胶体金免疫层析试验检测乙肝两对半时HBsAg假阴性结果的处置

目的胶体金免疫层析试验(GICA)检测乙肝两对半时,对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)结果疑似假阴性的标本分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和时间分辨荧光分析法(TRFIA)定量试验进行HBsAg检测,并用抗体中和确认试验进行确认,以获得一个处理GICA检测HBsAg产生假阴性结果的可靠方法。方法 2014年1月至2015年2月用GICA检测乙肝两对半的标本3 078例,选取其中结果为单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc),或单乙型肝炎e抗体(抗-HBe)为阳性,或抗-HBc和抗-HBe同为阳性,而HBsAg、乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)均为阴性的标本86例,分别用ELISA和TRFIA检测其HBsAg,对检测为阳性的标本进行抗体中和确认试验确认。结果 86例标本经抗体中和确认试验确认阳性的为35例;ELISA检出阳性标本28例,其中2例为假阳性;TRFIA检出阳性标本35例与抗体中和确认试验符合率100%。结论 GICA检测乙肝两对半时,对HBsAg结果疑似假阴性的标本可选用TRFIA进行复查确认。     

呼吸训练治疗脑瘫患儿构音障碍的疗效观察

目的:观察呼吸训练治疗脑瘫患儿构音障碍的临床疗效。方法:将72例脑瘫伴有构音障碍的患儿随机分为观察组和对照组各36例,由治疗师采取一对一的方式,在隔音理想、宽敞的环境下进行康复训练。2组均进行常规康复治疗:构音训练、口部运动训练、韵律训练;观察组在此基础上加用呼吸放松训练、呼吸控制训练、言语呼吸训练等呼吸训练。分别在治疗前后采用中康版构音评价法中50词语语音清晰度表进行评估,通过统计构音异常纠正情况以进行疗效评定;采用自制构音清晰度表对2组患儿进行声母、韵母及声调检查,以观察其音位习得率及言语清晰度变化。结果:治疗3个月后,观察组患儿声母、韵母、声调音位习得率及言语清晰度均较治疗前明显提高(均P0.05),对照组患儿声母、韵母音位习得率及言语清晰度均较治疗前明显提高(均P0.05),但声调音位习得率与治疗前比较差异无统计学意义;且治疗后观察组患儿声母音位习得率、声调音位习得率及言语清晰度明显优于对照组(均P0.05)。治疗后,2组临床疗效比较,观察组总有效率显著高于对照组(P0.01)。结论:呼吸训练治疗脑瘫患儿构音障碍疗效显著。     

PPARγ激动剂对RSV感染的A549细胞MCP-1、MIP-1α、IL-8表达的作用及机制

目的研究A549细胞呼吸道合胞病毒(RSV)感染不同时间后单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、白介素-8(IL-8)在mRNA和蛋白水平的变化,进一步观察15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)和罗格列酮干预后MCP-1、MIP-1α、IL-8 mRNA表达和蛋白水平的变化,探讨PPARγ激动剂对RSV感染趋化因子表达的影响及机制。方法建立RSV感染的细胞模型,将传代培养的细胞随机分成6组:A组(15d-PGJ2+RSV组)、B组(罗格列酮+RSV组)、C组(RSV组)、D组(PDTC+RSV组)、E组(PPARγ拮抗剂GW9662+罗格列酮+RSV组)、F组(细胞对照组),各组分别在培养12、24、48h收获细胞及上清液待测。应用ELISA检测MCP-1、MIP-1α、IL-8蛋白水平,实时定量RT-PCR检测MCP-1、MIP-1α、IL-8 mRNA表达。结果 C组与F组相比,MCP-1、MIP-1α、IL-8 mRNA及蛋白的表达均在12h开始升高,其中mRNA表达在24h达高峰,48h有所下降,与12h比较差异无统计学意义(P均>0.05);而蛋白表达在48h达高峰,与12h比较差异有统计学意义(P均<0.05);D组各时间点3种趋化因子蛋白和mRNA表达均明显低于C组(P均<0.05),但仍高于F组(P均<0.05)。A组、B组与C组相比,各时间点MCP-1、MIP-1α、IL-8蛋白及mRNA表达均明显降低(P均<0.01);E组与C组3种趋化因子蛋白及mRNA表达的差异无统计学意义,但仍高于F组(P均<0.05)。结论 RSV感染可导致MCP-1、MIP-1α、IL-8 mRNA及蛋白表达升高;15d-PGJ2、罗格列酮均可抑制上述作用,其作用可被GW9662所阻断;PPARγ激动剂的作用机制与抑制NF-κB通路激活有关。     

病毒性心肌炎与血清可溶性白介素-2受体和肿瘤坏死因子-α活性变化的观察

本组通过双抗体夹心ELISA法,检测病毒性心肌炎急性期52例、恢复期42例、慢性期18例血清可溶性白介素-2受体(sIL-2R)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性,探讨其在发病中的作用。结果显示:sIL-2R在急性期、慢性期显著升高(P<0.001),恢复期与对照组无显著差别;TNF-α在急性期、恢复期、慢性期均高于对照组,且以急性期为显著(P<0.001)。提示sIL-2R、TNF-α参与心肌炎发病的全过程,其sIL-2R的变化与转归有关;而慢性患儿的sIL-2R、TNF-α活性增高,是否与发展为扩张性心肌病有关,需待进一步研究。     

分离培养人外周血CD4+CD25-T细胞及其生物学特性研究

目的:分离培养人外周血CD4 CD25-T细胞,并鉴定其生物学特性。方法:设对照组(A组)、LPS组(B组)、LPS 抗TGF-β1mAb组(D),用Percoll不连续密度梯度离心与免疫磁珠法,分离培养健康人外周血CD4 CD25-T细胞。用光镜及电镜观察其形态特征,台盼蓝试验检测其活力,流式细胞术(FCM)鉴定其纯度。体外培养4h、3d及5d后,用FCM检测CD4 CD25 T细胞的阳性率,ELISA法检测培养上清中TGF-β1的浓度,RT-PCR法检测细胞中叉状头/翼状螺旋转录因子(FOXP3)mRNA的表达。结果:(1)光镜下观察分离的CD4 CD25-T细胞主要为小体积细胞,电镜下观察细胞核呈圆形,染色质致密。体外抗人CD3/CD28mAb刺激培养的CD4 CD25-T细胞体积逐渐增大,胞质较丰富,电镜下观察细胞核呈椭圆形或肾型,染色质较稀疏。(2)FCM检测CD4 CD25-T细胞纯度达91.5%～96%。台盼蓝试验检测分离前后活细胞数无统计学意义(P>0.05)。(3)FCM检测表明,B5d组为CD4 CD25 T细胞的阳性率为(55.99±1.42)%与A5d组相比较有统计学意义(P<0.01);D5d组CD4 CD25 T细胞的阳性率为(1.99±0.83)%与A5d组的阳性率(1.29±0.04)%相比较无统计学意义。(4)ELISA测定表明,培养液中TGF-β1的浓度,B3d组为(1.60±0.09)μg/L、B5d组为(1.83±0.14)μg/L,分别与A3d组为(0.35±0.04)μg/L、A5d组为(0.33±0.08)μg/L相比较,均有统计学意义(P<0.01);而D3d、D5d组与A3d、A5d组相比较均无统计学意义。(5)RT-PCR检测表明,FOXP3mRNA的表达:以β-actin的A值作为内参照,B3d组为(0.84±0.07)、B5d组为(1.85±0.24)分别与A3d组(0.05±0.02)、A5d组(0.04±0.02)相比较,均有统计学意义(P<0.01);而D组与A组的各个组间相比较均无统计学意义。(6)LPS诱导的人外周血中CD4 CD25-T细胞培养液上清中TGF-β1的水平与该细胞中FOXP3mRNA的表达呈显著的正相关(r=0.812,P<0.01)。结论:用Percoll不连续密度梯度离心与免疫磁珠法体外分离培养的人外周血CD4 CD25-T细胞的活力及纯度较理想;LPS诱导的CD4 CD25-T细胞中FOXP3mRNA的表达,可能与TGF-β1有关。     

中青年脑梗死64例病因分析

近年国内文献报道 ,中青年脑梗死发病率呈逐年上升趋势 ,现将我科 1 998～ 1 999年 5月住院中青年脑梗死患者 64例 ,临床分析如下。1 临床资料一般资料　依据第四届全国脑血管病学术会议修订标准 ,本组 64例患者经头颅ＣＴ、ＭＲＩ等确诊为脑梗死。年龄 2 3～ 4 9岁 ,平均 37.7岁 ,4 9～ 4 0岁 35例 ,39～ 30岁 1 4例 ,2 9～ 2 3岁 5例。其中男 4 8例 ,女 1 6例 ,初发脑梗死 60例 ,再发 4例。既往有高血压病史 31例。有糖尿病例 7例 ,吸烟者 4 5例 ,大量饮酒者 1 2例 ,5例在急性酒精中毒 2 4小时内起病 ,心脏病 6例 (风心病并房颤 2例 ,甲…     

儿童呼吸道疾病流行病学调查分析

为了解儿童常见呼吸道疾病的发病情况,为防治提供依据,以随机、分层、不等比、整群抽样方法,调查温州市4个街道内0～14岁儿童10293名。结果:实际接受调查人数9947名。毛细支气管炎(简称毛支)、哮喘、反复呼吸道感染(RRI)、慢性咳嗽的患病率及饲养宠物猫或狗的比例分别为6.00％、1.24％、8.16％、3.31％与10.93％,其中16.08％的毛支患儿发展为哮喘;既往被诊断为哮喘或喘息性支气管炎的比例为4.51％,与本次调查确诊的患病率差异有显著性(X2=191.30,P<0.01);哮喘、RRI、慢性咳嗽在各年龄组患病率差异均有显著性(X2=60.45～148.64,P<0.01),以幼儿组、学龄前组为高(P<0.0045)。提示毛支与哮喘有密切相关性,诊断哮喘要严格掌握诊断标准,防止扩大化。呼吸道疾病流行情况的资料为今后群防群治和相关研究提供依据。     

间接免疫荧光法检测咽拭麻疹病毒抗原研究

目的 探讨采用间接免疫荧光法(IFA)检测咽拭子麻疹病毒抗原对儿童麻疹病毒(MV)感染的诊断价值。方法 对78例临床怀疑麻疹的患儿，进行咽试子IFA麻疹病毒抗原检测及血清ELISA法MV-IgM检测，比较两种方法的检测结果；对部分患儿短期随访．分析IFA的临床应用价值。结果 诊断为典型麻疹55例，不典型麻疹17例，其他出疹性疾病6例典犁麻疹组IFA、ELISA阳性检出率分别为96％、58％；不典型麻疹组为100％、59％；非麻疹组阴性检出率为100％。IFA的敏感度为97％，特异度为100％。结论 IFA咽拭子MV抗原检测方法是一种快速、敏感、特异的检测方法。     

有益健康模型的研究进展

回顾了有益健康模型的发展史,分析了有益健康模型与健康促进之间相辅相成的关系,介绍了有益健康模型的核心理论以及研究工具,展望了有益健康模型在护理领域中的运用。     

哮喘大鼠IKK/NF-κB信号通道与抗氧化性的关系及银杏叶提取物的调控

目的:探讨哮喘大鼠IKK/NF-κB信号通道与丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）的关系及银杏叶提取物（Egb）的调控。 方法:36只SD雄性大鼠随机分为正常组（C组）、哮喘组（A组）、Egb组（E组）。用原位杂交法和免疫组化检测肺组织IκB激酶mRNA（IKKβ mRNA）及核转录因子（NF-κB）P65亚基活性；硫代巴比妥酸法和二硝基苯甲酸法测定血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）中的MDA和GSH的浓度。 结果:A组肺组织IKKβ mRNA及NF-κB P65表达均显著高于C组（均P＜0.01），E组则均显著低于A组（均P＜0.01）；A组血清及BALF中MDA浓度显著高于C组（均P<0.01），E组则显著低于A组（均P<0.01）；A组血清及BALF中GSH的浓度显著低于C组（均P<0.01），E组则显著高于A组（均P<0.01）。 结论:哮喘大鼠肺组织IKKβ mRNA、NF-κB P65表达显著增强，与抗氧化性降低有关，Egb能有效抑制IKK/NF-κB信号通道。