人参皂苷Rg1可能通过丝裂素活化蛋白激酶途径抑制细胞凋亡

目的探讨人参皂苷Rg1对MPP+诱导细胞凋亡保护作用的可能信号传导途径.方法用吖啶橙-溴化乙锭染色观察SHSY5Y细胞凋亡率,流式细胞仪检测细胞内活性氧ROS水平,Western Blotting法检测JNK(c-jun NH2-terminal kinase)激酶活性,免疫细胞化学染色法检测裂解的Caspase-3阳性细胞的表达率.结果经10 μmol*L-1 Rg1或2.5 mmol*L-1 N-乙酰半胱氨酸预处理后,MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡受到明显抑制,同时细胞内ROS下降,JNK激酶的活性减弱,裂解的Caspase-3阳性细胞表达率下降.结论 Rg1可抑制MPP+诱导的SHSY5Y细胞凋亡,其作用机制可能是通过清除ROS、减弱JNK激酶的活性,从而减少Caspase-3的激活.     

赤芍801通过抗氧化作用减轻脑缺血/再灌注损伤

目的探讨在缺血后给予赤芍801对脑缺血/再灌注损伤的保护作用及可能的抗氧化作用。方法大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后,通过NSS和运动功能评分观察赤芍801对大鼠神经功能的影响。分别通过TTC染色、Nissl染色和TUNEL染色观察再灌注后脑梗死体积、缺血周边区神经元的存活和凋亡情况。检测缺血周边区MDA和SOD指标,探讨赤芍801发挥神经保护的可能机制。结果缺氧后给予94μmol·kg-1·d-1赤芍801能很好的改善大鼠的NSS和运动功能评分,减少缺血周边区TUNEL阳性细胞数,增加Nissl染色阳性细胞数,并减少MDA的生成、提高SOD的含量。结论赤芍801能通过抗氧化作用,保护脑缺血周边区的神经元,从而提高脑缺血/再灌注大鼠远期的神经功能恢复。     

赤芍801通过抑制NF-κB抗脑缺血-再灌注损伤的机制

探讨赤芍801减轻在体大鼠脑缺血-再灌注损伤的可能机制。采用线栓模型制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,在缺血后给予赤芍801,用Western blotting方法检测脑缺血周边区的NF-κB活性、COX-2和HSP70的表达量,用ELISA方法测定TNF-α的表达量,用RT-PCR方法和免疫荧光染色法检测TLR-4的转录和蛋白表达。结果显示:赤芍801能抑制脑缺血周边区NF-κB活性,减少COX-2和TNF-α的表达,同时抑制NF-κB的上游TLR-4的转录和蛋白表达,对TLR-4的内源性配体HSP70的蛋白表达也有抑制作用。赤芍801作为一种抗氧化剂,有可能通过抑制脑缺血周边区的NF-κB活性,减少局部的COX-2和TNF-α的表达,达到减轻脑缺血-再灌注损伤的目的,同时对NF-κB的上游HSP70和TLR-4产生影响。     

溶栓治疗老年急性心肌梗死临床分析

溶栓治疗急性心肌梗死 (AMI)已成为挽救AMI患者生命的重要手段 ,我们观察了国产基因重组链激酶思凯通 (r SK)对老年初发AMI的疗效及安全性。1 对象与方法 :2 0 0 0年 6月～ 2 0 0 3年 3月收住我院冠心病监护病房、发病 6～ 12h的AMI患者 130例 ,其中年龄≥ 6 0岁为老年组 (74例 ,男 5 3例 ,女 2 1例 ) ,<6 0岁的为对照组 (5 6例 ,男 4 0例 ,女 16例 )。平均年龄分别为 (6 8± 8)岁和 (49± 8)岁 ;老年组前壁心肌梗死占 73% ,对照组 6 0 %。诊断均符合WHO的AMI诊断标准。患者均无溶栓禁忌证 ,接受r SK15 0万IU静脉溶栓 ,30～ 6 0mi…     

伏立诺他对阿尔茨海默病转基因小鼠认知功能及脑内tau蛋白磷酸化的影响

目的 观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)对阿尔茨海默病转基因小鼠认知功能和脑内tau蛋白磷酸化的影响.方法 分别选择12只5XFAD转基因(5XFAD-CC)和野生型(WT)小鼠,采用HDACi伏立诺他(SAHA,每组7只)与溶媒对照(每组5只)处理动物,利用Y-迷宫、Morris水迷宫评估5XFAD-CC小鼠学习和记忆能力,通过蛋白免疫印迹检测α-tubulin乙酰化、tau和糖原合成激酶3β(GSK313)蛋白及其磷酸化水平.结果 SAHA可改善5XFAD-CC小鼠即刻记忆、工作记忆能力,SAHA组进入新奇区域的次数(39.10％ ±2.25％,t=2.688,P=0.031)和停留时间(26.81％ ±0.78％,t=3.271,P=0.017)较溶媒对照组(分别为30.33％±2.32％和19.80％±1.99％)明显增加;同时,SAHA可改善5XFAD-CC小鼠空间参考记忆能力,SAHA组寻找平台的潜伏期较溶媒对照组缩短(F=5.936,P=0.045)及进入原平台所在象限时间增加(31.70％ ±4.21％,t=2.317,P=0.049).SAHA可增加5XFAD-CC和WT小鼠脑内HDAC6底物α-tubulin乙酰化水平(分别增加26.42％和29.64％),降低5XFAD-CC小鼠海马tau-pSer396、tau-pSer404和tau-pThr231磷酸化水平(与溶媒对照组比较,分别减少24.22％、48.98％和26.95％)及GSK3β磷酸化水平(31.29％).结论 SAHA可改善5XFAD小鼠的学习和记忆能力,可能与其降低tau和GSKSB蛋白磷酸化水平有关.     

纤维蛋白原对内皮细胞t-PA和PAI-1 mRNA表达的影响

目的 探讨纤维蛋白原（Ｆｇ）对内皮细胞（ＥＣ）组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）和纤溶酶原灭活剂（ＰＡＩ－１） ｍＲＮＡ表达的影响。方法 不同浓度Ｆｇ与ＥＣ孵育不同时间后,用单管逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量法检测ｔ－ＰＡ和ＰＡＩ－ｍＲＮＡ的表达。结果 用２０,２００,２０００ｍｇ／Ｌ Ｆｇ与ＥＣ孵育１、１２、２４ｈ、ＰＡＩ－１ ｍＲＮＡ的相对表达水平分别为同时相对照组的１．７,３．６,２     

Bcl-2和Bax在多巴胺诱导PC12细胞凋亡中的作用

目的探讨多巴胺诱导PC12细胞凋亡的可能机制。方法流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡率及Bcl-2和Bax蛋白的表达率。结果多巴胺诱导PC12细胞凋亡,两者间呈明显的量效和时效关系。0.45mmol/L多巴胺作用24h,细胞的凋亡率为53.3%±3.1%。在凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax蛋白表达随之增高。诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)抑制剂和半胱氨酸蛋白酶3(CPP32)抑制剂对抗多巴胺诱导PC12细胞的凋亡作用与Bcl-2蛋白增加、Bax蛋白降低有关。结论Bcl-2和Bax蛋白是多巴胺诱导PC12细胞凋亡的重要调节蛋白,iNOS和CPP32在凋亡过程中可能具有重要作用。     

床旁超声心动图导管尖端定位在减少新生儿PICC置管异位中的应用

目的 探讨床旁超声心动图导管尖端定位在减少新生儿PICC置管异位中的应用.方法 选取2018年5月至2019年5月我院140例PICC置管的新生儿,随机分为观察组与对照组,每组各70例,观察组送管成功后先行床旁超声心动图定位,置管结束后再床旁X线胸腹摄片定位;对照组只在置管结束后行床旁X线胸腹摄片定位.比较两组置管一次...     

三丁基过氧化氢诱导WI-38细胞衰老的细胞周期调控机制

目的：探讨三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导WI-38细胞衰老的细胞周期调控机制。方法： 从30代开始，隔代用t-BHP作用WI-38细胞4次，每次1 h，诱导细胞衰老，从细胞超微结构、细胞周期分析和β-半乳糖苷酶细胞化学染色观察衰老细胞的特点，同时用Western blotting方法检测细胞周期调控蛋白CDK4、CDK2、cyclin D1、cyclin E 、p21和p16的表达程度。 结果：100 μmol/L t-BHP作用4次后，WI-38细胞出现衰老的特征，细胞增殖分裂停止，细胞体积增大、胞体变平、次级溶酶体增多，同时G1期细胞比例增加，β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加，提示t-BHP能有效地诱导细胞衰老。t-BHP作用后CDK4、CDK2、cyclin E 表达下降，cyclin D1、p21和p16表达增加。 结论： t-BHP有诱导细胞衰老的作用，其机制可能与通过调节细胞周期调控分子的表达有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在前列腺癌细胞株PC-3M中对核因子kappa B活化的影响

目的：研究TRAIL诱导激素非依赖前列腺癌细胞株PC-3M过程中核因子kappa B（NF-κB）的活化和失活现象。方法： 当不同浓度的TRAIL和LPS作用于细胞后，我们通过细胞免疫组化染色和凝胶电泳迁移试验（EMSA）来检测NF-κB核转位的情况。并通过RT-PCR的方法粗略评定二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）对抑制蛋白IκB的影响。结果： EMSA和免疫组化分析显示PC-3M细胞中NF-κB的核转位可被TRAIL或LPS明显地激活。以PDTC预处理可以上调抑制蛋白IκB的表达，阻断NF-κB的核转位。结论： TRAIL的作用于激素非依赖前列腺癌细胞时主要的负作用在于其可以显著地刺激NF-κB的活化。另一方面，在PC-3M细胞凋亡过程中NF-κB的核转位可以被PDTC有力地抑制，同时IκB的表达升高和降解减少（PDTC引起的）是抑制NF-κB活化的潜在因素，为我们提出了增强TRAIL疗效的可能性方案。