤其是终末期肾功能衰竭(endstage of renal disease,ESRD)患者面临着高发病率、高住院率、高死亡率及高额治疗费用的风险[1]。据保守估计,透析患者人数正以每年5%～8%的速度持续增长,至2010年全球透析人数将达250万,而2000～2010年间全球透析费用预计高达1.1万亿美元[2]。美国肾脏数据库(USRDS)2005年年度报告表明美国ESRD的发病率和患病率已分别由1980年的84例/百万人口和283例/百万人口增至2003年的337.6例/百万人口和1496例/百万人口[3]。中国目前尚缺乏具有权威的统计数据,上海地区的ESRD患病率与透析率已接近发达国家水平,而偏远地区仍有大量病例限于技术和经济原因尚不能得以及时诊治。