酵母双杂交筛选与ANGPTL5相互作用的蛋白实验研究

目的采用Clontech公司酵母双杂交系统,筛选与血管生成素样蛋白5（ANGPTL5）相互作用的蛋白。方法将ANGPTL5基因克隆到诱饵载体pGBKT7,在证实ANGPTL5蛋白不具有自激活作用的前提下,在人HeLa细胞cDNA文库中,以酵母双杂交系统筛选与ANGPTL5相互作用的蛋白,并进行相互作用的验证。结果成功构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-ANGPTL5,筛选出2种蛋白与ANGPTL5相互作用,即SNARE相关蛋白（SNAPIN）和ZW10相互作用蛋白（ZWINT）。结论运用酵母双杂交技术,从人Hela细胞cDNA文库中成功获得2个与ANGpL5相互作用的蛋白质,为研究ANGPTL5的功能提供了新的线索。     

人BTC蛋白表达及生物学活性鉴定

目的获得大量具有生物活性的人成熟β细胞素(BTC)蛋白。方法以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,PCR扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,并按读框克隆入原核细胞表达载体pET32a( )中,构建重组质粒pET32a( )-hBTC。重组质粒转化大肠杆菌BL21,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导及亲和层析法纯化获得融合蛋白,运用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。以不同浓度BTC连续5 d作用于NIH3T3细胞,MTT比色法检测细胞增殖能力。结果融合蛋白以水溶性形式分泌于大肠杆菌BL-21胞浆中,其作用于NIH3T3细胞可明显促进细胞增殖。结论人成熟BTC蛋白在pET32a( )表达系统中得到高效表达,所纯化蛋白具有促进NIH3T3细胞体外增殖的作用。     

上海宝山地区人群糖尿病调查及其危险因素分析

目的调查上海宝山地区40岁以上人群糖尿病的发病情况并分析其危险因素。方法社区征集2 997例样本,分别进行问卷调查、体格检查和生化检测。χ2检验分析糖尿病可能的危险因素在患病组与正常组间的差异;多因素非条件Logistic回归分析建立危险因素方程。结果上海宝山地区40岁以上人群糖尿病患病率男性为7.3%,女性为6.7%,且患病率随年龄增长而增高(P<0.05)。高龄、腹型肥胖、高血压、高脂血症和糖尿病家族史均被列入Logistic回归模型。对于女性,产巨大胎儿史被列入女性分组中的Logistic回归模型。结论本组资料调查提示,糖尿病患病率在中老年人群中较高,且男性高于女性。高龄、腹型肥胖、高血压、高脂血症、糖尿病家族史和产巨大胎儿史为糖尿病患病的独立危险因素。     

2型糖尿病患者尿蛋白水平与血尿酸的关系

目的 分析影响2型糖尿病患者尿蛋白水平的相关临床危险因素,探讨尿蛋白水平与血清尿酸的关系.方法 采用回顾性病例对照研究,收集2012年1月-2020年5月在上海交通大学附属新华医院内分泌科住院就诊的2型糖尿病患者共1 998例,分析患者的实验室生化指标及临床相关检查,并采用多因素Logistic回归模型,探讨影响尿蛋白...     

孕期甲亢怎么办

小杨长得眉清目秀,但年已29却还来寻得如意郎君。后经大学同学介绍,与某报社的一位编辑情投意合,两人很快就谈婚沦嫁。 结婚不久,小两口便盘算着生一个孩子,因为年龄都不小了。而且小杨听别人说,女人年过30生孩子,想恢复身材就有些困难。     

妊娠期一过性尿崩症一例

患者,女,39岁。因烦渴、多饮、多尿2个月,停经32周。患者于入院前2个月出现烦渴、多饮、多尿,症状逐渐加重,至入院时每日饮水10000ml左右,每半小时左右即排尿一次,每日总尿量8000～10000ml,尿色清,无尿急、尿痛。无头痛、视力下降等症状。患者起病后胃纳略有降低,体重减轻5kg,因夜间频繁排尿而睡眠不佳。患者于32周前停经,产科诊为“G1P0,孕32周”。既往未生育,此次为第一次妊娠。否认头部外伤、手术及放射线照射史,否认脑炎、脑膜炎、肝病及高血压史。家族中无尿崩症患者。入院体检:体温36.5℃,呼吸18次/min,脉搏80次/min,血压130/70mmHg…     

人PDX-1基因真核表达载体的构建及表达

目的 构建人胰十二指肠同源盒(PDX-1)基因的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达.方法 以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增PDX-1基因编码区的全部序列,克隆入真核细胞表达载体pcDNA3.1中,经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定目的基因.序列正确的重组质粒用脂质体转染NIH3T3细胞,Western blot观察基因表达情况.结果 PCR扩增的特异性片段长度为852 bp,以此构建的重组质粒pcDNA3.1-PDX-1, 经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后显示5.5 kb和 850 bp左右的两条片段,测序结果与GenBank中的人PDX-1基因cDNA(GenBank 序列号NM_000209)序列一致.证明PDX-1基因已成功克隆到了真核细胞表达载体pcDNA3.1 中.Western blot证实pcDNA3.1-PDX-1转染NIH3T3细胞24 h后有PDX-1的表达.结论 成功构建了pcDNA3.1-PDX-1重组真核表达载体,并在NIH3T3细胞中表达.     

上海宝山地区人群糖尿病调查及其危险因素分析

目的 调查上海宝山地区40岁以上人群糖尿病的发病情况并分析其危险因素.方法 社区征集2 997例样本,分别进行问卷调查、体格检查和生化检测.x2检验分析糖尿病可能的危险因素在患病组与正常组间的差异;多因素非条件Logistic回归分析建立危险因素方程.结果 上海宝山地区40岁以上人群糖尿病患病率男性为7.3%,女性为6.7%,且患病率随年龄增长而增高(P＜0.05).高龄、腹型肥胖、高血压、高脂血症和糖尿病家族史均被列入Logistic回归模型.对于女性,产巨大胎儿史被列入女性分组中的Logistic回归模型.结论 本组资料调查提示,糖尿病患病率在中老年人群中较高,且男性高于女性.高龄、腹型肥胖、高血压、高脂血症、糖尿病家族史和产巨大胎儿史为糖尿病患病的独立危险因素.     

非酒精性脂肪性肝病患者的炎症细胞因子 水平与氧化应激参数的变化

目的观察非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)患者血清炎症细胞因子水平与 氧化应激参数的变化。方法检测182例新诊断的NAFLD患者和50例健康个体的血清TNF-ouILA、丙二醛 (malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD)及相关生化指标,肝/脾CT比值,用稳态 模型评估暖岛素抵抗指数（homeostasis model assessment of insulin resistance, HOMA-IR)。结果与健康对照组比 较,NAFLD 患者血清 TNF-α、IL-6、MDA、餐后 2 h 血糖（2 h postprandial blood glucose, 2hBG)、空腹肢岛素（fasting insulin,只奶）、餐后2 11胰岛素（2111阳）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C)、三酰甘油（TG、尿酸 (UA)、游离脂肪酸（FFA)、超敏C反应蛋白（hsCRP)、丙氨酸转氨酶（ALT)、天冬氨酸氨基转移酶（AST)、γ-谷氨 酰转肽酶（GGT)以及体质量指数（BMI)、HOMA-IR均明显升高（均<P<0.05),而血清SOD和肝/脾CT比值明显 降低（均P<0.01)。NAFLD组患者血清TNF-α和IL-6水平均与HOMA-IR、FFA、TG、BMI、2hINS呈正相关（P<0.05),而血清MDA水平与ALT、AST呈正相关（P<0.01),血清SOD水平则与ALT呈负相关（P<0.01)。结论NAFLD患者的炎症细胞因子水平与氧化应激参数明显升高,合并更多的代谢指标异常。     

转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白研究进展

碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)是一种重要的转录因子,它直接调节肝脏糖酵解及脂肪合成。ChREBP调控葡萄糖利用及转化为脂肪过程中大量基因的表达。在ob/ob小鼠肝细胞特异性敲除ChREBP基因后能明显改善其脂肪肝及胰岛素抵抗。阐明ChREBP对糖脂代谢的调控机制及其生物学功能,将有望为肥胖、糖尿病等代谢综合征的干预治疗提供新的思路。此文对ChREBP的结构特征、调控机制、生物学功能及其与疾病的关系等最新进展进行综述。