多重PCR在瘢痕疙瘩Fas基因突变分析中的应用

目的:建立瘢痕疙瘩Fas基因常见突变外显子的多重PCR扩增反应体系,以利进行批量瘢痕疙瘩基因突变的筛选和检测。方法:取正常皮肤、增生瘢痕和瘢痕疙瘩组织DNA样本,根据瘢痕疙瘩Fas基因易发突变的外显子6,8,9之序列,按照多重PCR引物设计原则,建立3对相应引物,先分别找出各外显子的最佳扩增条件,再进行综合分析,最终找到一个理想的多重PCR扩增条件。结果:各外显子单一扩增片段和多重PCR扩增条带均清晰,产量较高,无非特异性扩增,产物长度与理论值一致;DNA测序证实,各扩增产物即各外显子基因片段。结论:成功建立了瘢痕疙瘩Fas基因常发突变外显子的多重PCR扩增体系,与以往单基因分次扩增相比,实现了一次同时扩增3个基因片段,为瘢痕疙瘩基因诊断和进一步相关的分子生物学研究提供了一个经济、快捷的方法,对于瘢痕疙瘩Fas基因的突变研究具有较高的应用价值。     

64层螺旋CT冠状动脉成像定位像CT值与管电流关系的研究

Objective To characterize the association between the mean CT value on a scout view and the dependent mA selection method, and to evaluate the clinical value of a mA selection method based on scout view mean CT value in obtaining individualized scan protocol and consistent image quality for patient population on 64-row MSCT CT coronary angiography (CTCA).Methods One hundred patients (group A) underwent CCTA consecutively using standard protocol with a fixed mA.The mean CT value of a fixed ROI (region of interest) from the scout AP view and the CTCA image noise (standard deviation on the root of ascending aorta) were measured.The correlation between CT values and noise was studied establish a formula and a list to determine the required mA for obtaining a consistent CTCA image noise based on the measured SV CT value.Another 100 patients (group B) were scanned using the same parameters as group A except the mA and the CT value was also measured.The mA was determined by the list established previously.The CTCA image quality (IQ) as well as the image noise (IN) and the effective dose (ED) from the two groups were statistically analyzed using t-test.The CT findings for the 32 patients in the group B were also compared with the selective coronary angiography (SCA) results.The sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value and diagnostic accuracy of CCTA for detection of significant stenosis were obtained.Results The formula between the required mA and the CT value was : XmA=FmA×[(K1×CTscout + C1)/INa]2.The CCTA images in B group had statistically higher IN (27.66±2.57,22.22±4.17,t=11.33, P=0.000), but no statistical difference between IQ scores for the two groups (3.29±0.66,3.37±0.67,t=0.009, P=0.990), and ED[(8.72±2.51) versus (12.53±0.90) mSv]was 30% lower for the B group (P<0.01).For the 32 patients in the B group who had SCA, the CCTA sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value, and stenosis detection accuracy were 94.92% (56/59), 92.13% (82/89) ,88.89% (56/63) ,96.47% (82/85) and 93.24% (138/148) wspectively for stenosis greater than 50%.Conclusion The mA selection method based on the SV CT value for CCTA in 64-row MSCT provides individualized protocol to obtain consistent image quality and to optimize dose delivery to patients.     

36例眼外伤致眼球摘除术患者的心理分析及护理干预

眼外伤多由爆炸伤、车祸伤、工伤、打架斗殴等引起。眼球摘除术是指眼球的功能已全部丧失或将全部丧失情况下,为解除患眼剧痛的痛苦或威胁健眼及生命安全的危险所做出的治疗措施,是眼外伤和眼科疾病中患者最难以接受的治疗措施,是一种破坏性的毁容手术。眼球摘除影响患者的五官美容,造成生活上的不便,给患者带来特殊的心理问题,面对眼球摘除将导致影响五官美容,绝大多数患者易产生严重的负性心理,患者内心充满恐惧、紧张、愤怒、焦虑、抑郁、悲观等情感障碍。患者由于器官的丧失心理上承受着极大的压力和痛苦,     

BrdU 标记家兔脂肪组织来源干细胞的体外研究

目的 通过采用 BrdU 标记连续培养的家兔脂肪组织来源干细胞(adipose-derived stromal stem cells,ADSCs),检测其最佳标记时间、标记剂量及毒性作用,探讨其作为干细胞标记示踪方法的可行性. 方法 8～12 周龄健康新西兰大白兔 6 只,雌雄不限,体重 1.5～2.0 kg.切取腹股沟皮下 1～2 mL 脂肪组织,采用贴壁法体外分离培养ADSCs,并进行鉴定.取第 3 代细胞以终浓度分别为5、10、15 和 20 μg/mL 的 BrdU 进行标记,分别记为A、B、C及 D 组;另 1 孔不含 BrdU,作为空白对照(E 组).标记12、24、48 和 72h后,采用免疫组织化学检测各组细胞阳性率,苔盼蓝排染法行细胞计数观察标记后细胞活性. 结果 原代培养的ADSCs形态主要为宽大、扁平、短梭形细胞;传代后细胞形态主要为长梭形;第3代 ADSCs经诱导均能向成骨细胞和脂肪细胞分化.免疫组织化学观察:第3代 ADSCs 经 BrdU 标记后,在荧光显微镜下胞核呈绿色荧光.孵育 12h,A、B、C、D 组细胞标记阳性率逐渐增高,分别为 30.6%±2.3%、32.4%±1.9%、45.8%±1.8%、50.8%±3.1%,C、D组与 A 组比较,差异有统计学意义(P<0.01);24 h,A、B、C及D组标记率分别为45.9%±2.0%、87.9%±3.3%、90.6%±2.9% 及 91.7%±3.2%;48 h 和 72 h,A、B、C、D 组标记情况与24 h 相似;E 组各时间点细胞标记阳性率为 0.孵育 24、48及72 h,B、C及D组细胞阳性率与 A 组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).孵育12、24、48 及 72 h细胞计数,各组细胞活性均在90%以上,A、B、C、D组与E组比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 BrdU 标记 ADSCs 的最佳时间为 48 h,最佳浓度为 10μg/mL;BrdU 对细胞标记率及安全性高.     

鼻部的电脑整形美容显像系统测量

鼻部的电脑整形美容显像系统测量胡志奇罗锦辉高建华李建秋在隆鼻术中如何判断鼻外形的完美，以往主要凭个人的审美观和手术经验，或采用一些简单的工具如直尺、两角规等进行比较粗糙的测量。自８０年代国外开始应用电脑行整形美容手术设计后［１～３］，有了精确的依据，...     

64层螺旋CT血管成像技术对原位肝移植术前受体的门静脉系统评价

目的应用64层螺旋CT血管成像技术对原位肝移植术前受体的门静脉系统进行评价。方法对230例原位肝移植术前患者行CT血管成像检查。采用多平面重组、最大强度投影和容积再现进行图像后处理。由两名放射科医师共同对原始及门静脉重组图像进行分析。结果门静脉高压伴静脉曲张127例,下段食管和（或）食管旁静脉曲张75例（占59%）,胃左静脉伴有或无胃底静脉曲张33例（占30%）,脾静脉明显曲张29例（占22.8%）,部分伴有脾肾静脉曲张,附脐静脉曲张16例（占12.6%）,肝门旁静脉曲张7例（占5.5%）。门静脉系栓子形成63例,肝硬化和肝硬化伴有肝癌的门脉栓子发生率分别为11/82（占13.4%）和52/148（占35.1%）。肝动脉门静脉瘘13例,其中12例合并有肝癌（占肝癌发生率8%）。门静脉海绵样变性7例,均伴有门静脉主干栓子。结论64层螺旋CT血管成像技术对原位肝移植术前受体的门静脉系统评价具有重要价值,能够显示门静脉系统的多种异常。     

应用组织工程室实现工程化乳房构建的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,估计全球范围内每年有130万新病例[1].当前乳腺癌术后乳房重建仍面临着一些不可忽视的问题,如感染、异物反应、包膜挛缩等[2-3].组织工程技术为实现软组织缺损的修复提供了新思路.2003年,Hofer等[4]首先提出直接利用在体大血管进行组织工程的研究,即将在体血管转移到组织工程室内,为拟构建物提供血管基础、营养物质和生长空间,称为血管化的组织工程室.我们仅就利用组织工程室进行大体积脂肪组织构建的研究策略、新生脂肪的来源机制、乳房修复重建的研究现状,以及工程化乳房的未来展望做一综述.     

飞秒激光在角膜疾病中的应用进展

飞秒激光对组织的光致解离作用具有低能量、微损伤以及空间定位精确的特点,非常适合于角膜组织的超精细切割。本文就飞秒激光的作用机制及在角膜病领域的临床应用进行综述。     

负压封闭引流技术治疗足踝部开放性骨折脱位

目的观察负压封闭引流(VSD)技术应用于足踝部开放性骨折脱位治疗的临床结果。方法收集2006年3月至2010年3月收治的足踝部开放性骨折脱位患者520例,其中406例接受VSD治疗(VSD治疗组),114例接受常规清创换药治疗(换药组)。结果全部患者获随访2～5年,平均为3.5年。VSD组与换药组浅表感染率分别为5.17%和10.53%,细菌培养阳性率分别为1.03%和11.43%,术后GustilloⅡ型、Ⅲ型软组织损伤优良率分别为83.19%、75.96%和50.63%、31.43%,VSD组与换药组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用VSD技术治疗足踝部开放性骨折脱位可降低感染率,提高治疗效果,是一种安全有效的治疗方法。     

中国汉族瘢痕疙瘩家系的遗传学特征研究

目的 研究中国汉族瘢痕疙瘩家系的遗传学特征.方法 收集6个无亲缘关系的中国汉族瘢痕疙瘩家系的临床资料、绘制家系系谱和分析遗传模式以说明其遗传学特征.结果 这些瘢痕疙瘩家系以青春期发病为主,且男女患病的机会均等;杂合体即可发病,双亲之一发病其半数子女可能发病;3个家系疾病性状连续传递、外显完全,而另3个家系疾病性状间断传递、外显不完全;临床表型存在个体差异.结论 中国汉族瘢痕疙瘩家系的遗传模式符合常染色体显性遗传、伴外显不完全,表现度存在差异,并具有延迟显性特征.