咯利普兰对大鼠哮喘模型肺组织磷酸二酯酶及IL-4的影响

目的为阐明大鼠哮喘模型肺组织cAMP-PDE活性升高的相关原因和意义,研究了咯利普兰(rolipram,Rol)对大鼠哮喘模型的肺功能、肺组织中磷酸二酯酶(PDE)活性和IL-4含量的影响。方法采用卵白蛋白致敏后重复抗原攻击制备哮喘模型,测定肺功能,肺组织cAMP-PDE活性、PDE4的活性和IL-4含量,分类计数外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞。结果哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE及PDE4活性与正常对照组相比均升高(P<0·05),致敏后重复抗原攻击的哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE活性中PDE4活性比例较高,约占70%。Rol剂量依赖性增加哮喘大鼠肺顺应性,降低肺阻力,抑制增加的哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE和PDE4活性,降低肺组织IL-4含量。以Rol(1mg·kg-1,po)作用最明显。哮喘大鼠的肺组织cAMP-PDE和PDE4活性与IL-4存在相关性(P<0·05)。此外,Rol还能明显抑制哮喘大鼠BALF中和外周血炎症细胞数目,明显抑制BALF中多形核细胞及血中EOS的比例(P<0·05)。结论致敏后重复抗原攻击的哮喘大鼠肺功能明显恶化,肺组织IL-4含量、cAMP-PDE活性明显升高,其中cAMP-PDE活性中以PDE4为主,且cAMP-PDE活性、PDE4活性与肺组织中IL-4密切相关。Rol能有效抑制哮喘大鼠肺组织cAMP-PDE及PDE4活性的升高,降低IL-4含量,改善肺功能。     

大鼠急性肺损伤模型肺组织中磷酸二酯酶4活性的变化

目的观察磷酸二酯酶4(PDE4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和炎症细胞浸润在急性肺损伤过程中的变化规律,以及它们之间的相关性。方法脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI),高效液相法(HPLC)测定肺组织PDE4活性、ELISA法检测TNF-α含量,常规细胞形态学检测中性粒细胞在支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中的浸润变化。结果气道内滴入LPS,1 h后肺组织中PDE4活性开始增加,6 h达到峰值,与对照组相比(P<0.01),24 h后开始回落。支气管肺泡灌洗液(BALF)的白细胞总数和中性粒细胞数的变化与PDE4活性变化相关(r=0.83,P<0.05),2 h后开始增加,6 h达到峰值,48 h后回落接近滴入LPS前。肺组织匀浆的TNF-α含量在LPS滴入后迅速上升,2 h达到峰值,24 h后开始回落,其上升先于前两者。在LPS滴入6 h测定抗超氧阴离子自由基(O.2)和中性粒细胞髓过氧化酶(MPO)水平也明显上升。给予PDE4抑制剂RP73-401(piclamilast)后,肺组织中PDE4活性与TNF-α含量均下降,肺部炎症也得到改善,与损伤后6 h相比差异有显著性(P<0.01)。结论气道内滴入LPS后肺组织中PDE4活性迅速上升,并与TNF-α上升有一定的相关性,运用PDE4抑制剂后,二者水平均明显降低。PDE4和TNF-α升高可能诱导中性粒细胞聚集和过氧化反应的因素,提示PDE4抑制剂可能是一个治疗ALI的重要靶点。     

地西泮与咪达唑仑对离体大鼠子宫平滑肌收缩功能的影响

目的比较苯二氮艹卓类药物(BDZ)地西泮和咪达唑仑对孕和未孕大鼠子宫平滑肌收缩的影响是否不同。方法分离、制备孕和未孕SD大鼠子宫平滑肌条,采用累积给药法在浴槽内加入地西泮和咪达唑仑0.01~300μmol.L-1,MedLab生物信号采集系统记录给药前后子宫平滑肌收缩幅度和频率。结果地西泮和咪达唑仑对孕和未孕大鼠子宫平滑肌的收缩幅度均呈浓度依赖性抑制,且咪达唑仑的抑制作用明显较地西泮强。对于未孕大鼠,地西泮和咪达唑仑抑制子宫平滑肌收缩的IC50分别为280.6和1.1μmol.L-1。对于孕大鼠,地西泮与咪达唑仑抑制子宫平滑肌收缩的IC50分别为52.2和28.2μmol.L-1。地西泮对子宫平滑肌收缩频率的影响较小,而咪达唑仑在高浓度时能完全抑制子宫平滑肌的收缩。结论咪达唑仑对未孕及孕大鼠子宫平滑肌收缩幅度和频率的抑制作用强于地西泮,尤其是对未孕大鼠子宫平滑肌,为临床选择BDZ药物用于分娩提供了实验依据。     

吡拉米司特在大鼠急性肺损伤模型中降低PDE4活性与TNF-α/IL-10平衡有关

目的观察PDE4活性与TNF-α/IL-10平衡在脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤模型(ALI)中相互关系,探讨选择性磷酸二酯酶4抑制剂吡拉米司特(piclamilast)对ALI的作用及机制。方法脂多糖(LPS)诱导大鼠ALI模型,设对照组、模型组、吡拉米司特组(1、3、10mg.kg-1)和地塞米松组(1mg.kg-1),常规细胞形态学检测肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中中性粒细胞的浸润情况,比色法测定BALF中超氧阴离子自由基(O2.)和中性粒细胞髓过氧化酶(MPO),ELISA法检测肺组织中TNF-α和IL-10含量,高效液相(HPLC)法测定肺组织中PDE4活性。结果①吡拉米司特(1、3、10mg.kg-1)灌胃给予能够抑制BAL中MPO、O2.的增加,改善LPS诱导的大鼠ALI模型BALF中的炎症细胞聚集和肺水肿程度,②吡拉米司特可抑制LPS诱导的大鼠ALI肺组织TNF-α上升(P<0.05～0.01),并能明显提高LPS引起的大鼠ALI肺组织IL-10分泌下降,③大鼠ALI模型肺组织中PDE4活性明显上升(P<0.01),吡拉米司特预处理可抑制PDE4活性的上升,而且其对PDE4活性抑制性变化与TNF-α/IL-10比值的变化基本一致。地塞米松1mg.kg-1也能降低TNF-α和升高IL-10水平,调节TNF-α/IL-10平衡关系,但DXM不能抑制PDE4活性的升高。结论TNF-α/IL-10可能是ALI病理生理学的一对重要的平衡性细胞因子。吡拉米司特可能通过抑制PDE4活性,调节TNF-α/IL-10平衡改善LPS诱导的大鼠ALI。     

肺泡上皮细胞在肺纤维化中的作用及机制研究进展

肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell,AEC)是肺组织的结构细胞,在肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)发生和发展的过程中起着重要的作用。AEC损伤和凋亡是促进和引起肺纤维增生的原因之一,但并不是PF的必需因素,完整的AEC转染TGF-β1基因后也能诱导PF的发生。体外研究发现,AEC在TGF-β1的诱导下可以向间质细胞转化,但其在PF中所起的作用及分子机制还有待进一步阐明。因此,AEC在PF中的作用与上述因素及其它细胞尤其是成纤维细胞之间的相互作用有关。     

色甘酸钠作用机制的新见解

1965年发现色甘酸钠,这在哮喘病的防治方面无疑是一个重大进展。该药与支气管扩张药不同,它不具有支气管扩张作用,也不能对抗组胺和SRS-A等过敏介质的作用,亦不影响抗原和抗体的结合,但是预先用药可以防止哮喘的速发反应和迟发反应。其作用机理一般认为是通过抑制肺组织肥大细胞的磷酸二酯酶,升高细胞内的cAMP含量而稳定肥大细胞的细胞膜,使钙离子不易进入细胞内,从而防止肥大细胞脱颗粒和释放过敏介质。色甘酸钠对过敏性哮喘的良好预防作用引     

良园枇杷膏对豚鼠气道收缩和炎症反应的作用

目的 :良园枇杷膏 (下简称枇杷膏 )是一个传统的镇咳祛痰复方中成药。本文旨在研究其对气道平滑肌的扩张和抗肺部过敏性炎症的作用。方法 :采用肺功能测定法、离体气管法观察枇杷膏的支气管扩张和抗过敏作用 ;支气管肺泡灌流法观察抗炎作用。结果 :在整体试验中 ,枇杷膏 7.5 g/kg和 15 .0g/kgi.g抑制致敏豚鼠抗原攻击后引起的肺阻力 (RL)增加和动态肺顺应性 (Cdyn)降低 ;抑制支气管肺泡灌流中嗜酸性粒细胞增加 ,ID50 (95 %可信限 )为 1.98(0 .41～ 9.6 4)g/kg ;在离体试验中 ,枇杷膏呈剂量依赖反应松弛豚鼠离体气管平滑肌 ,IC50 (95 %可信限 )为 1.2 3(0 .97～ 1.5 4)× 10 4 g .L 1;抑制Schultz Dale反应 ,ID50 (95 %可信限 )为 4.5 5 (2 .78～ 7.42 )× 10 5g .L 1。结论 :枇杷膏具有支气管扩张和抗肺气道变态反应性炎症作用     

磷酸二酯酶4作为抗炎药物靶点的研究现状及未来发展方向

环腺苷酸(cAMP)-特异性磷酸二酯酶4(PDE4)是目前最热门的药物靶点之一。PDE4抑制剂在临床已表现出对数种炎症性疾病有效,包括哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、过敏性鼻炎和过敏性皮炎等,在动物模型上对其它多种疾病包括关节炎,败血症等也有效。由于有恶心及呕吐等不良反应,进入临床研究的第1代PDE4抑制剂如咯利普兰(rolipram),吡拉米特(piclamilast)已中止研究,但是有数个第2代PDE4抑制剂(如西洛司特和罗氟司特)正在研究和开发中。由于,它们仍不能避免恶心呕吐的不良反应,因此,它们的临床使用受到限制。PDE4家族包括4种亚型。目前正在研发中的PDE4抑制剂一般都不能区别PDE4的亚型。最近,已有一些重要的进展使我们能更好的理解各种亚型的不同作用。PDE4亚型的特异性抑制剂有可能降低药物的不良反应并仍保持药物的抗炎活性,因而有可能开发出比目前正在研制的第2代PDE4抑制剂更好的抗炎药物。     

隐孔菌发酵物对离体中性粒细胞释放白三烯B4和C4及D4的抑制作用

目的 :探讨隐孔菌发酵物 (Cryptoporus volvatus ferment substance,CVFS)对中性粒细胞释放白三烯的影响。方法 :给大鼠腹腔注射糖原诱导中性粒细胞聚集 ,16 h后收集腹腔灌洗液 ,分离中性粒细胞 ,以 calciumionophore A2 3187刺激离体中性粒细胞释放白三烯 ,再用 HPLC法测定中性粒细胞中白三烯 (L T) B4、LTC4和LTD4的含量。结果 :CVFS 0 .2 5、1、4 mg· L-1呈浓度依赖抑制中性粒细胞释放 L TB4、LTC4和 LTD4,对 L TB4抑制率分别为 2 7.4 %、5 4.2 %和 78.8% ;对 LTC4抑制率分别为 6 5 .1%、74 .3和 79.0 % ;对 LTD4抑制率分别为5 5 .6 %、6 0 .9%和 72 .8%。与生理盐水对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 :CVFS抑制中性粒细胞释放LTB4、L TC4和 L TD4可能是其抗炎平喘作用机制之一。     

来氟米特对肝星状细胞增殖和胶原合成的影响

目的:研究来氟米特活性代谢物A771726对肝星状细胞(HSC)增殖和胶原合成的影响.方法:用链蛋白酶和胶原酶原位肝灌注、Nycodenz密度离心法分离大鼠HSC和Kupffer细胞,制备Kupffer培养上清液(KCCM),并以不同浓度、不同培养时间的CCl4损伤的KCCM作为刺激因素观察了A771726对HSC增殖(3H-TdR掺入法)和胶原合成(3H-Pro掺入法)的影响.ELISA法测定KCCM内TGF-β、TNF-α和IL-1含量.结果:HSC和Kupffer细胞得到较好的分离.CCl4损伤的KCCM显著增加HSC增殖和胶原合成,并且稀释度为1:2的KCCM在培养7 d时,对HSC增殖和胶原合成的刺激作用明显.A771726(0.001～10 μmol/L)对CCl4损伤的KCCM刺激HSC增殖和胶原合成有不同程度的抑制作用,并且A771726(0.001～10 μmol/L)明显抑制CCl4损伤KCCM内升高的TGF-β、TNF-α和IL-1水平.结论:CCl4损伤的KCCM可明显刺激HSC增殖和胶原合成,而A771726对此有明显的抑制作用,并且与其抑制致HSC激活的因子如TGF-β、TNF-α和IL-1分泌有关.