产生抗人肝癌铁蛋白的相关抗体——FP—2淋巴细胞杂交瘤的建立

取人肝癌周围组织及其肝癌组织分别提取铁蛋白(Ag_1和Ag_2)前者等电点pH为5.4,后者4.9—5.1。将Ag_1免疫Balb/c小鼠,融合获得单克隆抗体,此株杂交瘤命名为FP—2,经过8个月的体外培养,能稳定分泌抗体。腹水抗体效价(ELISA)为10~(-6),抗体亚类为小鼠IgM型,免疫荧光组织定位倾向于肝癌细胞,对肝细胞也有轻度反应。染色体均数为106对,细胞生长曲线为对数增长曲线。     

阴离子交换FPLC制备级纯化单克隆抗体

作者采用ＤＥＡＥ－４０ＨＲ阴离子交换柱。在快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立了ＩｇＧ类单克隆抗体制备级纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ腹水经５０％饱和硫酸铵盐析粗分离后，再用阴离子交换色谱纯化，一次上样量相当于８０～１００ｍｌ腹水。可得纯化ＭｃＡｂ５００～６００ｍｇ，得率为６～７ｍｇ／ｍｌ腹水，回收率为５７～６７％．一次纯化周期仅需４５ｍｉｎ。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测ＭｃＡｂ纯度为９５％，ＡＢＣ染色法测定ＭｃＡｂ活性为１：２００００（３．１３×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ）．     

肝癌组合单抗─阿霉素结合物的体外细胞毒实验

本文为探索克服肿瘤抗原表达异质性对肝癌导向治疗效果影响的可能途径，将本室制备的两种特异性高、亲和力强，针对肝癌细胞膜不同抗原决定簇的单克隆抗体ＨＡｂ１８和ＨＡｂ２５以葡聚糖（Ｄｅｘ）作为连接臂与阿霉素（ＡＤＲ）偶合，制备出ＨＡｂ１８－ＡＤＲ和ＨＡｂ２５－ＡＤＲ结合物，并将二者组合起来联合应用进行体外细胞毒实验，其对靶肿瘤细胞人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１的杀伤效应显著强于单用其中任何一种抗体与ＡＤＲ的结合物（Ｐ＜０．０１）．说明组合单抗联合应用是克服肿瘤细胞抗原表达异质性对导向治疗的影响，增加免疫结合物与肿瘤细胞结合位点，提高导向治疗效果的一种有效途径．     

面向精准医学的医学细胞生物学的教学探索

精准医学是医疗模式最新发展方向,将对肿瘤医疗模式产生重大的影响.同时精准医学的出现也为基础医学教育带来了新的机遇.医学细胞生物学是医学本科教育中一门重要的基础学科,我们在教学中尝试对教学内容和方式进行改革,增加了精准医学及其临床应用相关的技术和知识讲授,同时配合实验课程的改革.通过对调查问卷和随堂抽测对改革效果进行评价.结果表明本次改革不但提升了课堂授课的效果,同时增强了学生对细胞生物学课程重要性的认识,对学习目的、学习态度和学习方法都产生了积极影响.不但对提高课堂授课质量发挥了积极作用,同时也为探索基础学科教育新模式,培养适应未来医学发展的人才做出了一次有益的尝试.     

抗经干扰素处理的SMMC7721肝癌细胞系单克隆抗体HAb23的制备

作者将经人α-干扰素处理的SMMC7721肝癌细胞系作为抗原免疫小鼠,通过细胞融合,筛选得到一株具有分泌一定特异性的抗肝癌单克隆抗休HAb23细胞株,经亚类鉴定HAb23为IgG1。HAb23细胞株性质稳定。在体外连续培养3个月均有抗体分泌。将冻存的HAb23细胞复苏,其克隆的阳性率保持100％。对30例肝细胞性肝癌及其它组织进行免疫组化染色,其中25例肝癌呈阳性,阳性率达83.3％,正常肝组织、肝炎、肝硬化组织均为阴性。     

改良明胶酶谱测定明胶酶活性

基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)是能降解细胞外基质和基底膜成分的酶家族成员之一。这个蛋白家族包括胶原酶、明胶酶、基质素和膜型基质金属蛋白酶 (ＭＴ ＭＭＰ)等 5大类。ＭＭＰｓ家族成员目前已鉴定出 2 8种[1] 。ＭＭＰ的基因表达水平和酶活性的高低与许多生理或病理过程及其恶性程度相关 ,如肿瘤转移、血管浸润、骨质疏松、组织纤维化等 ,尤其是明胶酶Ａ和Ｂ(ＭＭＰ 2 ,9)在肿瘤的转移和血管生成方面起重要的作用[2 ] 。目前 ,测定明胶酶活性的方法多用明胶酶谱法 ( ｇｅｌａｔｉｎｚｙｍｏｇ ｒａｐｈｙ) ,即收集待测样本 ,处理后在含有明…     

~(99m)Tc标记抗人肝癌单抗Fab片段修饰物在荷人肝癌裸鼠模型中的放射免疫显像

研究抗人肝细胞癌单克隆抗体Ｆａｂ片段修饰物的９９ｍＴｃ标记方法。用２亚氨基噻吩盐酸盐（ＩＴ）修饰ＨＡｂ１８Ｆａｂ片段。用９９ｍＴｃＧＨ转络合法标记ＩＴＦａｂ，测定标记物的放化纯度及生物活性，进行荷人肝癌裸鼠模型的放射免疫显像。结果：纸层析法测得标记率为５０％～８０％，体外细胞结合法测定免疫活性为３０％～４０％。荷人肝癌裸鼠模型尾静脉注入９９ｍＴｃＩＴＦａｂ后４～８小时，肿瘤区放射性有浓聚，１２～２２小时浓聚最多，Ｔ／ＮＴ值为５１８～７４８。因此，９９ｍＴｃＩＴＦａｂ可特异性浓聚于荷人肝癌裸鼠模型中，可能成为肝癌放射免疫显像的有效显像剂。     

大剂量放射性~（131）Ⅰ标记抗人肝癌单抗HAb18制剂的临床前质量控制

目的：对改良Ｍａｔｈｅｒ氏法标记的大剂量￣（１３１）Ⅰ－ＨＡｂ１８ＭｃＡｂ进行了临床前质量控制．方法：用常规检测方法（柱层析法、ＰＡＧＥ电泳法、体外培养细胞结合分析等）检测了三批样品的游离碘率、体外细胞免疫结合率、无菌、热原质及热稳定性实验等．结果：本法标记物样品热原质、无菌、毒性试验均合格，￣［１３１］Ⅰ蛋白标记率≥８８．３％，游离碘率≤１２．６％，细胞免疫结合率＞５０％，白蛋白非特异标记率＜６％，标记物在３７℃４８ｈ内，游离碘释放率＜２０％，细胞免疫结合率＞４０％．结论：本法制备的碘标记物各项安全指标合格．热稳定实验提示超过４８ｈ的标记物游离碘及免疫活性变化较大．     

治疗性单抗的免疫原性研究进展

治疗性单克隆抗体(Tberapeutic mAb)已经成为药物工业发展最快的领域之一,2003年到2004年之间其种类增长了48.1%.到目前为止,有26个治疗性单抗被美国食品药品管理局(FDA)批准应用于临床,超过150个抗体正在进行临床实验,其中包括8个鼠源性单克隆抗体、6个嵌合型单克隆抗体、11个人源化单克隆抗体和1个全人型单克隆抗体.这些抗体在临床上均取得了很好的效果,但是都不同程度地遇到了过敏反应和抗.