鼠抗人肝癌单抗Hab_(18)—葡聚糖—阿霉素结合物在荷瘤裸鼠体内的放免定位及导向治疗的实验研究

本实验制备了鼠抗人肝癌单克隆抗体Hab_18—葡聚糖—阿霉素导向结合物,放免显像证实该结合物在荷人肝癌裸鼠体内能选择性地定位于人肝癌局部;对荷瘤鼠的毒理学实验中相同剂量的阿霉素组荷瘤鼠全部死亡,而导向结合物组全部存活;荷人肝癌裸鼠导向治疗结果表明:该结合物能有效地抑制人肝癌的生长,导向治疗组肿块较治疗前缩小.实验结果提示:Hab_18—DEX—ADM结合物对人肝癌有较好的导向治疗作用.其抗癌效果优于单纯ADM,而毒副作用却明显低于单纯ADM,有可能成为一种肝癌导向药物.     

高效凝胶色谱一步法制备级纯化单克隆抗体

作者采用ＰｈａｒｍａｃｉａＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ—３００凝胶色谱柱，建立了ＩｇＧ类ＭｃＡｂ的一步法制各级纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ腹水直接上样，用ｐＨ７．４１０ｍｍｏｌ／ＬＰＢＳ洗脱（流速０．５ｍｌ／ｍｉｎ），即得到纯化的ＭｃＡｂ。一次上样量４０～５０ｍｌ腹水，回收率为８５％－９０％．整个纯化周期４ｈ。纯化的ＭｃＡｂ经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ测定，纯度＞９０％，免疫组化ＡＢＣ法测定活性为１：８００００（７．８×１０－１１ｍｏｌ／Ｌ）。该法操作简单、快速，只要有一台核酸／蛋白检测仪，便可进行制备级水平的纯化。     

中国Top1与国际Top1的差距——看哈佛大学细胞生物学系

细胞是机体结构和功能的基本单位,细胞生物学以细胞为研究对象,揭示细胞的增殖、分化、遗传、运动、衰老等基本生命活动规律,是生命科学的基石。 细胞生物学是生命科学的基础学科,与医学、药学以及生物学其他学科广泛交叉与融合,成为生命科学的交汇点,并外延至重大疾病的转化医学。     

抗人肝癌单链抗体的基因克隆和分泌型表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术，从分泌抗人肝癌单克隆抗体的杂交瘤细胞ＨＡｂ１８中，扩增出抗体ＶＨ和ＶＬ连接肽基因，将ＶＨ和ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行序列测定，结果表明，ＶＨ，ＶＬ，ｌｉｎｋｅｒ拼接正确，基因全长为７２６ｂｐ。用噬菌粒表达载体ｐＣＡＮＴＡＢ ５Ｅ在大肠杆菌中表达了可溶性的ＳcＦｖ融合蛋白，经流式细胞仪分析表达产物可特异地与肝癌细胞结合，而不与正常肝细胞及胃癌细胞结合。     

肝癌特异性单克隆抗体HAb18可变区基因的克隆和序列测定

鉴于基因工程抗体具有分子小、免疫原性低，不被细胞受体结合，在体内成象定位检查时本底低，图像清晰，能进入实体瘤周围微循环，在治疗实体瘤时较完整抗体分子的效能高等优点。我们从肝癌特异性ｍＡｂＨＡｂ１８中克隆了其轻、重链可变区基因，并测定了其核苷酸序列，为...     

阴离子交换FPLC制备级化单克隆抗体

作者采用ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换柱，在快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立了ＩｇＧ类单克隆抗体制备级纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ腹水经５０％饱和硫酸铵盐析粗分离后，再用阴离子交换色谱纯化，一次上样量相当于８０～１００ｍｌ腹水，可得纯化ＭｃＡｂ５００～６００ｍｇ，得率为６～７ｍｇ／ｍｌ腹水，回收率为５７～６７％，一次纯化周期仅南非４５ｍｉｎ。经ＳＤＳ－ＦＡＧＥ检测ＭｃＡｂ纯度为９５％，ＡＢＣ染色法     

凝胶色谱法半制备级纯化单克隆抗体

作者采用ＳｅＰｌｌａｃｙｌＳ－２００凝胶色谱柱，在快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立了肝癌相关抗原单克隆抗体半制各级纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ腹水经４０％饱和硫酸铵盐析粗分离后，再用凝胶色谱纯化，一次上样量相当于５～１０ｍｌ腹水，可得纯化ＭｃＡｂ３０～６０ｍｇ，得率为６～６．５ｍｇ／ｍｌ腹水，回收率为６３％，一次色谱纯化周期２ｈ，整个分离纬化可在３ｈ内完成。经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＤＥＡＥ离子交换色谱法检测ＭｃＡｂ纯度大于８０％，ＡＢＣ染色法测定ＭｃＡｂ活性为，１：４００００（１．５６×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ），是一般实验室纯化ＩｇＧ类ＭｃＡｂ的实用方法。     

浅谈多媒体技术在医学细胞生物学教学中的应用

目前,我国高等医学教育既面临着新的挑战也肩负着重大的历史使命,这就要求进行教学改革,不仅进行教学内容的改革,教学方法也需要进行改革,而多媒体技术的引用,不仅使教学手段发生变革,其教学思想、教材内容和形式都发生了变化,尤其对医学细胞生物学这个微观领域的教学研究,注入了新的生命力。作为教师应熟练掌握多媒体技术,使教学信息更加逼真、生动、具体,进一步提高初学者对于知识的长期记忆;同时,合理进行教学设计,适当应用多媒体技术,使其成为形象、可视的教学工具,而不是转型的黑板,以尽快完善多媒体技术在医学细胞生物学教学中的运用。     

聚乙二醇修饰多肽的电泳分析方法

目的 建立聚乙二醇修饰多肽的电泳分析方法。方法 采用不同浓度和不同交联度的凝胶进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后依次进行碘化钡染色和考马司亮蓝染色,并采用图像分析仪对所得结果进行处理。结果 采用5％浓缩胶,15％分离胶(C=3％),可以将不同分子量聚乙二醇与聚乙二醇修饰的小分子多肽分离;采用3.125％浓缩胶(C=20％),15％分离胶(C=5％),可以将聚乙二醇与小分子多肽分离。结论 建立了有效分离聚乙二醇修饰的小分子多肽的SDS-PAGE分析方法。     

βig-h3在肝癌细胞系中差异表达的筛选和鉴定

目的:筛选并鉴定TGFβ诱导分子βig-h3基因在肝癌细胞系T7721和7721中的差异表达. 方法:培养肝癌细胞系T7721(转染并稳定高表达HAb18G/CD147), 7721(未转染HAb18G/CD147),提取总RNA,荧光交换标记(Cy5和Cy3) 筛选信号转导相关基因芯片;RT-PCR检测基因芯片初步筛选出的差异分子(βig-h3)在肝癌细胞T7721和7721中的差异表达. 结果:①经基因芯片差异分析,在高表达HAb18G/CD147的T7721细胞中TGFβ诱导分子βig-h3的mRNA表达明显上调,为7721细胞的4.4倍;而TGFβ1的mRNA表达无明显差别. ② RT-PCR显示βig-h3mRNA在T7721中的表达水平明显高于7721(t=14.42, P<0.01). 结论:经基因芯片筛选分析,发现HAb18G/CD147分子与TGFβ诱导分子βig-h3的表达成正相关, HAb18G/CD147的高表达诱导了βig-h3的表达增高,为进一步探讨在细胞内信号转导通路中HAb18G/CD147分子促进肝癌细胞侵袭和转移的作用机制奠定了基础.