寡聚态β-淀粉样肽1～42可通过胶质-炎症反应损伤神经元

目的 观察寡聚态β-淀粉样肽1～42(Oligo-Aβ1～42)诱导的小胶质细胞条件培养液对Neuro-2A神经元细胞的影响,探讨炎症介质在胶质介导的神经元损伤中的作用.方法 以Oligo-Aβ1～42诱导BV-2细胞,制备小胶质细胞条件培养液,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定Neuro-2A神经细胞的活力,AO-EB染色荧光显微镜观察计数细胞凋亡和坏死率;酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定小胶质细胞培养上清中的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)及前列腺素E2(PGE2)水平;Griess法检测上清NO水平;免疫印迹法测定小胶质细胞胞质环氧合酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平.结果 Oligo-Aβ1～42诱导的小胶质细胞条件培养液(Aβ-CM)明显引起Neuro-2A神经细胞损伤,MTF法显示神经元活力随Aβ诱导剂量的增加而逐渐下降(P<0.01),并且浓度为1.0μmol/L和5.0μmol/L的Aβ-CM组比同浓度Aβ单纯组神经细胞的存活率更低,分别为(53.75±3.95)%和(34.61±2.72)%(Aβ-CM组与Aβ单纯组相比P<0.05,P<0.01);联合作用组(Aβ-CM+Aβ)神经细胞存活率下降更明显,两因素方差分析显示,Aβ诱导的小胶质细胞条件培养液与单纯Aβ(1.0μmol/L)有协同作用[F(3.39)=53.16,P<0.001].AO-EB荧光观察计数显示,低浓度(0.2μmol/L)Oligo-Aβ1～42诱导的小胶质细胞条件培养液可引起神经细胞发生凋亡性损伤,较高浓度(1.0～5.0μmol/L)Oligo-Aβ1～42诱导不仅引起神经细胞凋亡,还引起细胞发生坏死性改变.进一步研究显示,低浓度(0.2～5.0μmol/L)的Oligo-Aβ1～42明显增加小胶质细胞培养上清中TNF-α、PGE2、NO的产量及胞质COX-2和iNOS蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),呈现一定的量效关系.结论 低浓度Oligo-Aβ1～42可通过胶质-炎症反应加剧神经元损伤,其作用可能与Oligo-Aβ1～42诱导小胶质细胞产生炎症介质及胞质内COX-2、iNOS蛋白表达水平增高有关.     

大鼠背根节神经元膜电位振荡引发重复放电

在新鲜分散的大鼠背根节神经细胞，运用全细胞膜片钳技术，观察到胞内去极化刺激引起重复放电之前，膜电位发生低幅、高频的不规则振荡。TTX可消除重复放电，保留膜电位振荡、无Ca2 或钙通道阻断剂Co2 在抑制膜电位振荡的同时也消除重复放电。实验还显示膜电位振荡引发重复放电的动态过程。结果表明，背根节神经细胞在缓慢或相对平稳去极化过程产生的膜电位振荡可以引发重复放电。     

肺心病患者血清肿瘤坏死因子α测定及其意义

目的：探讨血清肿病坏死因子α在COPD合并肺心病的作用。方法：COPD（慢性阻塞性肺疾病）缓解期患者16例，急性发作期20例；肺心病缓解期14例，急性发作期46例；正常对照组50例，肺心病急性发作期患者又依NYHA心功能分级分为4组，用放射免疫法测定血清的TNFα水平。结果：COPD缓解期组，肺心病缓解期组TNFα明显高于正常对照组。COPD急性发作期组，肺心病急性发作期组TNFα又分别明显高于其缓解期。肺心病急性发作期组随着心功能不全的加重TNFα又逐级显著升高。结论：TNFα可作为衡量COPD、肺心病及心功能严重程度及判断预后的辅助指标。     

谈分组式教学在《护理研究》教学中的应用

21世纪,我国护理教学改革已经进入了新的发展时期,尤其是国家教育部和卫生部联合组织的《面向21世纪高等医学教育课程体系建设和改革》课题的广泛实施,极大地促进了医学和护理教育的发展[1]。高等护理教育课程作为达到教育目的的主要手段,必须加以改革与创新,要着眼于21世纪发展趋势与要求,以学生的发展为本,把学生身心全面发展和个性、潜能发展作为核心,充分借鉴已有的课程改革实践经验和成果,培养符合21世纪需要的高层次护理人才[1]。在当前推行以人为本的整体护理背景下,现代护理教育越来越重视培养学生的探索精神、科研精神、创新精神,…     

脐血干细胞移植治疗肝功能衰竭及心肌损害的临床与实验研究

目的探讨脐血干细胞移植(UCBSCT)治疗合并心肌损害的重型肝炎肝功能衰竭的疗效并与无心肌损害的重型肝炎患者及成人新鲜血浆的疗效进行比较。观察UCBSCT治疗大鼠肝功能衰竭的效果。方法83例有(或无)心肌损害的重型肝炎患者分为4组,各组分别采用UCBSCT或成人新鲜血浆治疗。观察各组患者治疗前后肝功能及心肌酶学指标的变化并进行比较。动物实验用四氯化碳诱导急性肝损伤模型,分别自大鼠尾静脉输注等渗盐水、脐血清及脐血干细胞。分批将鼠杀死并取肝脏组织用免疫组织化学方法检测人肝细胞甲胎蛋白和白蛋白的表达及聚合酶链反应(PCR)检测人DNA的存在。结果UCBSCT改善肝脏功能的疗效明显优于成人新鲜血浆。心肌损害对于UCBSCT治疗重型肝炎的疗效无明显影响。UCBSCT对于患者的心肌损害也有一定的改善作用。动物实验中输注脐血干细胞后21d和1个月的大鼠肝脏中可见人甲胎蛋白和白蛋白表达;PCR方法可以扩增出人特异的DNA片段。结论UCBSCT对于重型肝炎具有较好的疗效,同时可以减轻患者合并的心肌损害。动物实验提示脐血干细胞可以减轻肝脏损害及促进肝细胞再生,人脐血干细胞可以在急性肝损伤的SD大鼠体内分化为肝细胞。     

人胚胎原始生殖细胞移植治疗大鼠急性肝损伤

目的:胚胎原始生殖细胞能以原始胚胎状态无限增殖,并可通过异体移植或适宜的体外环境自然分化为胚胎生殖层.实验拟进一步观察体外培养的胚胎原始生殖细胞对急性肝损伤大鼠的治疗效果,及其能否在大鼠体内分化为肝细胞.方法:实验于2003-09/2005-05在中南大学肝病研究所完成.①细胞及动物:经中南大学湘雅二医院医学伦理委员会批准,取孕4～12周流产人胚胎,其双亲3代内无遗传性疾病,孕妇对流产胚胎用于实验均签署知情同意书.清洁级健康成年SD大鼠50只,随机数字表法分为5组:培养基对照组、单纯人胚原始生殖细胞组,人胚原始生殖细胞 环磷酰胺组、单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞 环磷酰胺组,10只/组.另选取健康成年SD孕鼠4只用于分离鼠胚原始生殖细胞.动物均由中南大学湘雅二医院动物实验中心提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.②实验方法:从人胚胎中分离出原始生殖嵴组织,悬浮培养获取人胚原始生殖细胞,用含15%胎牛血清的高糖DMEM基础培养基调节细胞浓度至1×108L-1.取SD孕鼠胚胎分离牛殖嵴,消化离心培养鼠胚原始生殖细胞,浓度1×108L-1.各组大鼠均于腹腔内注射D-氨基半乳糖建立急件肝损伤模型,造模后48 h,培养基对照组自尾静脉输注基础培养基,其余4组给予对应细胞悬液及免疫抑制荆环磷酰胺.③实验评估:从细胞形态、表面标记及体外分化等方面检测人胚原始生殖细胞的生物学特性;比较各组大鼠肝功能、增殖细胞核抗原阳性率、糖原染色阳性率、肝脏病理改变;检测各组大鼠肝脏病理切片中人白蛋白、甲胎蛋白的表达.结果:①人胚原始生殖细胞的生物学特性:培养1d后单个原始生殖细胞形成细胞集落,以后集落逐渐增大并隆起,形成鸟巢状,周边界限清晰,内部细胞排列紧密.传代后原始生殖细胞集落呈自发分化趋势,周边出现成纤维样细胞,最后分化为梭形细胞、多边形细胞等.原代全第3代未分化的人胚原始牛殖细胞集落碱性磷酸酶染色均呈阳性,分化的细胞及成纤维细胞呈阴性.②肝功能榆测:细胞输注前各组内氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素水平均基本相似(t=0.361～1.183,P均＞0.05).输注后7 d与培养基对照组比较,单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞 环磷酰胺组上述3项指标水平均明显降低(t=2.532～8.361,P均＜0.05):后两组间比较差异无显著性意义(t=0.340～1.712,P均＞0.05).③增殖细胞核抗原阳性率:细胞输注后7d与培养基对照组比较,单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞 环磷酰胺组的增殖细胞核抗原阳性率均明显升高(t=9.020～10.747,JP均＜0.001):后两组间比较差异无显著性意义(t=0.752,P=0.462).④糖原染色:细胞输注后7 d,培养基对照组着色相对浅淡,呈细颗粒状,;单纯鼠胚原始牛殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞 环磷酰胺组着色相对深粗,呈斑块状聚集.⑤病理检测:细胞输注后7 d,培养基对照组肝索、肝窦结构排列欠规则,坏死区可见少量肝细胞再生,汇管区有大量炎症细胞浸润;单纯鼠胚原始生殖细胞组、鼠胚原始生殖细胞 环磷酰胺组各项病理情况均显著改善.⑥大鼠肝组织人白蛋白、甲胎蛋白的表达:细胞输注后14,21 d,单纯人胚原始生殖细胞组、人胚原始生殖细胞 环磷酰胺组表达人白蛋白及甲胎蛋白阳性细胞,培养基对照组未见表达.结论:①胚胎原始生殖细胞移植有利于激发急性肝损伤大鼠肝细胞的增殖,改善肝功能,加速受损肝细胞的病理修复.②胚胎原始生殖细胞可在受体肝脏组织中生存,并分化为具有合成白蛋白及甲胎蛋白功能的肝细胞样细胞.     

骨科手术患者运动康复恐惧现状及影响因素分析

目的 调查骨科手术患者运动康复恐惧现状，并分析其影响因素。方法 采用便利抽样法，选取2021年1月至2023年1月本院收治的206例术后患者作为研究对象。收集患者一般人口学资料、恐动症评估量表评分、疼痛评分、医院焦虑抑郁量表评分、医学应对方式评分、家庭关怀度评分，采用单因素和Logistic回归分析患者发生恐动症的影响因素。结果 恐动症的发生率为39.3%，家庭月收入、疼痛评分、焦虑、抑郁、回避、屈服、家庭关怀度是患者发生恐动症的影响因素（P<0.05）。结论 家庭月收入、疼痛评分、焦虑、抑郁、回避、屈服、家庭关怀度是患者发生恐动症的影响因素。     

异搏定对炎症状态下多觉型伤害性感受器持续放电的抑制作用

实验采用大鼠足底部急性炎症条件下多觉型伤害性感受器（ｐｏｌｙｍｏｄａｌｎｏｃｉｃｅｐｔｏｒ，ＰＭＮ）持续放电模型，观察Ｃａ｜２＋通道阻滞剂异搏定对待续放电的影响。结果表明，不同浓度的异搏定（０．１．１．０和２．５ｍｍｏｌ／Ｌ）对待续放电产生剂量依赖性抑制作用（ｐ＜００１），随着浓度的升高，抑制程度逐渐加深，时间逐渐延长。揭示炎症条件下ＰＭＮ持续放电的产生可能与Ｃａ离子通道的活动有关。     

老年慢性阻塞性肺病血白介素-8、肿瘤坏死因子、内皮素临床研究

目的　研究老年慢性阻塞性肺病血白介素 - 8、肿瘤坏死因子、内皮素 - 1含量与肺功能的关系。方法　采用特异性放射免疫技术测定老年慢性阻塞性肺病 (COPD)急性期 30例 ,缓解期 2 6例和健康对照组 2 0例血白介素 - 8(IL - 8)、肿瘤坏死因子 (TNFα)、内皮素 - 1 (ET- 1 )含量 ,同时测定肺功能。结果　老年 COPD急性期 IL- 8含量 (2 4 6.2± 76.3 pg/ml)、TNFα含量 (37.42± 5.42 pmol/L)、ET- 1含量 (78.2 7± 7.82 ng/L)显著高于缓解期 (IL- 81 2 0 .4± 34.2 ,TNFα 2 9.2 4± 4.32 ,ET- 1 65.2 3± 7.42 ,P<0 .0 1 )和对照组 (IL- 82 5.81± 1 7.2 ,TNFα 1 5.40± 6.78,ET- 1 34.1 1±9.78,P<0 .0 1 )。缓解期和对照组 IL- 8、TNFα、ET- 1之间有显著性 (P<0 .0 1 )。 IL- 8含量与第 1秒钟用力呼气容积占用力肺活量比值 (FEV1 %) ,最大呼气中段流速 (MMEF)呈负相关 (r=- 0 .64,r=- 0 .58,P<0 .0 1 )。 TNFα含量与 FEV1 %、MMEF呈负相关 (r=- 0 .72 ,r=- 0 .68,P<0 .0 1 )。ET- 1水平与 FEV1 %、MMEF呈负相关 (r=- 0 .82 ,r=- 0 .83,P<0 .0 1 )。结论　 IL- 8、TNFα、ET- 1和老年 COPD发病有关 ,并影响肺功能。     

清热消炎宁胶囊治疗慢性咽喉炎的临床观察

慢性咽喉炎是临床常见病,在南方地区一年中大部分时间都是多发病。笔者于2004年1-8月应用广州敬修堂药业股份公司生产的清热消炎宁胶囊治疗慢性咽喉炎50例,取得满意疗效,现报道如下。一般资料:经门诊确诊符合诊断的慢性咽喉炎86例,随机分为治疗组和对照组。治疗组50例,其中男22例,女28例,平均年龄34．10±10．09岁,平均发病天数2．21±1．03