大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养与CM-DiI荧光标记

背景：目前,对骨髓间充质干细胞的分离、纯化和扩增还没有统一的、标准化的方法。CM-DiI作为荧光标记物稳定、可靠、标记率高、标记简便。 目的：建立SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养及标记的方法。 方法：取2只体质量50-100 g雄性SD大鼠,无菌条件下采集双侧股骨、胫骨骨髓,用全骨髓贴壁分离法和密度梯度离心法培养出原代骨髓间充质干细胞,通过及时、反复传代对细胞进行扩增纯化,在体外用荧光活性染料CM-DiI标记第3代骨髓间充质干细胞后作为供体细胞来源。 结果与结论：用全骨髓贴壁分离法和密度梯度离心法两种方法均能成功体外分离培养骨髓间充质干细胞,经流式细胞仪分析,培养出的细胞CD34阳性率为17.5%,CD44阳性率为97.9%、CD90阳性率为91%,与骨髓间充质干细胞表面抗原一致。但培养出的细胞数量全骨髓贴壁分离法明显多于密度梯度离心法,两种方法培养骨髓间充质干细胞的细胞活力和增殖能力无明显差异。CM-DiI能够成功荧光标记骨髓间充质干细胞,CM-DiI作为荧光标记物稳定、可靠、标记率高、标记简便。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

5-氮胞苷诱导和未诱导骨髓间充质干细胞移植入梗死心肌后心功能变化的比较

背景:已证实在体外经5-氮胞苷诱导后,骨髓间充质干细胞可向类心肌细胞转化,但移植这种经诱导的髓间充质干细胞是否更有利于急性心肌梗死后心功能改善,尚有争议.目的:对比观察经5-氮胞苷诱导和末经诱导的骨髓间充质干细胞移植入急性心肌梗死组织后心功能的变化.方法:开胸结扎左冠状动脉前降支建立新西兰兔急性心肌梗死模型,分别在心肌梗死组织周边区注射PBS,经5-氮胞苷诱导或未诱导的兔骨髓间充质干细胞.移植后3 d、4周超声心动图测定左室舒张末期容积,左室收缩末期容积及射血分数以评价心功能变化.结果与结论:兔前降支结扎后,心功能明显下降;移植3 d后,各组动物左室舒张末期容积、左室收缩末期容积及射血分数均无显著芹异,说明无论是否在体外经5氮胞苷诱导过,骨髓间充质干细胞移植短期对兔心功能无明显改善;移植4周后,与注射PBS的动物比较,移植骨髓间充质干细胞可降低心肌梗死兔的左室舒张末期容积、左室收缩末期容积,提高射血分数,但骨髓间充质干细胞在体外是否经5-氮胞苷诱导对心功能改善程度无影响.     

戒烟对冠心病患者血脂、血液流变学及颈动脉内膜中层厚度的影响

目的 了解冠心病患者戒烟后不同时期的血脂度、血液流变学及颈动脉内膜中层厚度的变化。方法 90例经冠脉造影确诊为冠状动脉粥样硬化性心脏病的并合吸烟史男性患者,分为吸烟组,戒烟组,每组45例。分别在戒烟前、3个月及1年后对血脂、血液流变学指标及颈动脉内膜中层厚度进行组间及组内自身对照比较。结果 戒烟3个月后血脂开始变化,1年后较戒烟前及吸烟对照组有明显改善,差异有显著性(P<0 05)。1年后血液流变学大部分指标较戒烟前及吸烟对照组显著改善(P<0 05)。颈动脉内膜中层厚度戒烟3个月后较吸烟组未见有明显变化（0. 896 ±0. 213 vs 0. 918 ±0. 157 P>0.05）,但12个月后指标较戒烟前及吸烟对照组显著改善（0. 806 ±0. 135 vs 0. 854 ±0. 162 P<0 05)。结论 戒烟对冠心病患者血脂,尤其对高密度脂蛋白胆固醇及血液流变学改善呈持续有益作用,较短时间戒烟不能改善颈动脉内膜厚度,但戒烟一年后颈动脉内膜厚度有逆转性改变。     

经5-氮胞苷诱导后的骨髓间充质干细胞心肌移植后对心功能的影响

背景：骨髓间充质干细胞具有多分化潜能,但其在体外经5-氮胞苷诱导后移植于急性心肌梗死大鼠中,能否改善近期及远期的心功能,目前尚不明确。 目的：观察兔骨髓间充质干细胞移植入急性心肌梗死组织后对心功能的影响。 方法：分离培养兔骨髓间充质干细胞,5-氮胞苷诱导4周后,体外DAPI标记。新西兰兔随机均分3组,假手术组：打开胸腔1 h后缝合胸腔;骨髓间充质干细胞组：于冠状动脉结扎建立急性心肌梗死模型后1 h在梗死周边区用微量注射器分4点注射诱导后的自体骨髓间充质干细胞;急性心肌梗死组：造模后于相同部位注射等量生理盐水。移植后3 d,4周超声心动图检测各组大鼠左室舒张末期容积,左室收缩末期容积及射血分数变化。 结果与结论：荧光显微镜观察发现,骨髓间充质干细胞组移植后3 d,4周心脏标本中均发现有DAPI标记的阳性细胞,呈散在分布于瘢痕周边区并沿心肌纤维排列方向走行。移植后3 d,骨髓间充质干细胞组与急性心肌梗死组相比,左室舒张末期容积、左室收缩末期容积及射血分数无明显差异,心功能没有明显的改善;移植4周后,骨髓间充质干细胞组与急性心肌梗死组相比,射血分数明显提高,左室舒张末期容积、左室收缩末期容积明显降低。     

布鲁氏菌性脊柱炎规范化诊断的临床研究

目的探讨布鲁氏菌性脊柱炎(BS)规范化的诊断流程。 方法选择2008年1月至2021年3月河北北方学院附属第一医院骨科收治的116例BS患者，回顾性分析其临床表现、流行病学史、影像学检查、实验室检查、病原学及病理学检查结果，总结BS的诊断学特征。依据有无手术，分为非手术治疗组(n＝42)和手术治疗组(n＝74)，分析两组患者治疗后3个月、6个月、12个月的临床疗效。 结果116例患者均有布鲁氏菌病流行病学史，临床表现为弛张热、腰痛、日常生活能力受限。脊柱X线显示早期骨质破坏、椎间隙狭窄，后期骨质修复反应强烈呈"鸟嘴征"；CT显示椎间盘等密度均匀破坏、"唇样"骨赘、"花边椎"和椎旁脓肿；MRI显示椎间盘"中央裂隙征"消失、脊髓或硬膜囊受压、椎旁脓肿、椎体Schmorl结节样骨破坏。虎红平板凝集试验(RBPT)阳性率37.07%(43/116)，血清试管凝集试验(SAT)阳性率69.86%(51/73)，抗人球蛋白试验(Coomb′s检测)阳性率100.00%(22/22)。布鲁氏菌培养呈现无色透明的S型菌落，镜下表现为革兰氏阴性小杆菌且吉姆染色呈紫色；血培养阳性率17.24%(20/116)，骨髓培养阳性率37.50%(36/96)，病灶炎性组织或脓液培养阳性率51.35%(38/74)。74例手术患者病理学特征性表现为病变中心区有非结核性炎性肉芽肿，周边区有增殖性结节。两组患者治疗后3个月、6个月、12个月均无并发症，无复发、无肝肾功能损害，随着时间的推移，治愈率均逐渐提高。 结论BS流行病学史、临床影像学表现、实验室检测、病原学和病理学检查均有特征性表现；规范化诊断体系的建立和诊断标准的制定有助于提高诊断率和鉴别诊断，且正确的诊断是正确实施个体化治疗的前提。     

冠心病介入诊疗术血管并发症的原因分析与护理

回顾性分析了29例冠心病介入诊疗术血管并发症的原因与护理经过，提出在护理此类病人时．术前做好充分地准备及有针对性的心理护理；术中和术后医护密切配合．严密观察心电监护及穿刺处有无肿胀，及早判断出血及皮下血肿等症状的发生是预防或减少血管并发症发生的关键。     

5A干预法对冠心病患者戒烟成功率的影响

目的研究5A干预法对冠心病患者戒烟成功率的影响。方法使用5A干预法和常规干预法分别对200例冠心病患者进行戒烟,评价其对戒烟成功率的影响。结果使用5A干预法观察组近期戒烟成功144例(72%),对照组戒烟成功106例(53%);观察组中期戒烟成功128例(64%),对照组中期戒烟成功76例(38%);观察组远期戒烟成功112例(56%),对照组远期戒烟成功36例(18%),2组患者戒烟成功率差异有统计学意义(p<0.01)。结论与常规干预法比较,5A干预法可显著提高冠心病患者的戒烟成功率。     

雷米普利对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中一氧化氮和内皮型一氧化氮合酶活性的影响

目的 探讨雷米普利对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中一氧化氮(NO)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、野百合碱组、雷米普利组(n=20).野百合碱组和雷米普利组一次性颈部注射野百合碱60mg/kg后,雷米普利组用雷米普利灌胃4周,野百合碱组生理盐水灌胃4周;对照组颈部注射生理盐水后再用生理盐水灌胃4周.4周后测定大鼠的右室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),运用图像分析软件测定肺小动脉管壁厚度(WT)占动脉外径(ED)的百分比(WT%)及管壁面积(WA)占血管总面积的百分比(WA%);检测肺组织中NO浓度.Western blotting分析肺组织中eNOS、P-Ser1177-eNOS的表达和蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平.结果 与正常对照组相比,野百合碱组RVSP、RVHI、WT%、WA%明显升高(P<0.05),肺组织中NO浓度、eNOS、P-Ser1177-eNOS和Akt磷酸化水平显著降低(P<0.05);雷米普利干预后RVSP、RVHI、、WT%、WA%明显降低(P<0.05),肺组织中NO浓度、eNOS、P-Ser1177-eNOS和Akt磷酸化水平明显升高(P<0.05).结论 雷米普利可抑制野百合碱诱导的肺动脉高压及肺血管重构,机制可能与其能使eNOS活性和NO生成增加有关.     

雷米普利对肺动脉高压大鼠血管紧张素-(1-7)浓度的影响

目的 探讨雷米普利对野百合碱（MCT）诱导的肺动脉高压大鼠血浆中血管紧张素-（1-7）[Ang-（1-7）]浓度的影响.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、MCT组和雷米普利组.MCT组和雷米普利组一次性颈部注射MCT 60 mg/kg后,雷米普利组给予雷米普利灌胃,MCT组用生理盐水灌胃.对照组颈部注射生理盐水后,用生理盐水灌胃.三组大鼠给予雷米普利或生理盐水2周和4周后,测定大鼠的右室收缩压（RVSP）和心室重量变化,测定肺小动脉管壁厚度（WT）占动脉外径（ED） 的百分比（WT%）及管壁面积（WA）占血管总面积的百分比（WA%）.采用酶联免疫分析（ELISA）检测各组大鼠血浆中Ang-（1-7）的浓度.结果 野百合碱诱导2周后,MCT组与对照组相比,RVSP、各心室的重量无明显变化,WT%、WA%以及Ang-（1-7）的浓度显著升高;野百合碱诱导四周后,MCT组与对照组相比,RVSP、各心室的重量、WT%、WA%和Ang-（1-7）的浓度显著升高.野百合碱诱导2周和4周后,雷米普利组与MCT组相比,Ang-（1-7）的浓度显著升高,其他指标与对照组相比无明显的差异.结论 对野百合碱诱导的肺动脉高压模型,雷米普利可预防肺动脉高压的发生,其机制可能与升高血浆中Ang-（1-7）浓度有关.