孕妇血浆和血清中胎儿DNA在产前诊断中的应用

长久以来许多学者致力于研究利用孕妇外周血中的胎儿细胞进行非创伤性产前诊断 ,虽然取得了一些重要进展 ,但母血中的胎儿细胞数量稀少 ,富集效率不高且价格昂贵 ,成为常规应用的主要障碍。母体血浆中存在较高浓度胎儿DNA的发现 ,为非创伤性产前诊断开辟了一个新途径。一、孕妇血浆和血清中的胎儿DNA肿瘤患者的血浆和血清中癌源性DNA的发现[1 ,2 ] ,激发了研究人员将血浆用于分子分析的兴趣。由于胎盘的滋养层和恶性肿瘤细胞的生物学行为类似 ,均有侵入性和致癌基因表达 ,故一些研究人员把胎盘喻为“假恶性物”[3] 。这就提示 :癌症患者…     

应用磁珠细胞分离仪从母血中分离胎儿细胞的研究

目的 研究利用免疫磁珠细胞分离仪分离孕妇血中胎儿细胞的效率。方法 孕妇血采自孕龄为21－40周，初孕的孕男性单胎正常孕妇16例。脐血来自胎龄38－40周的男性新生儿10例。标本根据CD71抗体的效价标记磁珠后效在磁场中进行磁珠细胞分离。分离后的脐血标本在流式细胞仪上检测分离效率，孕妇血标本经套式PCR方法鉴定男性SRY基因片段，根据CD71－FITC抗体效价标记脐血中的单个核细胞。同时利用流式细胞仪检测和分离脐血中的胎儿细胞。结果 利用磙珠细胞分离仪分离孕妇血中的胎儿有核红细胞，经套式PCR技术寻找男性胎儿SRY基因片段，经第一次扩增有效率87.5%，第二次扩增有效率100.0%。脐血中胎儿有核红细胞在分离前占53.2%－74.9%；分离后，流式细胞仪富集为99.2%－99.8％，免疫磁珠细胞分离仪富集为99.2%－99.8%，免疫磁珠细胞分离仪富集为97.3%-99.4%。结论 免疫磁珠细胞分离仪可富集到98.3%的胎儿有核红细胞，经套式PCR技术在分离后的孕妇血中可确定100％的男性胎儿SRY基因片段，项技术简单，价廉，高效更适用于临床。     

孕产妇用药 第七讲 神经精神系统药物在妊娠期的应用

１引言目前整个社会对药物的依赖性正在不断增加，除了现有的数以万计的药物之外，每年仍有数百种新药投放市场，而妊娠期妇女由于某些生理性反应和疾病等原因，需要使用药物进行治疗和处理。因此，妊娠期的合理用药对预防新生儿出生缺陷无疑是十分重要的。本讲根据美国食品和药品管理局（FoodandDrugAdministration，FDA）颁布的药物对妊娠危险性的５类分级标准（A、B、C、D、X，危险性依次递增，详见本刊２００２年第６期第３７２页），主要介绍神经精神系统药物在妊娠期的应用，供临床参考。２主要作用于中枢神经系统的药物２．１沙…     

母血清及血浆中胎儿游离DNA的研究进展

发现母血浆及血清中胎儿游离DNA,为无创性产前诊断技术开辟新途径.利用母血中有男胎睾丸确定基因(SRY)特异性序列确定胎儿DNA存在.用PCR技术扩增SRY的单拷贝序列(DYS14),确定性别敏感性60%～100%.利用实时定量PCR技术测定母血清和血浆中胎儿DNA浓度,妊娠7周母血清中可确定胎儿DNA,随妊娠周增加胎儿DNA量也增高.另证明非整倍体核型胎儿在母血浆中的DNA浓度高于正常核型胎儿,母血浆中定量测定胎儿游离DNA技术可能成为筛查染色体非整倍体核型胎儿的一种手段.     

应用酚提取法纯化孕妇血浆及血清中胎儿游离DNA

目的：应用酚提取法以提高纯化孕妇血中胎儿DNA的浓度，并应用套式PCR技术确定男性胎儿SRY基因的存在。方法：孕妇血浆和血清5-10ml采自孕龄为7-38周孕1产0的孕妇26名。其中孕男性单胎正常孕妇18名，孕女胎正常孕妇8名。加入等体积的苯酚：氯仿：异戊醇抽提，并经冰浴离心，所得DNA应用套式PCR技术确定男性胎儿SRY基因的存在。结果：血浆标本在第1次PCR扩增后有12名出现351bp的阳性一扩增带。其余6名在第2次扩增后出现254bp的阳性扩增带。第1次扩增确定性别的准确率是72.2%，第2次扩增是100%。血肖标本在第1次扩增后有9名出现351bp阳性扩增带，第2次有16名出现254bp阳性扩增带。第1次扩增确定性别的准确率为50%，两次准确率共为88.9%。同时对2例X-连锁遗传病患者（假性肥大性肌营养不良症和无汗性外胚层发育不良症的患者）进行了产前性别判断。结论：单纯应用酚提取的方法也可以纯化孕妇血浆及血清中胎儿游离DNA的浓度，可以应用较大量的孕妇血浆及血清进行DNA提取，以获得较高胎儿DNA的浓度。加用套式PCR使确定胎儿性别的准确率得到提高。提示可用此方法对有X-连锁遗传病家族史的患者进行产前性别判断 。     

妊娠期糖尿病视网膜病变

妊娠期糖尿病分3种类型：（）在原有糖尿病的基础上妊娠,多见于胰岛素依赖型糖尿病（insulindependentdl－。beMcmmlus,IDDM）妇女;（2）妊娠前为隐性糖尿病,在妊娠后进展为临床糖尿病;（3）妊娠后新发糖尿病。IDDM又简称1型糖尿病,发病年龄多在30a以前,如果是女性患者,正是生育年龄阶段。近年来的一些研究发现,姓娠可以促使IDDM妇女发生视网膜病变或原有视网膜病变进展、加重。据报告「］‘,IDDM妇女妊娠前无视网膜病为者,妊娠期视网膜病变的发生率为16％～25％;妊娠前已存在视网膜病变者,妊娠期视网膜病变进展率为30…     

妊娠高血压综合征诊断与治疗的适宜技术

妊娠高血压综合征(妊高征)(Pregnancy Induced Hypertension)发病非常普遍,与出血、感染一起构成了致命的三大妊娠合并症,成为孕产妇死亡的主要原因之一。据估计全世界每年因子痫而死亡的妇女大约有5万(Duley,1992)。这种死亡在发达国家并不多见,可能与普遍的良好的产前检查和治疗有关。在我国特别是边远地区,妊高征     

原瓶传代培养应用于羊水产前诊断中的研究

目的 应用原瓶传代培养的方法于经典的产前诊断的羊水培养方法中，以探讨建立提高培养成功率的方法。方法与结果 于羊水培养10天左右作原瓶传代培养，实验组（原瓶传代）105例，培养成功率100％，对照组（经典培养方法）120例成功率92％。结论 结果提示，原瓶传代培养可提高成功率至100％，并可获得满意的核型以供分析，确保了羊水产前诊断的准确性及临床应用性。