石英谐振传感器液相稳定平台构建及检测HCMV的实验研究

目的 建立石英谐振压电基因传感器检测系统液相稳定平台并应用该检测系统实时检测链置换扩增(Strand displacement amplification,SDA)反应。方法 ①观察以金属夹具式和粘胶式两种检测池连接方式构成的传感器在液相中的频率稳定性;②以巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)为检测对象,建立SDA反应系统;③传感器检测系统对HCMVSDA反应进行实时检测。结果 ①新型金属夹具式可调节及可换式传感器检测池可实现传感器在液相中的频率稳定性;②SDA反应可引起压电基因传感器的频率持续下降;③在一定范围内核酸杂交所引起的频率下降幅度随加入的靶序列浓度提高而增大。结论 成功构建压电基因传感器液相检测稳定平台并实现对SDA反应的实时检测;该系统可直接检测基因组DNA并可广泛应用于病原微生物的临床检测。     

发夹DNA探针检测乙胺丁醇耐药结核杆菌embB基因306密码子突变研究

目的:针对结核杆菌耐乙胺丁醇embB306codon位点,设计发夹DNA探针及其相应的单侧延长臂发夹DNA探针,建立发夹DNA探针芯片技术,并初步运用荧光显微镜观测探针与扩增产物杂交的荧光信号.方法:运用Beacon designer软件,设计embB基因包含306codon的发夹DNA探针及其相应的单侧延长臂发夹DNA探针,荧光显微镜检测embB306codon扩增片段与探针杂交后荧光信号,比较扩增产物测序结果.结果:通过荧光显微镜观测到结核标准株及embB306codon突变株PCR产物与探针杂交后荧光信号存在显著差异;33株耐乙胺丁醇组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐乙胺丁醇组embB306codon突变检出率为66%,测序法突变检出率为69%.结论:embB306codon点突变是结核杆菌耐乙胺丁醇的主要原因;发夹DNA探针芯片技术可以有效检测单碱基靶点突变;应用荧光显微镜可以高灵敏地观测荧光芯片杂交靶点.     

肽核酸生物传感器检测系统构建时靶序列农度的影响及线性范围的确定

目的探索肽核酸生物传感器检测系统构建时靶序列浓度值对杂交效应的影响,以及靶序列浓度线性范围的确定.方法石英谐振式生物传感器阵列表面先固定上1.5μM的bis-PNA探针,观察终浓度为1pg/L至100μg/L的HBV DNA与探针进行杂交所引起的频率变化及反应所需时间.并对频率下降值与靶序列浓度做线性回归,确定其线性范围.结果靶序列浓度为1 pg/L时,传感器未能检测出任何频率的改变.随着浓度从10 pg/L增加到100μg/L,杂交反应引起的频率下降值呈先增加后趋于缓和的趋势,以10μg/L为分界线,而杂交平衡时间并没有显现出一定的变化趋势.在10pg/L到10μg/L的浓度范围内,浓度与频率下降值的线性回归方程为lgC=-2.745 5 0.069 1×△F,相关系数r=0.992 3.结论随着靶序列浓度的升高,杂交反应引起的频率下降值呈典型饱和曲线趋势,靶序列浓度的线性检测范围为:10 pg/L ～ 10μg/L.     

我院解决计算机2000年问题的实践

结合解决计算机２０００年问题的实践，阐述了２０００年问题在及其在医院的表现，提出解决２０００年问题的对策，认知计算机２０００年问题，清查设备，确定问题范围，制定解决方案，制定应急计划、具体实施和检测验证。     

压电基因传感器在HCMV链置换扩增实时检测中的实验研究

目的探讨自行研发的压电基因传感器对链置换扩增(SDA)的实时检测. 方法以巨细胞病毒(HCMV)为检测对象,建立成熟的SDA反应系统;在自行研发的压电基因传感器检测仪上对巨细胞病毒SDA反应进行实时检测. 结果 SDA反应可引起压电基因传感器的频率持续下降;在一定范围内核酸杂交所引起的频率下降幅度与加入的靶序列浓度呈正相关;加样时温差等因素对早期频率变化曲线的影响不可忽视;实验温度是影响SDA压电基因传感器检测灵敏度的重要因素. 结论自行研发的压电基因传感器可成功实现对SDA反应的实时检测;该系统可直接检测基因组DNA并可广泛应用于病原微生物的临床检测.     

实用型低密度石英谐振式生物传感器阵列检测系统的构建

目的构建实用型低密度石英谐振式生物传感器(quartz oscillation biosensor, QOBS)阵列检测系统. 方法首先利用精细微加工法制作单个QOBS,在此基础上先后构建了粘接式以及夹具式2×5型QOBS阵列;并自行开发研制自激式振荡电路、PESA V2.0版频率记录分析软件;将它们与计算机联用以构建QOBS阵列检测系统. 结果成功地制造出了在气、液相中稳定振荡的单个QOBS,构建的粘接式及夹具式QOBS阵列各有其优缺点;自激式振荡电路有非常强的振荡能力,在液相中起振非常容易,其频率稳定度也可达实用要求;PESA V2.0版频率记录分析软件具有自行设置各初始参数,实时记录频率变化、自动绘制频率变化趋势图及分析结果等多项功能. 结论成功地构建出QOBS阵列检测系统,搭建起一个生物检测的技术平台,为临床上病原性微生物的检测以及多种疾病的早期诊断提供一种新的方法.     

茎环分子探针液相快速检测结核分枝杆菌katG315codon突变

目的 应用茎环分子探针检测结核分枝杆菌耐异烟肼katG315codon点突变,运用荧光分光光度计直接观测液相中探针与katG315codon扩增产物杂交后的荧光信号,并与测序结果比较以验证该检测方法.方法 运用软件:Beacon designer设计katG基因包含315codon的茎环分子探针,建立其扩增体系及分子信标芯片检测方法;对扩增产物测序并作比较.结果 通过荧光分光光度计观测到结核标准株及耐异烟肼PCR产物与探针杂交后荧光信号差异有统计学意义;16株耐异烟肼组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐异烟肼组315codon突变检出率为44%,茎环分子探针检测方法与测序法符合率97.5%.结论 茎环分子探针技术是一种具有高灵敏核酸点突变检测技术;荧光分光光度计液相荧光检测方法与测序法符合率较好.     

益气维血颗粒治疗婴幼儿缺铁性贫血临床疗效观察

目的探讨益气维血颗粒治疗婴幼儿缺铁性贫血的临床疗效。方法选取该院儿科2012年1月至2014年1月收治的缺铁性贫血患儿100例,分为观察组和对照组各50例。对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗的基础上给予益气维血颗粒治疗,并比较两组疗效。结果观察组患儿治疗后血红蛋白和红细胞计数明显优于对照组,治疗总有效率（98.0%,49/50）明显高于对照组（88.0%,44/50）,差异均有统计学意义（P〈0.05）;两组患儿在治疗期间均未见明显不良反应。结论益气维血颗粒治疗婴幼儿缺铁性贫血的安全、有效,值得临床推广应用。     

某地级市三甲医院2015—2019年科研现状分析及思考

目的 通过分析医院科研现状,探讨改进医院科研管理的有效对策,从而提高医院科研管理能力和科研水平。方法 对某地级市三甲综合医院2015—2019年科研情况,包括科研课题数量、课题级别、课题经费、SCI论文数量、科技获奖及专利等科研成果进行整理、筛选,通过数据分析发现存在的问题。结果 2015—2019年,该医院科研课题数和资助经费呈平稳上升趋势,课题主要来源于厅局级课题,约占5年总课题数的92.6%;省部级、国家级课题仅占7.4%;SCI论文数量和总影响因子逐年上升,SCI论文影响因子以低分组为主,占比约60.9%;中分组SCI论文占比约26.1%,高分组SCI论文占比约13.0%;市科技奖11项;国家专利32项,专利技术转让3项,转化率不足1%。结论 该医院整体研究水平不高,高水平科研成果较少,获奖成果级别不高,以市级奖项为主,无国家级、省级奖项,科研成果转化率低。医院应该从加强平台建设、高层次人才引进和培养入手,完善激励措施、增强成果转化意识和注重科研培训等方面加以改善提高,使医院的科研走上可持续发展道路。     

压电免疫球蛋白微阵列免疫传感器抗体固定方法的研究

目的构建一种新型压电免疫球蛋白微阵列免疫传感器,探索SPA法在金电极表面进行抗体固定的最佳条件。方法以AT切型、基频10MHz的金膜石英晶体作为换能器,将抗人免疫球蛋白单克隆抗体固定在石英晶体电极表面,根据SPA能通过分子间作用力与Au原子形成稳定的SPA-Au复合物的原理,对抗体进行固定,对SPA固定抗体的最佳温度及时间条件、抗体浓度、pH值等影响因素进行实验研究。结果包被SPA宜于采用低温、长时间的包被方式,进行抗体固定的抗体溶液最佳浓度5mg/ml,pH值7.2。结论采用SPA法在石英晶体表面进行抗体固定操作简单、省时,是压电免疫传感器抗体固定的有效方法。