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目的 获得大量具有生物活性的人成熟β细胞素(BTC)蛋白.方法 以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,PCR扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,并按读框克隆入原核细胞表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a(+)-hBTC.重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导及亲和层析法纯化获得融合蛋白,运用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.以不同浓度BTC连续5 d作用于NIH3T3细胞,MTT比色法检测细胞增殖能力.结果 融合蛋白以水溶性形式分泌于大肠杆菌BL-21胞浆中,其作用于NIH3T3细胞可明显促进细胞增殖.结论 人成熟BTC蛋白在pET32a(+)表达系统中得到高效表达,所纯化蛋白具有促进NIH3T3细胞体外增殖的作用. 相似文献
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目的 研究糖化终末产物（advanced glycation end products, AGEs）对人结肠癌HCT116细胞中碳水化合物反应元件结合蛋白（carbohydrate responsive element binding protein, ChREBP）表达的影响。方法 采用RT-PCR检测AGEs处理的人结肠癌HCT116细胞中ChREBP及其下游基因的表达;使用N-乙酰半胱氨酸（NAC）干预氧化应激状态;运用Western印迹法观察在HCT116细胞中AGEs诱导对ChREBP表达的影响;运用MTS比色法观察AGEs诱导对HCT116细胞增殖的影响。结果 AGEs刺激后人结肠癌HCT116细胞中转录因子ChREBP表达增加（P<0.05）;细胞经抗氧化剂NAC处理后,AGEs刺激所致ChREBP表达增加和HCT116细胞增殖均被明显抑制（P<0.05）。结论 AGEs通过激活氧化应激反应来上调人结肠癌HCT116细胞中的ChREBP表达。 相似文献
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甲状腺功能减退患者心率变异性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
心率变异性 (ＨＲＶ)已用于无创伤检测各种心血管疾病时交感迷走神经之间的相互作用〔1〕,评估药物疗效和疾病预后〔2 ,3〕。甲状腺功能减退 (甲减 )时常有心血管系统功能异常的表现 ,但对甲减的自主神经活性状态研究甚少。本研究通过分析甲减患者ＨＲＶ ,测定其交感神经和迷走神经活性 ,并观察甲状腺素替代治疗后的反应。一、对象和方法1.研究对象 :(1)甲减组 :甲减患者 35例 ,其中男性 8例 ,女性 2 7例 ,年龄 (4 9.7± 12 .7)岁。均符合甲减临床和实验室诊断依据 :乏力 ,畏寒 ,食欲减退 ,便秘 ,贫血 ,体重增加。血清游离Ｔ3(ＦＴ3) <0 .9… 相似文献