雷公藤内酯醇联合紫杉醇对COC1/DDP细胞凋亡的影响及其对PI3K/AKT/GSK3β信号通路的调控

目的：通过研究雷公藤内酯醇（TP）联合紫杉醇对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞（COC1/DDP细胞）凋亡的影响,以探讨两药联合对COC1/DDP细胞作用的机制。方法：将对数生长期COC1/DDP细胞随机分为6组：空白对照组、紫杉醇组（3.13μg/ml）、LY294002组（10μmol/ml）、TP组（10ng/ml）、LY294002＋紫杉醇组（10μmol/ml LY294002＋3.13μg/ml紫杉醇）、TP＋紫杉醇组（10ng/ml TP＋3.13μg/ml紫杉醇）。采用MTT法检测各组的细胞增殖活性;普通光镜及AO/EB染色荧光显微镜观察细胞形态的变化;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测各组细胞中Akt、pAkt、GSK3β、p-GSK3β蛋白的表达变化。结果：（1）细胞增殖抑制率：TP＋紫杉醇组显著高于TP、紫杉醇组（P〈0.05）;LY294002＋紫杉醇组显著高于LY294002、紫杉醇组（P〈0.05）。联合用药组中,TP＋紫杉醇组显著高于LY294002＋紫杉醇组（P〈0.05）;单用药组中,TP组〉紫杉醇组〉LY294002组（P〈0.05）。各组抑制率均呈时间依赖性（P〈0.05）。（2）普通光镜及AO/EB染色荧光显微镜下观察,除空白组外,各用药组的细胞形态均有凋亡样改变。两联合用药组的细胞凋亡数显著高于各自单药组,TP＋紫杉醇组高于LY294002＋紫杉醇组;单用药组的细胞凋亡数：TP组〉紫杉醇组〉LY294002组。（3）流式细胞仪检测发现,两联合用药组的细胞凋亡率大于各自单药组（P〈0.05）。联合用药组中,TP＋紫杉醇组凋亡率显著高于LY294002＋紫杉醇组（P〈0.05）;单药组的细胞凋亡率为：TP〉紫杉醇〉LY294002（P〈0.05）。（4）p-Akt蛋白和p-GSK3β蛋白的表达从空白对照组→紫杉醇组→LY294002组→TP组→LY294002＋紫杉醇组→TP＋紫杉醇组,呈逐渐减少的趋势,而总Akt、GSK3β蛋白的表达不变。结论：TP可协同紫杉醇促进COC1/DDP细胞凋亡,其机制可能是通过抑制PI3K/Akt/GSK3β信号通路,从而下调了耐药相关蛋白p-Akt、p-GSK3β的表达。     

有限元法分析不同粘结剂厚度对全瓷冠应力分布的影响

目的：探讨不同粘结剂厚度对双层结构的全瓷冠及粘结剂应力分布的影响.方法：利用螺旋CT断层图像,构建双层结构的全瓷冠（核瓷层和饰瓷层）,粘结剂层,牙体组织,牙根,牙周膜,牙槽骨各部分的三维有限元模型,设计垂直集中载荷600 N的加载方式,分析不同厚度的粘结剂粘固后核瓷层、饰瓷层及粘结剂层的应力大小及分布状况.结果;核瓷层应力主要集中在核瓷内部,饰瓷层应力主要集中在加载点附近,粘结剂层应力主要集中在近中颊侧肩台和腭侧面近殆面部分.随着粘结剂厚度由50 μm增加到140 μm时,位于饰瓷层、核瓷层和粘结剂层的最大主应力呈现逐渐上升的趋势.结论：临床上应尽量保证全瓷冠与牙体组织的贴合,以减小分布在双层结构全瓷冠和粘结层上的应力,提高全瓷冠的抗折能力.     

印度式手法小切口白内障摘除术的临床实用性

目的:探讨印度式手法小切口白内障摘除术的临床实用性.方法:实验组46眼(46例)行手法小切口白内障摘除术,对照组52眼(52例)行超声乳化白内障吸除术,均联合人工晶状体植入术,比较两组术后视力、手术源性散光、并发症差异.结果:术后3mo,实验组平均手术源性散光为-0.53±0.14D,而对照组为-0.48±0.1 0D,差异无显著性(P＞0.05).两组术后3mo视力分别为0.71±0.14和0.72±0.12,差别无统计学意义(P＞0.05).结论:手法小切口白内障摘除术是一种简单易行、学习曲线短、效果理想的白内障手术方式.     

药品杂质控制与评价研究进展

杂质作为影响药品安全有效性的关键因素,一直是药品质量研究、安全性评价的重点。本文围绕药品杂质控制与杂质的安全性评价2个方面,对杂质谱研究、杂质毒理学评价、杂质对照品制备等热点领域的研究现状进行了综述。     

应用蛋白质组学技术筛检肝癌血清差异蛋白质并分离鉴定阿朴脂蛋白AⅡ

Objective To screen differential proteins in serum from hepatocellular carcinoma (HCC) patients by Proteomic Technology and to purify and identify them. Methods Surface enhanced laser desorp-tion Ionization time of flight-mass spectrum (SELDI-TOF-MS) was employed to screen differential proteins in serum from 33 HCC patients and 33 control cases, and then to purify and identify them using isoelectric precipitation, Tricine sodium dodecyl sulphate ployacrylamide gel electrophoresis (Tricine-SDS-PAGE) and high performance liquid chromatography tandem Mass Spectrum (HPLC-MS). Result 65 protein peaks in the range of relative molecular weight from 2000 to 10 000 were found significant difference (P < 0.05) between the patient group and control group. Based on these differential protein peaks, diagnostic model for HCC detection was established and its sensitivity and specificity were 100% and 96.97 % respectively. Proteins with 8706.5 and 8579.2 relative molecular weights (the t value was 2.562 and 2.783 respectively, and P value was 0.013 and 0.015 respectively) out of the 65 differential proteins were purified and identified, and then recognized as Apolipoprotein A Ⅱ (Apo AⅡ). Conclusion Apo A II is probably a differential protein of HCC and maybe related to the pathogenesis of HCC.     

断腕合并多指离断再植成功一例

患者男,19岁,2007年10月23日工作时被冲床冲压伤致右腕关节离断合并2～5指离断,伤后1 h入院.查体:右腕自近侧列腕骨完全离断;示、中、环指均于近节近端完全离断,示、中指指蹼相连,小指于甲根部以远离断并毁损.人院时生命体征平稳,即在全身麻醉下行清创再植术.     

国人腹主动脉瘤累及髂动脉的解剖学特征与髂动脉分支支架适用性：单中心58例分析

目的:通过单中心临床调查,分析腹主动脉瘤(AAA)累及髂动脉国人患者的髂动脉解剖学特点与髂动脉分支支架(IBD)适用性的关系。方法:回顾性分析2015年7月—2017年3月复旦大学附属中山医院血管外科58例累及双侧或单侧髂总动脉的AAA患者,利用3D工作站分析其影像学资料,并进行相关数据测量分析,结合基于解剖特点的使用标准,分析两款IBD(Cook IBD,Gore IBE)在患者中的适用性及其限制因素。结果:58例AAA患中,49例累及双侧髂总动脉,9例累及单侧髂总动脉。病变髂总动脉的平均长度分别为左侧(57.9±18.1)mm,右侧(56.7±17.4)mm,平均最大直径分别为左侧(17.7±7.2)mm,右侧(25.1±9.4)mm。根据两款支架使用标准,Cook IBD与Gore IBE治疗病变髂动脉的适用比率分别为26.1%(28/107)、20.6%(22/107)。Cook IBD最主要的限制因素是髂内动脉直径6或9 mm(50/107,46.7%);Gore IBE最主要的限制因素是髂总动脉直径25 mm(67/107,62.6%)。结论:基于解剖标准的IBD在AAA累及髂动脉国人患者中适用性较低,髂总动脉和髂内动脉直径的不符合是其主要限制因素。     

分泌型血管内皮抑素重组腺病毒的构建及其在基因治疗载体肝干细胞中的表达

肝干细胞具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能,研究表明肝干细胞为良好的治疗载体细胞,广泛应用于生物型人工肝、肝细胞移植以及先天性代谢性肝病的基因治疗,而近年其在肝癌治疗中的潜力也备受关注.     

载体肝干细胞分泌表达的Endostatin对血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的观察携带内皮抑素基因的载体肝干细胞分泌表达的内皮抑素蛋白（Endostatin,ES）对血管内皮细胞体外增殖和凋亡的影响。方法体外扩增培养本室构建的携带内皮抑素基因的载体肝干细胞WB-ES,收集合有分泌型Endostatin的上清液。将人脐静脉内皮细胞ECV304体外增殖培养,加入不同浓度的含倍比稀释Endostatin的上清液,在不同的作用时间（24、48、72h）,通过四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）检测细胞生长抑制率。采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,分析载体肝干细胞WB—ES分泌表达的Endostatin对ECV304的增殖和凋亡的影响。结果载体肝干细胞胞外表达的Endostatin对人脐静脉内皮细胞ECV304生长有显著抑制作用,48h作用达到高峰,随浓度增加抑制作用增强;Endostatin作用的实验组,G1期细胞比例增加,s期细胞数下降,抑制细胞生长的机制可能主要是通过对细胞增殖的影响（P〈0．05）;实验组细胞存在细胞凋亡增加现象,但与对照组比较凋亡率差异无统计学意义。结论携带内皮抑素基因的载体肝干细胞WB-ES胞外表达的Endostatin在体外可有效抑制血管内皮细胞增殖,载体肝干细胞WB-ES有望成为靶向抗肿瘤血管生成的肝癌基因治疗载体细胞。     

超声诊断阑尾切除术后继发脾脓肿1例

患者男,48岁,腹痛5h。体格检查：体温38．4℃,全腹压痛,腹肌紧张,以中上腹为主,反跳痛阳性。右下腹诊断性穿刺抽出1ml黄色黏稠脓液。实验室检查：白细胞11．3×10^9／L,中性粒细胞86％。初步诊断：弥漫性腹膜炎,怀疑空腔脏器穿孔。行剖腹探查：未见阑尾充血水肿,张力高,呈急性炎症。距离回盲部约50cm处有一麦克尔憩室,下腹部有黄色黏稠脓液,约100ml。病理诊断：粪石性阑尾炎急性发作,憩室并胃黏膜异位。