RNAi人端粒酶逆转录酶基因腺病毒表达载体的构建及对肾癌细胞生长的抑制作用

目的 构建表达端粒酶逆转录酶(hTERT)基因小干扰RNA(siRNA)腺病毒载体,观察其对肾癌细胞系Ketr-3生长抑制作用.方法 将病毒Ad-hTERT体外感染人肾癌细胞系Ketr-3,分别用结晶紫染色、噻唑蓝(MTT)法检测其对细胞生长的影响,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定hTERT基因mRNA的表达水平,免疫组织化学检测hTERT抗原的表达.结果 结晶紫、MTT结果表明:在MOI=50时,Ad-hTERT感染的Ketr-3细胞发生明显病变;MOI=50的Ad-hTERT感染Ketr-3细胞后,在第3、5、7天细胞存活率分别为(92.3±1.2)%、(82.0±1.0)%和(72.0±1.0)%,与对照组比较差异有统计学意义(P《0.05);RT-PCR结果表明:病毒Ad-hTERT感染Ketr-3细胞3d后,hTERT mRNA表达是对照组的(50.5±1.7)%,差异有统计学意义(P《0.01);免疫组织化学结果表明:Ad-hTERT处理组的hTERT抗原表达较对照组显著减少.结论 转录hTERT基因siR-NA的重组腺病毒载体为肾癌基因治疗提供了新的工具.     

吗啡布比卡因对前列腺术后镇痛的疗效

目的：观察吗啡、布比卡因用于硬膜外自控镇痛（PCEA）在前列腺术后的镇痛效果。方法：21例前列腺切除患者术后以吗啡、布比卡因进行PCEA治疗，取一般情况与PCEA组类似的24例前列腺患者后行常规镇痛，术后以疼痛视觉模拟评分（VAS）间接评估镇痛，记录膀胱痉挛发生情况。结果：PCEA组术后VAS评分及控制膀胱痉挛的发生明显优于常规镇痛组。结论：吗啡、布比卡因通过PCEA技术用于前列腺术后镇痛、效果确切、简单方便、用药量小、副作用少、有利于术后恢复。     

Fas配体诱导淋巴细胞凋亡与肾癌免疫攻击作用

目的　探讨Fas配体 (FasL)诱导淋巴细胞凋亡与肾癌免疫攻击作用的关系。　方法　采用免疫组化技术检测 4 4例肾癌组织FasL表达及肿瘤周围浸润淋巴细胞 (TIL)凋亡情况 ,并应用肾癌细胞株 786 0、GRC 1与JurkatT淋巴细胞共培养检测T细胞凋亡率。SP法检测Ki6 7表达 ,评价肾癌预后。　结果　 (1) 4 4例肾癌组织FasL表达阳性率 4 6 .5 % ,高于正常肾组织的 2 3.2 % ,差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。随肾癌分期增加 ,FasL表达阳性率增加。肾癌FasL表达率与Ki6 7表达率呈显著正相关 (r =0 .93,P <0 .0 1)。 (2 )肾癌组织TIL凋亡率为 33.9% ,高于正常肾组织的3.5 % ,差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。肾癌FasL表达率与TIL凋亡率呈显著正相关 (r =0 .96 ,P <0 .0 1)。 (3) 786 0FasL表达率 18.6 % ,GRC 1表达率 2 .3% ,二者差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。Ju rkat细胞与 786 0细胞共培养的凋亡率 14 .9% ,与GRC 1共培养的凋亡率 1.3% ,二者差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。中和抗体NOK 2中和 786 0细胞FasL后 ,与之共培养的Jurkat细胞凋亡率显著减少 (P <0 .0 1)。　结论　肾癌组织FasL表达增高 ,以此诱导淋巴细胞凋亡 ,实现对宿主的免疫攻击。     

尿流动力学检查在女性压力性尿失禁治疗中的临床价值

目的探讨尿流动力学检查在女性压力性尿失禁中的临床价值。方法采用无张力阴道吊带术治疗36例女性压力性尿失禁。29例患者术前进行尿流动力学检测,并与术后其中19例患者尿流动力学检测数据对比。结果 36例患者手术后主观症状均明显改善,其中主观治愈32例。尿流动力学检测指标中最大尿流率、排尿时最大逼尿肌压和腹压漏尿点压力在治疗前后有明显改变（P〈0.05）。结论该法治疗女性压力性尿失禁是一种安全有效的方法;尿流动力学检查对女性压力性尿失禁明确诊断分类、选择治疗方法具有重要意义。     

细胞荷载溶瘤病毒

溶瘤病毒是一类仅在肿瘤细胞内特异增殖的新型病毒载体,具有高度的肿瘤靶向性和良好的转染率.局部注射溶瘤病毒治疗体表肿瘤已获得显著疗效,但全身应用后机体的免疫防御机制明显限制了溶瘤病毒的治疗效果.细胞荷载溶瘤病毒可能是克服这一瓶颈的有效策略,为治疗肿瘤提供了新的平台.     

125I偶联反义核酸对裸鼠肾癌移植瘤的治疗作用

目的观察125I偶联Ki67基因反义核酸(ASODNs)对裸鼠肾癌移植瘤的治疗作用.方法合成ki67基因ASODNs,氯胺-T法125I偶联ASODNs(125I-ASODNs).BALB/c种系裸鼠接种人肾癌786-0细胞.125I-ASODNs治疗组12只瘤体注射125I-ASODNs 0.1 ml(7.4 MBq/L、10 nmol),ASODNs治疗组12只瘤体注射ASODNs 0.1 ml(10 nmol),连续4 d.治疗后第3、6、12 d每组分别处死小鼠4只,取瘤组织检测肿瘤体积,免疫组化、Western blot技术检测Ki67表达,免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡率.结果125I-ASODNs组治疗后3、6、12 d小鼠肿瘤体积分别为(51.8±13.7)、(76.1±22.9)、(636.9±73.8)mm3,与ASODNs处理组(70.3±18.9)、(185.7±37.7)、(868.9±128.2)mm3比较,差异有统计学意义(P<0.01);Ki67抗原表达率分别为(16.5±2.1)、(20.8±1.0)、(28.6±2.4)%,ASODNs组为(26.8±2.3)、(29.2±1)、(33.6±2.6)%,Ki67蛋白量比分别为(54.8±2.6)、(58.6±2.9)、(63.9±3.5)%,与ASODNs组(72.6±5.1)、(79.7±3.4)、(85.7±4.4)%比较差异有统计学意义(P<0.01);肿瘤细胞凋亡率分别为(22.6±2.0)、(24.9±2.0)、(27.7±2.2)%,与ASODNs组(15.1±1.6)、(17.8±1.9)、(18.3±2.3)%比较差异有统计学意义(P<0.01).结论125I-ASODNs比ASODNs具有更强的抑制裸鼠肾癌移植瘤生长及促进凋亡作用.     

Ki67基因短发夹状RNA表达载体对肾癌细胞生长的抑制作用

目的研究针对Ki67基因的短发夹状RNA(shRNA)表达载体pSilencer-Ki67对人肾癌细胞生长的抑制作用。方法将pSilencer-Ki67转染人肾癌786-0细胞,24、48、72、120、144 h后分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot技术检测Ki67 mRNA、蛋白表达,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,原位末端标记法检测细胞凋亡。结果pSilencer-Ki67转染后48 h 786-0细胞Ki67mRNA表达(34．1±1．7)%、蛋白表达(42．6±1．7)%降低最明显,与空质粒对照组[(97．7±0．9)%、(97．3±1．6)%]比较差异均有统计学意义(P＜0．01)。pSilencer-Ki67处理后48 h细胞增殖抑制率(76．7±3．2)%最高,72 h凋亡细胞阳性率(74．3±5．9)%最高,与空质粒对照组[(7．0±0．5)%、(8．4±1．1)%]比较差异有统计学意义(P＜0．01)。pSilencer-Ki67的这些作用可持续144 h。结论pSilencer-Ki67能有效、持续抑制人肾癌786-0细胞生长,有望成为肾癌基因治疗的有效工具。     

开放和微创对高危大体积前列腺增生合并膀胱结石的同期治疗比较研究

目的 比较开放与微创两种方法对高危巨大前列腺增生合并膀胱结石的同期治疗临床效果.方法 高危巨大前列腺增生合并膀胱结石患者77例,其中膀胱切开取石同时前列腺剜除术49例,同期气压弹道碎石加前列腺电切术28例.对比分析两组治疗的临床资料及随访结果,比较两组的治疗效果.结果 两组患者均一次手术成功.与微创组比较,开放手术组手...     

标准盆腔淋巴结清扫术在膀胱癌根治术中的应用研究

目的探讨标准盆腔淋巴结清扫术在膀胱癌根治术中的应用价值。方法回顾研究2008-2012年间徐州医学院附属医院行全膀胱根治性切除术加标准盆腔淋巴结清扫的79例膀胱癌患者的临床资料,其中男69例,女10例。初发53例,复发26例;临床分期：TO～T16例,T241例,1322例,T410例;病理分级：G110例,G240例,G329例;病理分类：尿路上皮癌69例,腺癌4例,鳞状细胞癌4例,膀胱小细胞癌2例。79例均行膀胱癌根治术及标准的双侧区域盆腔淋巴结清扫术。结果79例清扫手术平均时间47min。平均出血量20ml,术中未发生重要血管及神经损伤。清扫淋巴结数目4—31枚,平均16枚,淋巴结阳性率为15．2％（12／79）。术后随访5～52个月,中位时间32个月,死亡13例（16．45％,13／79）,总体生存率为83．5％（66／79）。从临床分期分析,仍、T4期3年生存率分别为66％、40％（P〈0．05）。从不同组织学分级分析,G2、G3级3年生存率分别为90％、57％（P〈0．05）,其中淋巴结阳性患者3年生存率为50．6％,阴性患者为87．2％（P〈0．05）。结论膀胱癌根治术中行标准的双侧盆腔淋巴结清扫能提高分期准确性和患者生存率,无严重并发症,是一种安全、有效的手术方式。     

B超引导下经皮肾镜碎石清石术治疗肾铸型结石疗效分析

目的探讨B超引导下经皮肾镜碎石清石术治疗肾铸型结石的临床疗效和安全性。方法回顾性分析2009年5月～2010年5月11例肾铸型结石患者采用B超引导下经皮肾镜碎石清石术治疗的临床资料。结果本组患者均顺利完成手术,无肾切除、肾穿孔等严重并发症出现,手术时间90～120min,出血〈100ml,均无输血;术后随访半年,肾功能均有不同程度改善。结论 B超引导经皮肾镜下使用EMSⅢ代碎石清石系统治疗肾结石具有损伤小、出血少、恢复快等优点,可以使多数患者避免开放手术。